Az alvó perimenopauzális petefészektüszők FSH-re reagálóvá válhatnak?

Bevezetés A nők átlagosan 51 éves korukban abbahagyják a menstruációt, de 40 éves kor felett sokkal ritkábban fordul elő a terhesség, és a 43 éves terhesség viszonylagos ritkaság. A jelenlegi általános felfogás a termékenység visszaesését az őstüszők készletének kimerülésének tulajdonítja (Burger et al. 2008). A termékenység csökkenése nem feltétlenül a primordiális tüszőkészlet éles kimerüléséből fakadhat (Hansen és mtsai, 2008), hanem a primordiálisról az antralisra való megfelelő átmenet kudarcából, a gonadotropinra reagáló tüszőkből. Nem ritkán találkozni harmincas évei végén vagy negyvenes éveiben járó termékenységi beteggel, aki nem reagálna a legszélsőségesebb exogén FSH dózisokra, de ennek ellenére 50 éves koráig menstruál. A szokásos gyakorlat az, hogy ezeket a betegeket petesejtek adományozási programokba utalják.

Nemrég Li és mtsai. (2010) kimutatták, hogy az újszülött egér petefészek-fragmenseinek inkubálása a 10-es kromoszóma foszfatázból (PTEN) törölt TENsin-homológiájú foszfatáz inhibitorral és egy PI3K-t aktiváló peptiddel, növelte a Foxo3 nukleáris kizárását, és nagyszámú alvó tüszővé vált FSH-t. - reagáló antrális tüszők. Továbbá a meztelen egerek modelljében (immunrendszerhiányos egerek) kimutatták, hogy a műtéti mintákból származó, főként primordiális tüszőket tartalmazó transzplantált humán petefészek-fragmensek, amelyeket ugyanazzal az inkubációval kezeltek, alvó tüszőket is aktiváltak, így érett petesejteket tartalmazó preovulációs tüszők származnak.

A fentiek alapján feltételezzük, hogy a perimenopausalis korban lévő nők petefészkei FSH-reszponzívvá válhatnak, ha PTEN inhibitorral és PI3K-t aktiváló peptiddel inkubálják a szunnyadó primordiális tüszőket.

Ha megvalósíthatónak találják, ez a technika reményt adhat a termékenység elérésére azoknak a betegeknek, akik egyébként petesejtek adományozására utalnának.

A javasolt vizsgálat célja Nőgyógyászati ​​műtéten átesett, perimenopauzás betegek petefészekkéreg-fragmenseinek kinyerése, és annak tesztelése, hogy a PTEN-foszfatázzal és a PI3K-t aktiváló peptiddel végzett kezelés hatására ezek a fragmentumok FSH-re reagáló tüszőket termeljenek a meztelen egér modellben.

A vizsgálati alanyok és a mintagyűjtés Legfeljebb tíz, nőgyógyászati ​​műtétre tervezett, 45 évnél idősebb nőt kérünk, hogy a petefészek felét biztosítsák a vizsgálathoz. A szövetet ezután több részre vágják, amely alkalmas mélyhűtésre.

Laboratóriumi módszerek A petefészek-fragmensek mélyhűtése a petesejt krio-tárolásáról szóló korábbi jelentéshez hasonló vitrifikációs protokollt használ (Yoon et al. 2003). Mivel a krio-konzerváló reagensek a nagy petesejtekhez képest könnyen behatolnak a primordiális tüszőkbe, ezeknek a tüszőknek a hatékony megőrzésére számítunk. Fiatal betegeknél egy 1 mm-es kortikális kocka ~50 primordiális tüszőt tartalmaz.

Minden páciensből három szövetmintát visznek át a stanfordi Hsueh laboratóriumba (mellékelt levél), és felolvasztják az in vitro aktiváláshoz, majd xeno-transzplantációt végeznek a Li és munkatársai által leírt protokoll szerint. abból a laboratóriumból. (Li et al. 2010). Az in vitro inkubáció a bpV(pic)-ben (Calbiochem), egy PTEN-inhibitorban történik, amely lehetővé teszi a nyugvó tüszők aktiválását. és egy sejt-permeábilis foszfopeptid (740Y-P) (Tocris), amely képes kötődni a PI3K p85 szabályozó alegységének SH2 doménjéhez, hogy stimulálja az enzimaktivitást. Az aktivált PI3K a foszfatidil-inozitol (4, 5)-biszfoszfátot (PIP2) foszfatidil-inozitol (3-5)-trifoszfáttá (PIP3) alakítja, míg a PTEN inhibitor megakadályozza a PIP3 visszaalakulását PIP2-vé. A felhalmozódott PIP3 viszont stimulálhatja az Akt foszforilációját, és növelheti a Foxo3 transzkripciós faktor nukleáris kizárását.