휴면기 폐경기 난포가 FSH에 반응할 수 있습니까?

서론 여성은 평균 51세에 월경을 중단하지만 40세를 넘어서면 임신율이 훨씬 낮아지며 43세에 임신하는 경우는 상대적으로 드뭅니다. 현재의 일반적인 인식은 원시 난포 풀의 고갈에 대한 생식력의 퇴보 때문입니다(Burger et al. 2008). 생식력의 감소는 반드시 원시 난포 풀의 급격한 고갈로 인한 것은 아니지만(Hansen et al. 2008) 원시 난포에서 전측으로의 적절한 전환, 성선자극호르몬 반응성 난포의 실패로 인한 것일 수 있습니다. 30대 후반이나 40대 초반에 불임 환자를 만나는 것은 드문 일이 아니며, 가장 극단적인 외인성 FSH 투여량에도 반응하지 않지만 그럼에도 불구하고 50세까지 월경을 계속합니다. 일반적인 관행은 이러한 환자를 난자 기증 프로그램에 의뢰하는 것입니다.

최근 Li et al. (2010)은 염색체 10(PTEN) 포스파타제에서 결실된 TENsin 상동성을 갖는 포스파타제 억제제 및 PI3K 활성화 펩티드와 함께 신생 마우스 난소 단편의 배양이 Foxo3의 핵 배제를 증가시키고 많은 수의 휴면 원시 난포가 FSH가 되도록 추진함을 입증했습니다. -반응성 전정부 여포. 또한, 누드 마우스 모델(면역 체계가 결여된 마우스)에서 그들은 수술 표본에서 주로 원시 난포를 포함하는 이식된 인간 난소 조각을 동일한 배양으로 처리하고 성숙한 난모세포를 포함하는 배란 전 난포를 유도하기 위해 휴면 난포의 활성화를 겪었다는 것을 보여주었습니다.

위의 모든 내용을 바탕으로 폐경기 여성의 난소가 PTEN 억제제 및 PI3K 활성화 펩타이드와 함께 배양하여 휴면 원시 난포를 활성화하여 FSH 반응성이 되도록 추진할 수 있다고 가정합니다.

실현 가능한 경우 이 기술은 난자 기증을 받아야 하는 환자에게 생식력을 얻을 수 있다는 희망을 줄 수 있습니다.

제안된 연구의 목적 부인과 수술을 받는 폐경기 환자로부터 난소 피질 조각을 얻고 PTEN 포스파타제 및 PI3K 활성화 펩티드로 치료하면 누드 마우스 모델에서 이러한 조각이 FSH 반응성 난포를 생성하도록 유도하는지 여부를 테스트합니다.

연구 대상 및 검체 채취 산부인과 수술이 예정된 45세 이상의 여성 최대 10명에게 연구를 위해 난소의 절반을 제공하도록 요청합니다. 그런 다음 조직은 냉동 보존에 적합한 여러 조각으로 절단됩니다.

실험실 방법 난소 조각의 동결 보존은 난자 동결 보관에 대한 이전 보고서와 유사한 유리화 프로토콜을 사용합니다(Yoon et al. 2003). 냉동 보존 시약은 큰 난모 세포에 비해 원시 난포에 쉽게 침투할 수 있기 때문에 이러한 난포의 효율적인 보존을 기대합니다. 젊은 환자의 경우 하나의 1mm 피질 입방체에는 ~50개의 원시 모낭이 들어 있습니다.

각 환자의 3개의 조직 샘플은 스탠포드에 있는 Hsueh 실험실로 옮겨지고(첨부된 편지), 시험관 내 활성화를 위해 해동된 후 Li 등이 설명한 것과 동일한 프로토콜을 사용하여 이종이식됩니다. 그 실험실에서. (리 등 2010). 체외 배양은 휴면 모낭의 활성화를 허용하는 PTEN 억제제인 ​​bpV(pic)(Calbiochem)에서 이루어집니다. 및 PI3K의 p85 조절 서브유닛의 SH2 도메인에 결합하여 효소 활성을 자극할 수 있는 세포 투과성 인산-펩티드(740Y-P)(Tocris). 활성화된 PI3K는 포스파티딜이노시톨(4,5)-비스포스페이트(PIP2)를 포스파티딜이노시톨(3-5)-트리포스페이트(PIP3)로 전환하는 반면, PTEN 억제제는 PIP3이 다시 PIP2로 전환되는 것을 방지합니다. 축적된 PIP3는 Akt의 인산화를 자극하고 전사 인자 Foxo3의 핵 배제를 증가시킬 수 있습니다.