A Helicobacter Pylori fertőzés hatása a HIV-betegek immunszabályozására és klinikai lefolyására Ghánában (HHECO)

Dizájnt tanulni:

Megfigyelési esetkontroll vizsgálat longitudinális követéssel

Toborzás:

A KATH HIV klinikán rendszeresen járó 1000 HIV-beteget H. pylori fertőzésre és egyéb parazita gasztrointesztinális fertőzésekre (mint lehetséges zavaró tényezőkre) szűrnek. Az ilyen betegek demográfiai, klinikai és immunológiai adatait a vizsgálatot végző orvosok dokumentálják.

Ezután két csoportot választanak ki, mindegyik 100 H. pylori fertőzésben szenvedő és 100 H. pylori fertőzés nélküli betegből áll, a nem, az életkor, a kiindulási HIV vírusterhelés, a CD4 sejtszám és egyéb zavaró tényezők alapján.

100 egészséges, HIV-fertőzéssel nem rendelkező véradót egyformán szűrnek H. pylori és egyéb gyomor-bélrendszeri fertőzések tekintetében, és kontrollcsoportként szolgálnak.

Tanulmányi eljárások:

Alapállapot:

A jogosult betegek felvételére a vizsgálati eljárás és a vizsgálatban való részvétellel járó lehetséges kockázatok magyarázata, valamint az írásos beleegyező nyilatkozat megszerzése után kerül sor. A vizsgálatba való bevonás semmilyen módon nem befolyásolja a HAART kezdeményezésére vonatkozó döntést vagy az antiretrovirális gyógyszerek kiválasztását. A betegek a vizsgálat során részben vagy egészben való részvételhez adott hozzájárulásukat indoklás nélkül bármikor visszavonhatják. A hozzájárulás visszavonása semmilyen módon nem befolyásolja negatívan a további gazdálkodást. A toborzás a megfelelő hatóságok etikai jóváhagyása után kezdődik.

A kiindulási demográfiai, klinikai és szocioökonómiai adatokat, valamint a kórelőzményt a HIV-szolgáltatásban részt vevő kezelőorvosok dokumentálják, akik nem látják az immunológiai paramétereket (kivéve a CD4 sejtszámot) és a székletvizsgálati eredményeket. A rutin laboratóriumi paramétereket a páciens mappáiból nyerik ki, beleértve a CD4 sejtszámot, a teljes vérképet, valamint a máj- és vesefunkciós teszteket.

Székletminta:

A betegeket arra kérik, hogy adjanak friss székletmintát féregpetékre, protozoákra és H. pylorira. A betöményítés és a nátrium-acetát-ecetsav-formalin (SAF) előállítás után a mintákat jóddal és kinyoun-oldattal megfestjük mikroszkópos vizsgálat céljából. A kezeletlen friss székletet -80°C-on lefagyasztják a H. pylori teszthez a kereskedelemben kapható H. pylori széklet antigén teszttel (Premier Platinum HpSA Plus, Meridian) a gyártó specifikációi szerint.

Vérminta:

A rutin laboratóriumi vizsgálatokhoz vénás vérmintát (2x 8 ml-es CPT cső, Becton Dickinson) vesznek a vérvétellel együtt. A plazmát a citokinek elemzéséhez Elisa-val vagy citometrikus gyöngysorokkal (CBA) választják el, és a maradék plazmát -80 °C-on tárolják. A perifériás vér mononukleáris sejtjeit (PBMC) izoláljuk a gyártó előírásai szerint, és előkészítjük az áramlási citometriával végzett további tesztelésre. A PBMC egy részét folyékony nitrogénben tárolják későbbi elemzés céljából. A plazmamintákat főként a citokinprofil (gyulladásos és TH1/TH2 citokinek) ELISA-val és többgyöngy-áramlási tömbökkel történő értékelésére fogják használni. A PBMC-t áramlási citometriával elemzik, hogy meghatározzák a Treg (CD4+, CD25+, FoxP3+ sejtként definiált) gyakoriságát és fenotípusát, valamint az aktiválási állapotot és a T-sejt profilt (pl. CD3, CD4, CD8, CD45RA, CD38, CD39, CD69), valamint az apoptózis markerek. Az IL-2, IL-4, IL-10 és IL-17 ex vivo intracelluláris citokinvizsgálatát nem stimulált és stimulált PBMC-n hajtjuk végre. A FACS-elemzéseket a KATH immunológiai laboratóriumában végzik a FACSCalibur áramlási citométer (Becton Dickinson) és a CellQuest Pro szoftver használatával.

Nyomon követés:

A kiindulási értékelést követően a betegeket egy évig követik. 12 hónappal az alapvonal értékelése után vénás vérmintát (2x8 ml CPT) veszünk, és az immunológiai paramétereket megismételjük az alapvonal értékeléséhez előírt módon. A bélkórokozók kezelésében részesülő, vagy klinikai indikáció szerint antiretrovirális kezelésben részesülő betegeket a kezelés megkezdése után három hónappal további vérminta benyújtására kell kérni immunológiai értékelés céljából. Bélkórokozó kezelése esetén három hónap elteltével székletmintát is vesznek az irtás megerősítésére.

Végpontok:

Elsődleges végpontok:

1. A T-sejt alcsoportok gyakorisága és aktivációs állapota H. pylori fertőzésben szenvedő HIV-pozitív betegeknél
2. A CD4 sejtek és a HIV vírus terhelés változása H. pylori fertőzésben szenvedő HIV-pozitív betegeknél a nem fertőzött betegeknél a követés során
3. Klinikai események előfordulási gyakorisága H. pylori fertőzésben szenvedő HIV-pozitív betegeknél a követés során

Másodlagos végpontok:

1. A H. pylori fertőzés prevalenciája HIV-betegeknél Kumasiban (Ghána) a véradókhoz képest
2. A féregfertőzés és más gasztrointesztinális paraziták okozta fertőzés előfordulása a ghánai Kumasiban lévő HIV-betegeknél a véradókhoz képest
3. A gasztrointesztinális fertőzések prevalenciája és kockázati tényezői HIV-betegeknél Kumasiban, Ghánában
4. A gyomor-bélrendszeri fertőzések társulása a gyomor-bélrendszeri tünetekkel
5. A gasztrointesztinális fertőzések összefüggése a táplálkozási állapottal, a soványsággal és anémiával HIV-betegeknél Kumasiban, Ghána

Kezelési rendek:

A HIV-fertőzés kezelése a nemzeti és intézményi irányelvek szerint történik, és a vizsgálatban való részvétel nem befolyásolja. Patogén parazitákkal fertőzött betegek (pl. Ascaris lumbricoides) kezelést ajánlanak fel. A H. pylori fertőzésben és a kapcsolódó tünetekben szenvedő betegeknek eradikációs terápiát ajánlanak fel a nemzeti irányelvek szerint. Ha a kezelés költségeit nem fedezi az Országos Egészségbiztosítási Rendszer (NHIS), a költségeket a tanulmányi költségvetés fedezi.

Beavatkozások:

Ebben a tanulmányban semmilyen beavatkozást nem végeznek.

Mintaméret számítás:

A tervezett mintanagyságra vonatkozó számításokat elvégezték, de nem idézték, mivel nem voltak megfelelően alátámasztva. Mivel a T-sejt populációk H. pylori fertőzés során bekövetkezett változásairól nem állnak rendelkezésre adatok, megalapozott mintaméret-elemzés nem lehetséges. A szabályozó T-sejtek (Treg) gyakoriságának egyik kulcsfontosságú végpontjaként 1-2% közötti különbséget feltételezünk a klinikailag szignifikáns minimumnak. A 0,9 és α=0,05 statisztikai erővel rendelkező csoportok közötti szignifikáns, 1%-os különbség kimutatásához a páratlan, kétoldalú t-próbával 380 beteg mintaszámára lenne szükség. Nincsenek megbízható adatok a H. pylori fertőzés prevalenciájáról a HIV-betegek között Ghánában. Más afrikai országok adatai szerint 60-80%-os előfordulást feltételezünk. Annak érdekében, hogy megfelelő számú H. pylori-negatív beteget kapjunk, és a H. pylori-val nem fertőzött betegek megfelelő csoportját tudjuk kiválasztani, továbbra is 1000 HIV-fertőzött beteg szűrését javasoljuk. Minden felvett és H. pylorira szűrt beteget elemezni fognak a HIV-betegség klinikai progressziójára. Hasonlóképpen nem állnak rendelkezésre adatok a klinikai lefolyásra gyakorolt ​​következmények becslésére. Az ilyen különbségeket azonban nehéz azonosítani a HIV-betegség klinikai lefolyásának nagy változatossága és a zavaró tényezők sokasága miatt.

Statisztikai analízis:

A folytonos változókat a statisztikai eloszlások függvényében páros Student-féle t-próbával vagy Wilcoxon-előjeles rangpróbával kell összehasonlítani. A folytonos változókhoz lineáris regressziós analízist és Fisher-féle transzformációs tesztet használunk. Az arányokat khi-négyzet tesztekkel hasonlítjuk össze. A zavaró tényezők kijavítása érdekében szükség szerint többszörös regressziós elemzést és logisztikus regressziós elemzést kell végezni. A p-érték <0,05 statisztikailag szignifikánsnak minősül.