ガーナの HIV 患者における免疫調節と臨床経過に対するヘリコバクター ピロリ感染の影響 (HHECO)

研究デザイン:

縦断的フォローアップを伴う観察的症例対照研究

募集：

KATH HIV クリニックに定期的に通う 1,000 人の HIV 患者は、H. pylori 感染およびその他の寄生性胃腸感染症 (考えられる交絡因子) についてスクリーニングされます。 これらの患者の人口統計学的、臨床的、および免疫学的データは、研究担当医によって文書化されます。

次に、H. pylori 感染患者 100 人と非 H. pylori 感染患者 100 人の 2 つのグループを選択し、性別、年齢、ベースラインの HIV ウイルス量、CD4 細胞数、およびその他の交絡因子に従って一致させます。

HIV に感染していない 100 人の健康な献血者が、ピロリ菌やその他の胃腸感染症について等しくスクリーニングされ、対照群として機能します。

研究手順:

ベースライン:

適格な患者は、研究手順および研究への参加に関連する潜在的なリスクが説明され、書面によるインフォームドコンセントが得られた後に募集されます。 研究への参加は、HAART を開始する決定または抗レトロウイルス薬の選択に影響を与えるものではありません。 患者は、理由を示すことなく、研究中いつでも部分的または完全に参加することへの同意を撤回することができます. 同意の撤回は、今後の管理に悪影響を与えるものではありません。 採用は、適切な当局から倫理的な承認が得られた後に開始されます。

ベースラインの人口統計学的、臨床的および社会経済的データ、ならびに病歴は、免疫学的パラメーター（CD4細胞数を除く）および便検査結果を知らされていないHIVサービスに関与する主治医によって文書化されます。 CD4細胞数、全血球数、肝臓および腎臓機能検査など、ルーチンの検査パラメータが患者のフォルダから抽出されます。

糞便サンプル：

患者は、虫卵、原生動物、およびピロリ菌について検査するために、新鮮な便サンプルを提供するよう求められます。 濃縮および酢酸ナトリウム-酢酸-ホルマリン (SAF) による調製後、標本は顕微鏡検査用にヨウ素およびキニョン溶液で染色されます。 未処理の新鮮な便は、メーカーの仕様に従って、市販のピロリ菌便抗原検査 (Premier Platinum HpSA Plus、Meridian) を使用したピロリ菌検査のために、-80°C で凍結されます。

血液サンプル：

静脈血サンプル (2x 8ml CPT チューブ、ベクトン ディッキンソン) を採血と一緒に、定期的な実験室調査のために採取します。 血漿は、サイトカインの分析のために Elisa またはサイトメトリー ビーズ アレイ (CBA) によって分離され、残りの血漿は -80°C で保存されます。 末梢血単核細胞 (PBMC) は、製造元の仕様に従って分離され、フローサイトメトリーによるさらなるテストのために準備されます。 PBMC の一部は、後で分析するために液体窒素に保存されます。 血漿サンプルは主に、ELISA およびマルチビーズ フロー アレイによるサイトカイン プロファイル (炎症性サイトカインおよび TH1/TH2 サイトカイン) の評価に使用されます。 PBMC はフローサイトメトリーによって分析され、CD4+、CD25+、FoxP3+ 細胞として定義される Treg の頻度と表現型、および活性化状態と T 細胞プロファイル (例: CD3、CD4、CD8、CD45RA、CD38、CD39、CD69)、およびアポトーシスマーカー。 IL-2、IL-4、IL-10、およびIL-17のエクスビボ細胞内サイトカインアッセイは、刺激されていないPBMCおよび刺激されたPBMCで実施されます。 ＦＡＣＳＣａｌｉｂｕｒフローサイトメーター（Ｂｅｃｔｏｎ Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ）およびＣｅｌｌＱｕｅｓｔ Ｐｒｏソフトウェアを使用して、ＫＡＴＨ免疫学研究室でＦＡＣＳ分析を実施する。

ファローアップ：

ベースライン評価の後、患者は 1 年間追跡されます。 ベースライン評価の 12 か月後、静脈血サンプル (2x8ml CPT) を採取し、ベースライン評価に指定されているように免疫学的パラメーターを繰り返します。 腸内病原体の治療を受けている患者、または抗レトロウイルス療法を開始している患者は、臨床適応に従って、治療開始から3か月後に免疫学的評価のために追加の血液サンプルを提供するよう求められます。 腸内病原体の治療の場合は、3か月後に便のサンプルも採取して根絶を確認します。

エンドポイント:

主要エンドポイント:

1. H. pylori 感染の有無にかかわらず、HIV 陽性患者における T 細胞サブセットの頻度と活性化状態
2. フォローアップ中の H. pylori 感染の有無による HIV 陽性患者における CD4 細胞と HIV ウイルス量の変化
3. フォローアップ中の H. pylori 感染の有無にかかわらず、HIV 陽性患者における臨床イベントの発生率

二次エンドポイント:

1. 献血者と比較した、ガーナのクマシにおける HIV 患者のピロリ菌感染率
2. 献血者と比較した、ガーナのクマシにおける HIV 患者における蠕虫および他の胃腸寄生虫による感染の有病率
3. ガーナのクマシにおける HIV 患者の胃腸感染症の有病率と危険因子
4. 胃腸感染症と胃腸症状の関連
5. ガーナのクマシにおけるHIV患者の胃腸感染症と栄養状態、消耗および貧血との関連

治療レジメン:

HIV感染の管理は、国および機関のガイドラインに従って実施され、研究への参加によって影響を受けることはありません。 病原体寄生虫に感染していることが判明した患者（例： Ascaris lumbricoides) による治療が提供されます。 H. pylori 感染症および関連する症状のある患者には、国のガイドラインに従って除菌療法が提供されます。 治療費が国民健康保険制度（NHIS）でカバーされない場合、その費用は研究予算でカバーされます。

介入:

この研究では介入は行われません。

サンプルサイズの計算:

計画されたサンプルサイズの計算は行われましたが、十分に実証されていないため引用されていません. H. pylori 感染中の T 細胞集団の変化に関するデータが存在しないため、実証されたサンプルサイズの分析は不可能です。 制御性 T 細胞 (Treg) の頻度の差が 1 つの重要なエンドポイントとして、臨床的に有意である最小値として 1 ～ 2% の範囲であると想定しています。 対応のない両側 t 検定を使用して、統計的検出力が 0.9 および α=0.05 のグループ間で 1% の有意差を示すには、380 人の患者のサンプルサイズが必要になります。 ガーナの HIV 患者のピロリ菌感染率に関する信頼できるデータは存在しません。 他のアフリカ諸国のデータによると、有病率は 60 ～ 80% であると想定しています。 十分なピロリ菌陰性患者を確実に獲得し、ピロリ菌非感染患者の一致するグループを選択できるようにするために、1000 人の HIV 感染患者をスクリーニングすることをお勧めします。 H. pylori について募集およびスクリーニングされたすべての患者は、HIV 疾患の臨床的進行について分析されます。 同様に、臨床経過への影響を推定するデータもありません。 しかし、そのような違いは、HIV 疾患の臨床経過の変動性が高く、交絡因子が多数あるため、識別するのが困難です。

統計分析：

連続変数は、統計分布に応じて、対応のあるスチューデントの t 検定またはウィルコクソンの符号付き順位検定によって比較されます。 線形回帰分析とフィッシャーの変換テストは、連続変数に使用されます。 割合は、カイ二乗検定によって比較されます。 重回帰分析とロジスティック回帰分析は、交絡因子を修正するために適宜実行されます。 p 値 <0.05 は、統計的に有意と見なされます。