幽门螺杆菌感染对加纳 HIV 患者免疫调节和临床病程的影响 (HHECO)

学习规划：

纵向随访的观察性病例对照研究

招聘：

1000 名定期到 KATH HIV 诊所就诊的 HIV 患者将接受 H. pylori 感染和其他寄生性胃肠道感染（作为可能的混杂因素）筛查。 这些患者的人口统计学、临床和免疫学数据将由研究医师记录。

然后选择两组，每组 100 名幽门螺杆菌感染患者和 100 名未感染幽门螺杆菌的患者，根据性别、年龄、基线 HIV 病毒载量、CD4 细胞计数和其他混杂因素进行匹配。

100 名未感染 HIV 的健康献血者同样接受幽门螺杆菌和其他胃肠道感染筛查，并作为对照组。

学习程序：

基线：

在研究程序和与参与研究相关的潜在风险得到解释并获得书面知情同意书后，将招募符合条件的患者。 纳入研究绝不会影响启动 HAART 的决定或抗逆转录病毒药物的选择。 患者可以在研究期间的任何时间撤回部分或全部参与同意，无需给出理由。 撤回同意绝不会对进一步的管理产生负面影响。 招聘将在获得有关当局的道德批准后开始。

基线人口统计学、临床和社会经济数据以及病史将由参与 HIV 服务的主治医师记录，他们对免疫学参数（CD4 细胞计数除外）和粪便检测结果不知情。 将从患者的文件夹中提取常规实验室参数，包括 CD4 细胞计数、全血细胞计数以及肝肾功能测试。

粪便样本：

要求患者提供新鲜的粪便样本以检测蠕虫卵、原生动物和幽门螺杆菌。 在用乙酸钠-乙酸-福尔马林 (SAF) 浓缩和制备后，标本用碘和 kinyoun 溶液染色用于显微镜检查。 未经处理的新鲜粪便在-80°C 下冷冻，用于根据制造商的说明使用市售的幽门螺杆菌粪便抗原测试（Premier Platinum HpSA Plus，Meridian）进行幽门螺杆菌测试。

血液样本：

静脉血样（2x 8ml CPT 管，Becton Dickinson）与采血一起采集用于常规实验室检查。 分离血浆用于通过 Elisa 或细胞计数珠阵列 (CBA) 分析细胞因子，剩余的血浆储存在 -80°C。 根据制造商的规格分离外周血单核细胞 (PBMC)，并准备通过流式细胞仪进行进一步测试。 一部分 PBMC 将储存在液氮中供以后分析。 血浆样本将主要用于通过 ELISA 和多珠流阵列评估细胞因子谱（炎症和 TH1/TH2 细胞因子）。 PBMC 将通过流式细胞术进行分析，以确定 Treg 的频率和表型，定义为 CD4+、CD25+、FoxP3+ 细胞，以及激活状态和 T 细胞概况（例如 CD3、CD4、CD8、CD45RA、CD38、CD39、CD69)，以及细胞凋亡标志物。 将在未刺激和刺激的 PBMC 上进行 IL-2、IL-4、IL-10 和 IL-17 的离体细胞内细胞因子测定。 FACS 分析将在 KATH 免疫学实验室进行，使用 FACSCalibur 流式细胞仪 (Becton Dickinson) 和 CellQuest Pro 软件。

跟进：

基线评估后，对患者进行为期一年的随访。 基线评估后 12 个月，采集静脉血样 (2x8ml CPT)，并按照基线评估的规定重复免疫学参数。 根据临床适应症接受肠道病原体治疗或开始抗逆转录病毒治疗的患者，将被要求在开始治疗三个月后提供额外的血液样本进行免疫学评估。 在治疗肠道病原体的情况下，还将在三个月后收集粪便样本以确认根除。

终点：

主要终点：

1. 有和没有幽门螺杆菌感染的 HIV 阳性患者中 T 细胞亚群的频率和激活状态
2. HIV阳性患者与未感染H. pylori患者随访期间CD4细胞和HIV病毒载量的变化
3. 随访期间有或无幽门螺杆菌感染的 HIV 阳性患者的临床事件发生率

次要终点：

1. 与献血者相比，加纳库马西 HIV 患者的幽门螺杆菌感染率
2. 与献血者相比，加纳库马西的 HIV 患者感染蠕虫和其他胃肠道寄生虫的患病率
3. 加纳库马西 HIV 患者胃肠道感染的患病率和危险因素
4. 胃肠道感染与胃肠道症状的关系
5. 加纳库马西 HIV 患者胃肠道感染与营养状况、消瘦和贫血的关系

治疗方案：

HIV 感染的管理将根据国家和机构指南进行，不会受到研究参与的影响。 患者被发现感染了病原体寄生虫（例如 蛔虫）将提供治疗。 幽门螺杆菌感染和相关症状的患者将根据国家指南接受根除治疗。 如果国家健康保险计划 (NHIS) 不支付治疗费用，则费用将由研究预算支付。

干预措施：

本研究不进行任何干预。

样本量计算：

对计划的样本量进行了计算，但由于没有得到充分证实，因此没有引用。 由于没有关于幽门螺杆菌感染期间 T 细胞群变化的数据，因此不可能进行经证实的样本量分析。 我们假设调节性 T 细胞 (Treg) 的频率差异在 1-2% 的范围内作为一个关键终点，作为具有临床意义的最小值。 为了证明统计功效为 0.9 和 α=0.05 的组之间 1% 的显着差异，使用未配对的双侧 t 检验，需要 380 名患者的样本量。 没有关于加纳 HIV 患者中幽门螺杆菌感染流行率的可靠数据。 根据其他非洲国家的数据，我们假设患病率为 60-80%。 为了确保获得足够的H. pylori阴性患者并能够选择匹配的H. pylori未感染患者组，我们仍然建议筛查1000名HIV感染者。 将针对 HIV 疾病的临床进展分析所有招募和筛查幽门螺杆菌的患者。 同样，没有数据可以估计对临床过程的影响。 然而，由于 HIV 疾病临床过程的高度可变性和混杂因素的多样性，这种差异很难识别。

统计分析：

连续变量将根据统计分布通过成对学生 t 检验或 Wilcoxon 符号秩检验进行比较。 线性回归分析和 Fisher 变换检验将用于连续变量。 比例将通过卡方检验进行比较。 将酌情进行多元回归分析和逻辑回归分析以校正混杂因素。 p 值 <0.05 将被视为具有统计学意义。