A szinapszis koagulációs útvonalának szerepe prionbetegségekben

A cerebrospinális folyadék (CSF) minták gyűjtését tervezzük trombinaktivitás-vizsgálathoz, hogy megvizsgáljuk, van-e különbség a CJD-s (Creutzfeldt-Jakob-kór) és a nem CJD-s betegek trombinaktivitásában a CSF-ben. A CSF-minták két forrásból származnak 1. Családi vagy sporadikus CJD-ben szenvedő betegek és egyéb neurodegeneratív betegségekben (pl. SDAT**, NPH), amelyet a Sheba Medical Centerben fognak kiértékelni 2. Prof. Zerr együttműködő csoportunktól a Gottingeni Egyetem Német Prion Referral Központjában, amely több ezer CSF-mintát tartalmaz családi és szórványos betegektől. CJD, valamint más degeneratív agybetegségek ideális kontrollja.

A tanulmány 2 részből áll:

1. Leendő rész, amelyben 25 CJD-s beteg és 25 más típusú demenciában szenvedő beteg felvételét tervezzük a Sheba Medical Centerből (SMC). A vizsgálatba való bevonása előtt egy vezető neurológus kikérdezi a pácienst, és megbizonyosodik arról, hogy teljesen megérti a vizsgálat céljait, és szellemileg alkalmas-e a beleegyező nyilatkozat aláírására (súlyosan demens betegek, akik nem tudják megfelelően mérlegelni a részvételt a vizsgálatban kizárásra kerül).

   A kognitív teljesítményt a Mini-mental Status Examination és Frontal Assessment Battery skálák segítségével értékelik.

   A kognitív értékelésen és a klinikai vizsgálathoz szükséges klinikai adatokon kívül semmilyen más klinikai adatot nem gyűjtünk ehhez a vizsgálathoz.

2. Retrospektív rész, amelyben a CJD-betegektől és más típusú demenciában szenvedő betegektől származó CSF-mintákat németországi munkatársainktól szállítanak hozzánk, és megvizsgálják a trombinaktivitást. Azt tervezzük, hogy a vizsgálat ebbe a részébe 100-200 CJD-beteg CSF-mintáját és ugyanennyi mintát az életkornak megfelelő kontrollokból veszünk fel.

A trombinaktivitást (a vizsgálat mindkét részéből származó minták esetében) a következőképpen vizsgáljuk: A CSF-mintát egy fekete 96 lyukú edénybe helyezzük (10 lyukanként). A trombinaktivitást fluorometriás vizsgálattal mérjük, számszerűsítve a Boc-Asp(OBzl)-Pro-Arg-AMC*** szintetikus peptid szubsztrát (I-1560, Bachem, Svájc, 13 moláris végső koncentráció) hasítását. A méréseket az Infinite 2000 mikrolemez-leolvasó (Tecan, infinite 200, Svájc) végzi majd 360±35, illetve 460±35 nm-es gerjesztési és emissziós szűrőkkel. A trombinaktivitás CSF-tesztjét Chapman professzor Sheba-i laboratóriumában végzik majd. Ez a laboratórium aktívan foglalkozik a trombin és a PAR-1 szerepének kutatásával az idegrendszeri betegségekben, és teljesen felszerelt a biokémiai és fehérjeszint-kísérletek elvégzésére.

A vizsgálat potenciálisan kereskedelmi forgalomba kerülhet a CJD diagnosztikai tesztjeként. Ezenkívül lehetőség nyílik olyan terápiás szerek kifejlesztésére, amelyek a túlzott trombinaktivációt célozzák.

**SDAT = Alzheimer típusú szenilis demencia

***AMC = amino-metil-kumarin