突触凝血途径在朊病毒疾病中的作用

我们计划收集脑脊液 (CSF) 样本用于凝血酶活性测定，以测试 CJD（克雅氏病）和非 CJD 患者的 CSF 中凝血酶活性是否存在差异。 CSF 样品将从两个来源获得 1。 患有家族性或散发性 CJD 的患者和患有其他神经退行性疾病（例如 SDAT**，NPH），将在 Sheba 医疗中心 2 进行评估。来自我们在哥廷根大学德国朊病毒转诊中心的 Zerr 教授合作小组，该中心收集了来自家族性和散发性患者的数千份 CSF 样本CJD 以及其他退行性脑病的理想控制。

该研究分为 2 个部分：

1. 我们计划从 Sheba 医疗中心 (SMC) 招募 25 名 CJD 患者和 25 名其他类型痴呆患者的前瞻性部分。 在纳入研究之前，一名高级神经科医生将与患者面谈，并确认他完全理解研究的目的，并且他在精神上有资格签署知情同意书（严重痴呆患者无法充分考虑参与在研究中将被排除在外）。

   将使用简易精神状态检查和额叶评估电池量表评估认知表现。

   除了认知评估和临床检查所需的数据外，不会为本研究特别收集任何临床数据。

2. 回顾性部分，来自克雅氏病患者和患有其他类型痴呆症的患者的 CSF 样本将从我们在德国的合作者运送到我们，并将检测凝血酶活性。 我们计划为研究的这一部分招募 100-200 个 CJD 患者 CSF 样本和来自年龄匹配对照的相同数量的样本。

凝血酶活性（对于来自研究的两个部分的样品）将按如下方式测定：CSF 样品将置于黑色 96 孔培养皿中（每孔 10 个）。 将通过荧光测定法测量凝血酶活性，量化合成肽底物 Boc-Asp(OBzl)-Pro-Arg-AMC***（I-1560，Bachem，Switzerland，13 摩尔终浓度）的裂解。 测量将由 Infinite 2000 酶标仪（Tecan，infinite 200，Switzerland）进行，激发和发射滤光片分别为 360±35 和 460±35 nm。 凝血酶活性的 CSF 测试将在查普曼教授位于 Sheba 的实验室进行。 该实验室积极从事凝血酶和PAR-1在神经系统疾病中作用的研究，并具备进行生化和蛋白质水平实验的设备。

该检测有可能作为 CJD 的诊断测试进行商业化。 此外，还有可能开发针对凝血酶过度活化的治疗剂。

**SDAT=阿尔茨海默型老年性痴呆

***AMC=氨基甲基香豆素