IVM alacsony petefészekválaszban szenvedő betegek számára. Javítja-e az IVF-eredményeket, és javítja-e a következő IVF-ciklust?

IVM kezelés alacsony petefészekválaszban szenvedő betegeknél. Javítja-e az IVF kimenetelét, vagy a petefészek tüszők aktiválódását idézheti elő, és növelheti a siker esélyét a következő IVF ciklusban?

Tudományos háttér:

A rossz petefészek válasz (POR) az egyik legnagyobb terápiás kihívás az in vitro megtermékenyítésben. A rosszul reagáló betegek prevalenciája a szakirodalomban 9 és 24% között mozog, azonban a fogamzóképes kor növekedése miatt várhatóan ez lesz az egyik fő meddőségi ok. A standard protokollokra való megfelelő reagálás és a megfelelő tüszők összegyűjtésének elmulasztása csökkent petesejtek termelését, ciklusmegszakadását eredményezi, és összességében jelentősen csökkenti a terhesség valószínűségét. Számos terápiás megközelítést vizsgáltak a POR kezelésére; ennek ellenére egyetlen hatékony stratégiát még nem alakítottak ki. Korábban kimutatták, hogy a petefészekkéreg mechanikus manipulációja, mint például a petefészek ékreszekciója vagy a petefészek diatermiával vagy lézerrel történő "fúrása", tüszőnövekedést indukált policisztás petefészek szindrómás (PCOS) betegben.

A közelmúltban élve születésről számoltak be, miután a petefészekkéreg fragmentációja és a Hippo jelátviteli útvonal in vitro megszakítása és az Akt jelátvitel aktiválása történt. A kezelt petefészek-fragmenseket visszaültettük a betegbe, majd a tüszők növekedését, az érett petesejtek kinyerését, in vitro megtermékenyítést és embriótranszfert követően; egészséges baba született. A víziló jelátviteli útvonala elengedhetetlen az optimális szervméret fenntartásához, és minden metazoa állatban konzervált [6-8]. Ebben a tanulmányban kimutatták, hogy a petefészek fragmentációja fokozta az aktin polimerizációt és megzavarta a Hippo jelátvitelt azáltal, hogy csökkentette a foszforilált Yes-asszociált fehérje (pYAP) szintjét, valamint a YAP megnövekedett nukleáris lokalizációját, ami a CCN növekedési faktorok gének és a BIRC apoptózis gátlók fokozott expressziójához vezet. A szekretált CCN2 és a kapcsolódó faktorok elősegítették a tüszők növekedését

A petefészek fragmentációjában, a víziló jelátvitelében és a tüszők növekedésében részt vevő gének fontosak a petefészek fiziológiája és patofiziológiája szempontjából. A petefészek fragmentációja az intercelluláris feszültség megváltozásához vezetett, és elősegítette a G-aktin F-aktinná való átalakulását. A víziló jelátvitel későbbi megszakadása csökkentette a pYAP és a teljes YAP arányát, ami a downstream CCN növekedési faktorok és a BIRC apoptózis gátlók fokozott expressziójához vezetett

Az in vitro érést (IVM) több mint egy évtizede gyakorolják klinikai környezetben. A hagyományos IVF alternatívájaként javasolták a petefészek hiperstimulációs szindróma (OHSS) kockázatának minimalizálására PCOS-ben szenvedő betegeknél. A közelmúltban az IVM módszert javasolták rákellenes kezelés alatt álló betegek számára, különösen olyan nők esetében, akiknek gyors termékenységmegőrzésre van szükségük [9], vagy akiknél fennáll az ösztrogénérzékeny rák kiújulásának kockázata. Bár az IVM-et az IVF-re gyengén reagáló betegeknél alkalmazták kétértelmű eredményekkel, számos kutató kimutatta, hogy az IVM előnyös azoknál a nőknél, akiknél alacsony a petefészek-válasz.

Az IVM céljára a petesejteket 4-5 mm átmérőjű petefészektüszőkből nyerik ki ultrahangos irányítás mellett, egy lumen vékonyabb aspirációs tűvel. Az aspirációs nyomás csökken a szokásos IVF-hez képest. Ezért többszöri tűszúrásra van szükség, mert alacsonyabb aspirációs nyomást alkalmaznak, és a véres aspirációk elzárhatják a vékony tű lumenét. Mivel az éretlen petesejtek szorosan összetömörödött kumuluszsejtekbe záródnak, a tüszőfal kürettá tételére van szükség a kumulusz oocita komplex eltávolításához. Mindez arra vezet, hogy az IVM eljárás során a petefészekkéreg fokozott mechanikai stimulációja megy végbe, aminek következtében a Hippo jelátviteli útvonala megszakad.

Hipotézis és célkitűzések Célunk annak vizsgálata, hogy a petefészekkéreg IVM által okozott mechanikus manipulációja és triggerelése okozhat-e petefészek tüsző aktiválódást és rekrutációt a fent említett mechanizmusok révén. Így a következő szabályos IVF-ciklusban végzett stimuláció jobb petefészekválaszt és megnövekedett petesejtek hozamát eredményezi.

Anyagok és módszerek Betegek Prospektív kohorsz vizsgálat POR betegeken. Huszonöt POR-beteget választanak ki a bolognai kritériumok alapján, és minden betegnek legalább egy dokumentált POR-ciklusa lesz.

IVM protokoll A POR betegeket IVM ciklusban kezeljük IVF egység protokollunk szerint, FSH-priming használatával. Röviden, a menstruációs ciklus 3. napján egy kiindulási értékelést végeztek, amely magában foglalta a hormonprofilt és az ultrahangos vizsgálatot. A 3. napon 150 NE/nap rekombináns FSH-t adtunk hozzá 3 napig. A második értékelést a menstruációs ciklus 6. napján végezték el. 10 000 NE hCG (Pregnyl; Organon, Oss, Holland) injekciót adtak be szubkután, ha az endometrium vastagsága ≥6 mm és a vezető tüsző legalább 12 mm. A petesejtek visszanyerése ultrahangos irányítás mellett, 19G-os egylumenes aspirációs tűvel (Cook; Queensland, Ausztrália) történik, 7,5 kPa-ra csökkentett aspirációs nyomással. A follikuláris folyadékot 2 NE/ml heparint tartalmazó tüszőöblítő puffert (Cook) tartalmazó tenyészcsövekbe gyűjtjük. A tömörített petesejt-komplexek azonosításának nehézségei miatt minden aspirátumot szűrtünk a további oociták azonosítása érdekében.

In-vitro petesejtek érése A csíravezikulákat és az M1 petesejteket IVM táptalajban (Sage; CT, USA) tenyésztjük, amelyet 75 NE FSH-val és 75 NE luteinizáló hormonnal (LH; Ferring, Keil, Németország) egészítenek ki, és 24-48 óra között ellenőrizzük érettségüket. kultúra után. Az érett petesejteket eltávolítjuk a granulosa sejtekből, és intracitoplazmatikus spermium injekcióval (ICSI) megtermékenyítjük. Az ICSI után a petesejtek IVF táptalajba kerülnek. A megtermékenyítést 18 órával az ICSI után értékelik, megvizsgálva a petesejteket két különálló pronukleusz (2PN) megjelenése és két poláris test extrudálása szempontjából.

IVF protokoll Az IVM kezelést követően, ha a páciens nem sikerült teherbe esni, hagyományos IVF kezelést ajánlanak fel neki, ugyanazzal a kontrollált petefészek hiperstimulációs protokollal, mint a korábbi IVF kezelésénél (IVM ciklus előtt). Minden beteg a saját kontrolljaként fog szolgálni.

Eredménymérés Az eredménymérések magukban foglalják az ellenőrzött petefészek-hiperstimulációs változókat, a kinyert petesejtek számát, az érett petesejteket a leszívás napján, a megtermékenyítési arányt, az embriók minőségét és az átvitt embriók számát.