IVM til patienter med lavt ovarierespons. Forbedrer det IVF-resultater og forbedrer det den følgende IVF-cyklus?

IVM-behandling hos patienter med lavt ovarierespons. Forbedrer det IVF-resultatet, eller kan det forårsage aktivering af æggestokkene og øge chancerne for succes i den følgende IVF-cyklus?

Videnskabelig baggrund:

Dårlig ovarierespons (POR) er en af ​​de største terapeutiske udfordringer ved in vitro fertilisering. Forekomsten af ​​patienter med dårligt responderende varierer i litteraturen mellem 9 og 24 %, men på grund af stigningen i den fødedygtige alder forventes det at være en af ​​de vigtigste årsager til infertilitet. Hvis man ikke reagerer tilstrækkeligt på standardprotokoller og rekrutterer tilstrækkelige follikler, resulterer det i nedsat oocytproduktion, cyklusannullering, og det er samlet set forbundet med en signifikant formindsket sandsynlighed for graviditet. Adskillige terapeutiske tilgange til POR er blevet undersøgt; endnu er der endnu ikke etableret en enkelt effektiv strategi. Tidligere blev det vist, at mekanisk manipulation på ovariecortex, såsom ovariekile-resektion eller ovarie-"boring" ved diatermi eller laser, inducerede follikelvækst hos patienter med polycystisk ovariesyndrom (PCOS).

For nylig blev der rapporteret om en levende fødsel efter fragmentering af ovariecortex og in vitro afbrydelse af Hippo-signalvejen og aktivering af Akt-signalering. De behandlede ovariefragmenter blev podet tilbage til patienten og efter follikelvækst, udtagning af modne æg, in vitro fertilisering og embryooverførsel; en sund baby blev født. Flodhest-signalvejen er essentiel for at opretholde optimal organstørrelse og bevares i alle metazoaniske dyr [6-8]. I denne undersøgelse blev det vist, at ovariefragmentering øgede actinpolymerisation og forstyrrede Hippo-signalering ved at reducere phosphoryleret Yes-associeret protein (pYAP) niveauer sammen med øget nuklear lokalisering af YAP, hvilket førte til øget ekspression af CCN vækstfaktorgener og BIRC apoptoseinhibitorer. Udskilt CCN2 og relaterede faktorer fremmede follikelvækst

Gener involveret i ovariefragmentering, Hippo-signalering og follikelvækst er vigtige for ovariefysiologi og patofysiologi. Ovariefragmentering førte til ændringer i intercellulær spænding og lettede omdannelsen af ​​G-actin til F-actin. Efterfølgende afbrydelse af Hippo-signalering reducerede pYAP til total YAP-forhold, hvilket førte til øget ekspression af nedstrøms CCN-vækstfaktorer og BIRC-apoptoseinhibitorer

In vitro modning (IVM) har været praktiseret i kliniske omgivelser i over et årti. Det er blevet foreslået som et alternativ til konventionel IVF for at minimere risikoen for ovariehyperstimuleringssyndrom (OHSS) hos patienter med PCOS. For nylig er IVM blevet foreslået som metoden til patienter, der gennemgår kræftbehandling, især for kvinder, der kræver hurtig konservering af fertilitet [9] eller står over for risikoen for østrogenfølsomt kræfttilbagefald. Selvom IVM er blevet anvendt til IVF-fattige respondere med tvetydige resultater, har flere forskere vist fordele ved IVM hos kvinder, der har lavt ovarierespons.

Med henblik på IVM udtages oocytter fra ovariefollikler så små som 4-5 mm i diameter under ultralydsvejledning med en tyndere aspirationsnål med enkelt lumen. Aspirationstrykket er reduceret i forhold til almindelig IVF. Derfor er der behov for flere nålepunkteringer, fordi der bruges lavere aspirationstryk, og blodige aspirater kan blokere det tynde nålelumen. Fordi umodne oocytter er indesluttet i tætpakkede cumulusceller, er curettage af follikelvæggen nødvendig for at fjerne cumulus-oocytkomplekset. Alt dette fører til det faktum, at der under IVM-proceduren sker øget mekanisk stimulering af ovariebarken med deraf følgende forstyrrelse af Hippo-signalvejen.

Hypotese og formål Vores mål er at undersøge, om den mekaniske manipulation og udløsning af ovariecortex forårsaget af IVM kan forårsage ovariefollikulær aktivering og rekruttering ved ovennævnte mekanismer. Stimulering i den følgende regulære IVF-cyklus vil således resultere i forbedret ovarierespons og øget oocytudbytte.

Materialer og metoder Patienter Prospektiv kohorteundersøgelse af POR-patienter. Femogtyve POR-patienter vil blive udvalgt baseret på Bologna-kriterierne, og alle patienter vil have mindst én dokumenteret POR-cyklus.

IVM-protokol POR-patienter vil blive behandlet i IVM-cyklus i henhold til vores IVF-enhedsprotokol ved hjælp af FSH-priming. Kort fortalt blev en baseline-evaluering, der omfattede en hormonprofil og en ultralydsscanning, udført på dag 3 i menstruationscyklussen. På dag 3 blev 150 IE/dag rekombinant FSH tilsat i 3 dage. En anden evaluering blev udført på dag 6 i menstruationscyklussen. En injektion på 10.000 IE hCG (Pregnyl; Organon, Oss, Holland) blev administreret subkutant, når endometrietykkelsen vil være ≥6 mm, og den førende follikel vil være mindst 12 mm. Oocytudtagning vil blive udført under ultralydsvejledning med en 19G enkelt-lumen aspirationsnål (Cook; Queensland, Australien) med et reduceret aspirationstryk på 7,5 kPa. Follikelvæsken vil blive opsamlet i dyrkningsglas indeholdende follikelskyllebuffer (Cook) med 2 IE/ml heparin. På grund af vanskeligheden med at identificere komprimerede oocytkomplekser blev alle aspirater filtreret for at identificere de yderligere oocytter.

In-vitro oocytmodning Germinale vesikler og M1-oocytter vil blive dyrket i IVM-medium (Sage; CT, USA) suppleret med 75 IE FSH og 75 IE luteiniserende hormon (LH; Ferring, Keil, Tyskland) og kontrolleret for modenhed mellem 24-48 timer efter kultur. Modne oocytter vil blive blottet for granulosacellerne og befrugtet ved intracytoplasmatisk spermainjektion (ICSI). Efter ICSI vil oocytterne blive overført til IVF-medium. Befrugtning vil blive vurderet 18 timer efter ICSI ved at undersøge oocytterne for udseendet af to adskilte pronuclei (2PN) og ekstruderingen af ​​to polære legemer.

IVF-protokol Efter IVM-behandlingen, hvis patienten ikke blev gravid, vil hun blive tilbudt en konventionel IVF-behandling med samme kontrollerede ovariehyperstimuleringsprotokol som i hendes tidligere IVF-behandling (før IVM-cyklussen). Hver patient vil tjene som sin egen kontrol.

Resultatmålinger Resultatmålinger vil omfatte kontrollerede ovariehyperstimuleringsvariabler, antal udvundne oocytter, modne oocytter på aspirationsdagen, befrugtningshastighed, embryonkvalitet og antal overførte embryoner.