난소 반응이 낮은 환자를 위한 IVM. IVF 결과를 개선하고 다음 IVF 주기를 개선합니까?

난소 반응이 낮은 환자의 IVM 치료. IVF 결과를 개선합니까, 아니면 난소 난포를 활성화하고 다음 IVF 주기에서 성공 가능성을 높일 수 있습니까?

과학적 배경:

불량한 난소 반응(POR)은 체외 수정의 주요 치료 과제 중 하나입니다. 반응이 좋지 않은 환자의 유병률은 문헌에서 9~24%로 다양하지만 가임 연령의 증가로 인해 주요 불임 원인 중 하나로 예상됩니다. 표준 프로토콜에 적절하게 반응하지 않고 적절한 난포를 모집하지 않으면 난모세포 생산 감소, 주기 취소가 발생하고 전반적으로 임신 가능성이 상당히 감소합니다. POR에 대한 여러 치료적 접근이 탐색되었습니다. 아직 단일 효과적인 전략이 수립되지 않았습니다. 이전에는 난소 쐐기 절제술 또는 투열요법 또는 레이저에 의한 난소 "드릴링"과 같은 난소 피질에 ​​대한 기계적 조작이 다낭성 난소 증후군(PCOS) 환자에서 난포 성장을 유도한 것으로 나타났습니다.

최근에, 난소 피질 단편화 및 하마 신호 경로의 시험관 내 파괴 및 Akt 신호 활성화 후에 정상 출산이 보고되었다. 처리된 난소 조각은 난포 성장, 성숙한 난자 회수, 체외 수정 및 배아 이식 후에 환자에게 다시 이식되었습니다. 건강한 아기가 태어났습니다. Hippo 신호 경로는 최적의 장기 크기를 유지하는 데 필수적이며 모든 후생 동물에서 보존됩니다[6-8]. 이 연구에서 난소 단편화는 YAP의 증가된 핵 국소화와 함께 인산화된 예 관련 단백질(pYAP) 수준을 감소시킴으로써 액틴 중합을 증가시키고 Hippo 신호 전달을 방해하여 CCN 성장 인자 유전자 및 BIRC 세포자멸 억제제의 발현을 증가시키는 것으로 나타났습니다. 분비된 CCN2 및 관련 요인은 난포 성장을 촉진했습니다.

난소 단편화, 하마 신호 및 난포 성장에 관여하는 유전자는 난소 생리학 및 병태생리학에 중요합니다. 난소 단편화는 세포간 장력의 변화를 가져왔고 G-액틴에서 F-액틴으로의 전환을 촉진했습니다. 후속 Hippo 신호 전달 중단은 pYAP 대 총 YAP 비율을 감소시켜 다운스트림 CCN 성장 인자 및 BIRC 세포자멸사 억제제의 발현을 증가시켰습니다.

체외 성숙(IVM)은 10년 이상 임상 환경에서 실행되었습니다. PCOS 환자의 난소과자극증후군(OHSS) 위험을 최소화하기 위한 기존 IVF의 대안으로 제안되었습니다. 최근 IVM은 항암 치료를 받는 환자, 특히 빠른 생식력 보존이 필요하거나 [9] 에스트로겐에 민감한 암 재발 위험이 있는 여성을 위한 방법으로 제안되었습니다. IVM이 불확실한 결과를 가진 불충분한 IVF 반응자에게 적용되었지만, 몇몇 연구자들은 난소 반응이 낮은 여성에서 IVM의 이점을 보여주었습니다.

IVM의 목적을 위해, 난모세포는 직경이 4-5mm 정도로 작은 난소 난포에서 단일 내강의 얇은 흡인 바늘로 초음파 유도 하에 검색됩니다. 일반 IVF에 비해 흡인 압력이 감소합니다. 따라서 더 낮은 흡인 압력을 사용하고 피 묻은 흡인이 얇은 바늘 루멘을 막을 수 있기 때문에 여러 바늘 천자가 필요합니다. 미성숙 난모세포는 밀집된 난구 세포로 둘러싸여 있기 때문에 난구 복합체를 제거하기 위해서는 난포벽의 소파술이 필요합니다. 모든 것은 IVM 절차 중에 난소 피질의 기계적 자극이 증가하고 결과적으로 Hippo 신호 전달 경로가 중단된다는 사실로 이어집니다.

가설 및 목적 우리의 목표는 IVM에 의해 유발된 난소 피질의 기계적 조작 및 트리거링이 위에서 언급한 메커니즘에 의해 난소 난포 활성화 및 모집을 유발할 수 있는지 여부를 조사하는 것입니다. 따라서 다음과 같은 정기적인 IVF 주기에서의 자극은 난소 반응을 개선하고 난모 세포 수율을 증가시킬 것입니다.

재료 및 방법 환자 POR 환자에 대한 전향적 코호트 연구. 볼로냐 기준에 따라 25명의 POR 환자가 선택되며 모든 환자는 적어도 하나의 문서화된 POR 주기를 갖게 됩니다.

IVM 프로토콜 POR 환자는 FSH-프라이밍을 사용하여 IVF 단위 프로토콜에 따라 IVM 주기로 치료됩니다. 간단히 말해서, 호르몬 프로필과 초음파 스캔을 포함하는 기본 평가는 월경 주기의 3일째에 수행되었습니다. 3일째에는 150 IU/일 재조합 FSH를 3일 동안 추가했습니다. 두 번째 평가는 월경 주기의 6일째에 수행되었습니다. 10,000 IU hCG(Pregnyl; Organon, Oss, Holland) 주사는 자궁내막 두께가 6mm 이상이고 선두 난포가 최소 12mm일 때 피하 투여되었습니다. 난자 채취는 7.5 kPa의 감소된 흡인 압력으로 19G 단일 루멘 흡인 바늘(Cook; Queensland, Australia)을 사용하여 초음파 유도하에 수행됩니다. 난포액은 2 IU/ml 헤파린이 포함된 난포 플러시 버퍼(Cook)가 들어 있는 배양 튜브에 수집됩니다. 밀집된 난모세포 복합체를 확인하는 것이 어렵기 때문에 추가 난모세포를 확인하기 위해 모든 흡인물을 여과했습니다.

체외 난모세포 성숙 배아낭 및 M1 난모세포를 75 IU FSH 및 75IU 황체형성 호르몬(LH; Ferring, Keil, Germany)이 보충된 IVM 배지(Sage; CT, USA)에서 배양하고 24-48시간 사이의 성숙도를 확인합니다. 문화 후. 성숙한 난모세포는 과립막 세포가 제거되고 세포질내 정자 주입(ICSI)에 의해 수정될 것입니다. ICSI 후, 난모세포는 IVF 배지로 옮겨질 것입니다. 수정은 2개의 별개의 전핵(2PN)의 출현 및 2개의 극체의 돌출에 대해 난모세포를 검사함으로써 ICSI 18시간 후에 평가될 것이다.

IVF 프로토콜 IVM 치료 후 환자가 임신에 실패한 경우 이전 IVF 치료(IVM 주기 이전)에서와 동일한 제어된 난소과자극 프로토콜을 사용하여 기존의 IVF 치료를 제공받게 됩니다. 각 환자는 자신의 통제 역할을 할 것입니다.

결과 측정 결과 측정에는 제어된 난소 과자극 변수, 회수된 난모세포 수, 흡인 당일 성숙한 난모세포 수, 수정률, 배아 품질 및 이식된 배아 수가 포함됩니다.