卵巣反応が低い患者に対する IVM。それはIVF結果を改善し、次のIVFサイクルを改善しますか?

卵巣反応が低い患者における IVM 治療。 それは体外受精の結果を改善しますか、それとも卵胞の活性化を引き起こし、次の体外受精サイクルでの成功の可能性を高めますか?

科学的背景:

卵巣反応不良 (POR) は、体外受精における主要な治療上の課題の 1 つです。 低応答者患者の有病率は、文献では 9 ～ 24% の間で変動しますが、出産可能年齢の増加により、不妊の主な原因の 1 つになると予想されます。 標準プロトコルに適切に対応できず、適切な卵胞を動員できないと、卵母細胞の生産が減少し、周期がキャンセルされ、全体として、妊娠の可能性が大幅に低下します. POR に対するいくつかの治療アプローチが検討されています。しかし、単一の効果的な戦略はまだ確立されていません。 以前は、卵巣の楔状切除やジアテルミーやレーザーによる卵巣の「掘削」などの卵巣皮質に対する機械的操作が、多嚢胞性卵巣症候群 (PCOS) 患者の卵胞の成長を誘発することが示されていました。

最近、卵巣皮質の断片化とHippoシグナル伝達経路のin vitro破壊とAktシグナル伝達の活性化の後に、出生が報告されました。 処理された卵巣断片は患者に移植され、卵胞の成長、成熟卵の回収、体外受精、胚移植が行われました。元気な赤ちゃんが産まれました。 カバのシグナル伝達経路は、最適な臓器サイズを維持するために不可欠であり、すべての後生動物で保存されています [6-8]。 この研究では、卵巣の断片化がアクチン重合を増加させ、YAPの核局在化の増加とともにリン酸化Yes関連タンパク質（pYAP）レベルを減少させることによりHippoシグナル伝達を混乱させ、CCN成長因子遺伝子およびBIRCアポトーシス阻害剤の発現増加をもたらすことが示された. 分泌されたCCN2と関連因子が卵胞の成長を促進

卵巣の断片化、Hippo シグナル伝達、および卵胞の成長に関与する遺伝子は、卵巣の生理学および病態生理学にとって重要です。 卵巣の断片化は細胞間張力の変化をもたらし、G-アクチンからF-アクチンへの変換を促進しました。 Hippoシグナル伝達のその後の破壊により、pYAPと全YAPの比率が減少し、下流のCCN成長因子とBIRCアポトーシス阻害剤の発現が増加しました

体外成熟 (IVM) は、10 年以上にわたって臨床現場で実践されてきました。 PCOS患者の卵巣過剰刺激症候群（OHSS）のリスクを最小限に抑えるため、従来のIVFに代わるものとして提案されています。 最近、抗がん治療を受けている患者、特に迅速な妊孕性温存が必要な女性 [9] またはエストロゲン感受性のがん再発のリスクに直面している女性のための方法として IVM が提案されています。 IVM は体外受精の応答が不十分な人に適用されており、その結果はあいまいですが、卵巣応答が低い女性に IVM が有効であることを示した研究者が何人かいます。

IVM の目的で、卵母細胞は、直径 4 ～ 5 mm ほどの小さな卵胞から、シングル ルーメンの細い吸引針を使用した超音波ガイドの下で取得されます。 通常の体外受精に比べて吸引圧が下がります。 したがって、より低い吸引圧力が使用され、血の混じった吸引物が細い針の内腔を塞ぐ可能性があるため、複数の針の穿刺が必要です。 未熟な卵母細胞は密集した卵丘細胞に囲まれているため、卵丘卵母細胞複合体を取り除くために卵胞壁の掻爬が必要です。 すべては、IVM手順中に卵巣皮質の機械的刺激が増加し、その結果、Hippoシグナル伝達経路が破壊されるという事実につながります。

仮説と目的 私たちの目的は、IVM によって引き起こされる卵巣皮質の機械的操作とトリガーが、上記のメカニズムによって卵胞の活性化と動員を引き起こすことができるかどうかを調査することです。 したがって、次の定期的な体外受精サイクルで刺激すると、卵巣反応が改善され、卵母細胞の収量が増加します。

材料と方法 患者 POR 患者に関する前向きコホート研究。 ボローニャの基準に基づいて 25 人の POR 患者が選択され、すべての患者に少なくとも 1 つの文書化された POR サイクルがあります。

IVM プロトコル POR 患者は、FSH プライミングを使用して、IVF ユニット プロトコルに従って IVM サイクルで治療されます。 簡単に言えば、ホルモンプロファイルと超音波スキャンを含むベースライン評価が月経周期の3日目に行われました。 3 日目に、150 IU/日の組換え FSH を 3 日間添加しました。 2 回目の評価は、月経周期の 6 日目に行われました。 子宮内膜の厚さが 6 mm 以上になり、先頭の卵胞が少なくとも 12 mm になると、10,000 IU hCG (Pregnyl; Organon, Oss, Holland) の注射が皮下投与されました。 卵母細胞の回収は、19G シングル ルーメン吸引針 (Cook; オーストラリア、クイーンズランド州) を使用した超音波ガイド下で、吸引圧を 7.5 kPa に下げて行われます。 卵胞液は、2 IU/ml ヘパリンを含む卵胞フラッシュバッファー (Cook) を含む培養チューブに収集されます。 圧縮された卵母細胞複合体を識別することは困難であるため、追加の卵母細胞を識別するためにすべての吸引物をろ過しました。

インビトロ卵母細胞成熟 胚小胞およびＭ１卵母細胞は、７５ＩＵ ＦＳＨおよび７５ＩＵ黄体形成ホルモン（ＬＨ；フェリング、ケイル、ドイツ）を補充したＩＶＭ培地（セージ；ＣＴ、米国）で培養され、２４〜４８時間の間に成熟をチェックする。文化の後。 成熟した卵母細胞は、顆粒膜細胞をむき出しにし、細胞質内精子注入法 (ICSI) によって受精させます。 ICSI後、卵母細胞はIVF培地に移されます。 受精は、ICSI の 18 時間後に、2 つの異なる前核 (2PN) の出現と 2 つの極体の放出について卵母細胞を検査することによって評価されます。

IVF プロトコル IVM 治療に続いて、患者が妊娠に失敗した場合、以前の IVF 治療 (IVM サイクルの前) と同じ制御された卵巣過剰刺激プロトコルを使用して、従来の IVF 治療が提供されます。 各患者は、彼女自身のコントロールとして機能します。

結果の測定 結果の測定には、制御された卵巣過剰刺激変数、回収された卵母細胞の数、吸引日の成熟卵母細胞、受精率、胚の質、および移植された胚の数が含まれます。