A neoantigénekkel szemben reaktív T-sejt-receptorok expresszálására genetikailag módosított autológ T-sejtek beadása áttétes rákban szenvedő emberekben

Háttér:

• Az autológ tumor-infiltráló limfociták (TIL) beadása teljes, tartós regressziót közvetíthet a metasztatikus melanómában szenvedő résztvevők 20-25%-ánál. A közelmúltban végzett vizsgálatok kimutatták, hogy ezek a TIL-ek túlnyomórészt olyan egyedi mutált neoantigéneket ismernek fel, amelyeket a rák expresszál, és amelyek nem oszthatók más melanómákkal.
• A tömeges autológ TIL beadása számos más szilárd rákos megbetegedésben, beleértve a gyomor-bél traktus és az urogenitális traktus rákos megbetegedéseit is, csekély terápiás hatást fejt ki.
• A National Cancer Institute Surgery Branch (NCI-SB) legutóbbi tanulmányai kimutatták, hogy a nem melanóma szilárd rákos megbetegedések TIL-jei is tartalmazhatnak olyan T-sejteket, amelyek reaktívak a rákban kifejeződő, nem megosztott egyedi mutált vagy onkovirális neoantigénekkel szemben. Ezeknek a T-sejteknek a gyakorisága nagyon alacsony (gyakran <0,1%), ezért nehéz a mutációra reaktív T-sejteket izolálni és a hatékony kezeléshez szükséges szintre növeszteni.
• Egyetlen kemorefrakter metasztatikus cholangiocarcinomában szenvedő betegben viszonylag tiszta neoantigénreaktív TIL populációt tudtunk növeszteni, és ezeknek a sejteknek a beadása az összes metasztatikus betegség majdnem teljes regresszióját közvetítette, amely immár 2,5 évig tart.
• Megközelítéseket dolgoztunk ki e ritka neoantigénreaktív T-sejtek azonosítására gyakori nem melanóma rákokból, T-sejt receptoraik (TCR) izolálására, valamint autológ perifériás vér limfociták (PBL) genetikai manipulálására, hogy ezeket a TCR-eket nagy hatékonysággal expresszálják. A neoantigén TCR génmódosított sejtek képesek felismerni és elpusztítani az autológ rákot in vitro.
• A nem szinonim mutációkból származó neoantigénekkel szembeni reaktivitás mellett a T-sejtek képesek felismerni a humán papilloma vírus (HPV) epitópjait a HPV által kiváltott rákos megbetegedésben szenvedőkben. Az ezekből a reaktív sejtekből származó TCR izolálható és retrovírussal nagy hatékonysággal transzdukálható autológ PBL-be.
• Ezekkel a technikákkal számos TCR-t izoláltunk, amelyek szelektíven felismerik a közös mutált onkogéneket (például KRAS, TP53) vagy megosztott onkovirális fehérjéket (pl. HPV) számos fő hisztokompatibilitási komplex (MHC-I és MHC-II) összefüggésében.
• Ez a klinikai protokoll a rák által kifejezett egyedi mutált vagy onkovirális neoantigéneket felismerő TCR-eket kódoló génekkel transzdukált autológ PBL-ek adaptív átvitelével kezeli a refrakter szilárd rákos betegeket.

Célok:

-Elsődleges feladat:

-- Határozza meg az objektív válasz arányát (a RECIST v1.1 kritériumok segítségével) azon szilárd rákban szenvedő résztvevők esetében, akik pembrolizumabot és autológ PBL-t kapnak (2. kar), amelyeket olyan T-sejt-receptorokat kódoló génekkel transzdukáltak, amelyek felismerik a mutált vagy onkovirális neoantigéneket autológ rák

Jogosultság:

- A résztvevőknek rendelkezniük kell:

• Életkor 18 évnél nagyobb és 70 évnél kisebb
• Áttétes szilárd rák, legalább egy mérhető lézióval, amely az öt kohorsz egyikébe esik: (1) gyomor-bélrendszeri és húgyúti daganatok; (2) mell-, petefészek- és egyéb szilárd daganatok; (3) nem-kissejtes tüdőrák (NSCLC); és (4) endokrin daganatok, beleértve a neuroendokrin daganatokat, és (5) myeloma multiplex szilárd tömeggel (plazmacitómák).
• Értékelhető szilárd rák, amely standard kemoterápia vagy standard szisztémás terápia után kiújult
• Normál laboratóriumi alapértékek.
• Nincs allergia vagy túlérzékenység a nagy dózisú aldesleukin beadására
• Nincsenek egyidejűleg súlyos egészségügyi megbetegedések vagy bármilyen immunhiányos állapot.

Tervezés:

• A résztvevők már átestek reszekción vagy biopszián, hogy tumort nyerjenek autológ TIL-tenyészetek létrehozásához. Ezt a 03-C-0277 számú NCI-SB sejtgyűjtési protokoll (Cell Harvest and Preparation for Surgery Branch Adoptive Cell Therapy Protocols) szerint hajtják végre.
• Exomikus szekvenálást, és gyakran RNA-Seq-t is végzünk a páciens rákban kifejeződő mutációk azonosítására. Több autológ TIL tenyészetet növesztünk, és teszteljük az autológ tumorból származó mutációkkal szembeni reaktivitást az általunk kifejlesztett tesztekkel, amelyek magukban foglalják az autológ antigénprezentáló sejteknek a mutációt tartalmazó hosszú peptidekkel vagy a mutációt kódoló tandem minigénekkel való érintkezését.
• A mutációkkal szemben reakcióképes T-sejt-tenyészeteket azonosítani kell, és a mutációt felismerő egyedi T-sejt-receptorokat szintetizálni kell, és retrovírus létrehozására használják fel a TCR-nek a páciens autológ PBL-ébe történő átviteléhez.
• Az onkovirális neoantigént expresszáló daganatokkal rendelkező résztvevőket autológ PBL-ekkel kezelik, amelyeket retrovírussal transzdukáltak az onkovirális neoantigént megcélzó TCR(ek)kel.
• Azok a résztvevők, akik mutáns közös onkogéneket (például KRAS, TP53) vagy onkovirális fehérjéket (pl. HPV) expresszálnak, amelyek a megfelelő restrikciós elemet is expresszálják, autológ PBL-ekkel kezelhetők, amelyeket retrovirálisan transzdukáltak a Sebészeti ágban korábban izolált TCR-rel (TCR-ekkel) megcélozva a közös mutált antigént. Ezek a résztvevők TCR-ek sejtinfúziós termékét kapják, amely mutáns közös onkogéneket (például KRAS, TP53) vagy onkovirális fehérjéket (például HPV) céloz meg. A sejtinfúziós termékük nem tartalmaz egyedi (azaz nem megosztott) TCR-rel transzdukált PBL-t.
• A résztvevőket az alábbi öt csoport valamelyikébe sorolják be: (1) áttétes gyomor-bélrendszeri és húgyúti daganatok; (2) áttétes emlő-, petefészek- és egyéb szilárd daganatok; (3) áttétes nem-kissejtes tüdőrák (NSCLC); (4) metasztatikus endokrin daganatok, beleértve a neuroendokrin daganatokat, és (5) mielóma multiplex szilárd tömeggel (plazmacitómák). A neoantigéneket (mutált közös onkogének, például TP53, KRAS, egyedi, nem szinonim mutációk vagy onkovirális fehérjék) célzó TCR-rel transzdukált autológ PBL-t ezután nagy számban kiterjesztjük szabványos gyors expanziós protokollunk segítségével.
• Az 1. és 2. karba beiratkozott résztvevők nem myeloablatív, limfodepletív preparatív kezelést kapnak, amely ciklofoszfamidból és fludarabinból áll, majd autológ transzdukált PBL és nagy dózisú aldesleukin infúziót kapnak. A vezető vizsgálatvezető (PI) belátása szerint a 3. kohorszba (NSCLC) beiratkozott résztvevők alacsony dózisú aldesleukint kaphatnak.
• A 2. karon beiratkozott résztvevők a sejtbeadás előtt pembrolizumabot kapnak, a sejtinfúziót követően pedig háromhetente további három adagot kapnak. Azok a résztvevők, akiknél jelentős szervi toxicitást tapasztaltak a korábbi pembrolizumab-kezelés (vagy azzal egyenértékű PD-1/PD-L1 blokád) miatt, az 1. karon vesznek részt.
• A klinikai és immunológiai választ körülbelül 4-6 héttel a sejtinfúzió után, majd ezt követően rendszeresen értékelik.
• Várhatóan havonta körülbelül egy-egy résztvevő jelentkezhet a vizsgálatra a 2. ág négy szövettani kohorszának mindegyikében. Az 1. ágon beiratkozott kohorsonként legfeljebb 15 résztvevő lehet (75 résztvevő az 1. karon), és a felhalmozás legfeljebb 4 x 50 = 200 összesen értékelhető résztvevő a 2. karon. Várhatóan a teljes gyártási kapacitás elérése után az elhatárolás körülbelül 4-5 éven belül befejeződik. Annak érdekében, hogy kevés felbecsülhetetlen résztvevő vehessen részt, a felhalmozási felső határ 285 fő.