Введение аутологичных Т-клеток, генетически сконструированных для экспрессии рецепторов Т-клеток, реактивных против неоантигенов, у людей с метастатическим раком

Задний план:

• Введение аутологичных опухоль-инфильтрирующих лимфоцитов (TIL) может способствовать полной и стойкой регрессии у 20-25% участников с метастатической меланомой. Недавние исследования показали, что эти TIL преимущественно распознают уникальные мутировавшие неоантигены, экспрессируемые раком, не присущие другим меланомам.
• Введение нерасфасованной аутологичной TIL участникам с различными другими солидными видами рака, включая рак желудочно-кишечного тракта и мочеполового тракта, практически не оказывает терапевтического воздействия.
• Недавние исследования в Хирургическом отделении Национального института рака (NCI-SB) показали, что TIL из немеланомных солидных раков также может содержать Т-клетки, реактивные против не общих уникальных мутировавших или онковирусных неоантигенов, экспрессируемых в раке. Частота этих Т-клеток очень низка (часто <0,1%), поэтому трудно выделить и вырастить Т-клетки, реагирующие на мутацию, до уровней, необходимых для эффективной терапии.
• У одного пациента с химиорезистентной метастатической холангиокарциномой мы смогли вырастить относительно чистую популяцию неоантиген-реактивных TIL, и введение этих клеток опосредовало почти полную регрессию всех метастатических заболеваний, которая в настоящее время длится 2,5 года.
• Мы разработали подходы для идентификации этих редких неоантиген-реактивных Т-клеток из распространенных немеланомных видов рака, выделения их Т-клеточных рецепторов (TCR) и генной инженерии аутологичных лимфоцитов периферической крови (PBL) для экспрессии этих TCR с высокой эффективностью. Клетки с модифицированным геном неоантигена TCR могут распознавать и уничтожать аутологичный рак in vitro.
• В дополнение к реактивности к неоантигенам, полученным в результате несинонимичных мутаций, Т-клетки могут распознавать эпитопы вируса папилломы человека (ВПЧ) у участников с раком, вызванным ВПЧ. TCR из этих реактивных клеток можно выделить и с высокой эффективностью трансдуцировать ретровирусом в аутологичные PBL.
• С помощью этих методов мы выделили ряд TCR, избирательно распознающих общие мутировавшие онкогены (например, KRAS, TP53) или общие онковирусные белки (например, ВПЧ) в контексте нескольких основных комплексов гистосовместимости (MHC-I и MHC-II).
• Этот клинический протокол будет лечить участников с рефрактерным солидным раком с использованием адоптивного переноса аутологичных PBL, трансдуцированных генами, кодирующими TCR, которые распознают уникальные мутировавшие или онковирусные неоантигены, экспрессируемые раком.

Цели:

-Основная цель:

--Определить уровень объективного ответа (используя критерии RECIST v1.1) у участников с солидным раком, которые получают пембролизумаб плюс аутологичные PBL (группа 2), которые были трансдуцированы генами, кодирующими рецепторы Т-клеток, которые распознают мутированные или онковирусные неоантигены в аутологичный рак

Право на участие:

-Участники должны быть/иметь:

• Возраст больше или равен 18 годам и меньше или равен 70 годам
• Метастатический солидный рак по крайней мере с одним поражением, которое можно измерить, которое попадает в одну из пяти когорт: (1) рак желудочно-кишечного тракта и мочеполовой системы; (2) рак молочной железы, яичников и другие солидные виды рака; (3) немелкоклеточный рак легкого (НМРЛ); и (4) эндокринные опухоли, включая нейроэндокринные опухоли, и (5) множественная миелома с солидными образованиями (плазмоцитомы).
• Поддающийся оценке солидный рак, который рецидивировал после стандартной химиотерапии или стандартной системной терапии.
• Нормальные основные лабораторные показатели.
• Нет аллергии или гиперчувствительности к введению высоких доз альдеслейкина.
• Отсутствие сопутствующих серьезных заболеваний или любой формы иммунодефицита.

Дизайн:

• Участники уже подверглись резекции или биопсии, чтобы получить опухоль для создания аутологичных культур TIL. Это будет проводиться в соответствии с протоколом сбора клеток NCI-SB 03-C-0277 (Протоколы сбора клеток и подготовки к хирургическому отделению адаптивной клеточной терапии).
• Экзомное секвенирование и часто RNA-Seq будут выполняться для выявления мутаций, выраженных в раке пациента. Множественные аутологичные культуры TIL будут выращиваться и тестироваться на реактивность против мутаций из аутологичной опухоли с использованием разработанных нами анализов, которые включают воздействие на аутологичные антиген-презентирующие клетки длинных пептидов, содержащих мутацию, или тандемных мини-генов, кодирующих мутацию.
• Будут идентифицированы культуры Т-клеток с реактивностью против мутаций, а отдельные рецепторы Т-клеток, которые распознают мутацию, будут синтезированы и использованы для создания ретровируса для трансдукции TCR в аутологичные PBL пациента.
• Участники с опухолями, экспрессирующими онковирусные неоантигены, будут получать аутологичные PBL, трансдуцированные ретровирусом с помощью TCR, нацеленных на онковирусный неоантиген.
• Участники с опухолями, экспрессирующими мутированные общие онкогены (например, KRAS, TP53) или онковирусные белки (например, ВПЧ), которые также экспрессируют соответствующий рестрикционный элемент, могут лечиться аутологичными PBL, ретровирусно трансдуцированными TCR, ранее выделенными в хирургическом отделении. нацеливание на общий мутировавший антиген. Этим участникам будет введен продукт клеточной инфузии TCR, нацеленных на мутировавшие общие онкогены (например, KRAS, TP53) или онковирусные белки (например, ВПЧ). Их продукт для инфузии клеток не будет включать PBL, трансдуцированные уникальными (т. е. не общими) TCR.
• Участники будут включены в одну из пяти групп: (1) метастатический рак желудочно-кишечного тракта и мочеполовой системы; (2) метастатический рак молочной железы, яичников и другие солидные опухоли; (3) метастатический немелкоклеточный рак легкого (НМРЛ); (4) метастатические эндокринные опухоли, включая нейроэндокринные опухоли, и (5) множественная миелома с солидными образованиями (плазмоцитомы). Затем аутологичные PBL, трансдуцированные TCR, нацеленными на неоантигены (мутированные общие онкогены, например, TP53, KRAS, отдельные несинонимичные мутации или онковирусные белки), будут расширены до больших количеств с использованием нашего стандартного протокола быстрого расширения.
• Участники, включенные в группу 1 и группу 2, получат немиелоаблативную, лимфодеплетирующую подготовительную схему, состоящую из циклофосфамида и флударабина с последующей инфузией аутологичных трансдуцированных PBL и высоких доз альдеслейкина. По усмотрению главного исследователя (PI) участники, зачисленные в когорту 3 (NSCLC), могут получать низкие дозы альдеслейкина.
• Участники группы 2 будут получать пембролизумаб перед введением клеток и три дополнительные дозы каждые три недели после инфузии клеток. Участники, у которых возникло серьезное токсическое воздействие на органы из-за предыдущего лечения пембролизумабом (или эквивалентной блокадой PD-1/PD-L1), будут включены в группу 1.
• Клинический и иммунологический ответ будет оцениваться примерно через 4-6 недель после инфузии клеток и впоследствии периодически.
• Ожидается, что примерно один участник в месяц может быть включен в исследование для каждой из четырех гистологических когорт группы 2. Будет установлен лимит в 15 участников на когорту, включенную в группу 1 (75 участников для группы 1), и начисление до 4 x 50 = 200 всего поддающихся оценке участников в группе 2. Ожидается, что после достижения полной производственной мощности набор может быть завершен примерно через 4-5 лет. Чтобы учесть небольшое количество бесценных участников, потолок начисления будет установлен на уровне 285.