EVOO Coratina Intervention on lipids in non-diabéteszes hipertóniás betegek hemodialízis alatt (EVOOC-3H) (EVOOC-3H)

Részletes leírás: EXTRASZÜZ OLÍVAOLAJ KORATINA INTERVENCIÓ LIPIDEKRE NEM DIABETIKUS HIPERTENZÍV (H) HIPERLIPIDIÁMÁSBAN (H) IDŐSZAKOS HEMODIALÍZISBEN (H) (EVOOC-3H) ÁLLÓ BETEGEKBEN BEVEZETÉS Mi ismert. A krónikus hemodialízisben (HD) átesett betegek halálának elsődleges okai a szív- és érrendszeri események.

A szív- és érrendszeri kockázati tényezők (magas vérnyomás, 2-es típusú cukorbetegség, elhízás, alacsony sűrűségű lipoprotein (LDL) magas szintje, magas sűrűségű lipoprotein koleszterin (HDL) alacsony szintje, dohányzás és csökkent fizikai aktivitás) szinte általánosan jelen vannak a HD-ben szenvedőkben. A randomizált klinikai vizsgálatokból származó bizonyítékok azt mutatják, hogy a sztatinok alkalmazása HD-ben szenvedő betegeknél nem csökkenti a káros érrendszeri következmények kockázatát. A lakosság körében egyre több bizonyíték támasztja alá, hogy az olívaolajjal kiegészített mediterrán étrend szív- és érrendszeri és túlélési előnyökkel jár. Az extraszűz olívaolaj (EVOO) kedvező hatásai az egyszeresen telítetlen zsírsavak (MUFA) és a polifenolok magas tartalmának köszönhetőek. Az EVOO Coratina (EVOOC), amelyet a Puglia régióban, Bari tartományban gyártanak, magas polifenol-értékek jellemzik, amelyek 400 és 1000 mg/kg EVOO között mozognak.

Ami ismeretlen. Az EVOOC lehetséges hatásait a HD-ben szenvedő betegekre formálisan nem vizsgálták sem a helyettesítő, sem a páciens szintű végpontok tekintetében.

Miért ez a tanulmány. A kutatók szeretnének értékelni az EVOOC hatásait a krónikus HD-n átesett, nem diabéteszes hipertóniás betegekben egy sor helyettesítő végpontra.

A JAVASLAT CÉLJA A kutatók megvizsgálják a magas polifenoltartalmú EVOOC hatását a finomított olívaolajjal (ROO) összehasonlítva a HD betegek lipidszintjére.

DIZÁJNT TANULNI

Résztvevők:

A vizsgálók nem cukorbeteg hipertóniás és hiperlipidémiás betegeket vonnak be, akik krónikus HD-n esnek át. A hipertónia 130 Hgmm feletti szisztolés vérnyomás és 80 Hgmm feletti diasztolés vérnyomás, vagy bármilyen vérnyomáscsökkentő szerrel rendelkezik.

A hiperlipidémiát 70 mg/dl-nél nagyobb LDL-koleszterin-értékként vagy bármilyen dózisban sztatinok beadásaként határozzák meg.

A jogosult betegek nagykorúak lehetnek. (40-80 évesek)

A következő betegek kizárásra kerülnek:

1. A diabéteszes vesebetegségtől vagy a hipertóniás vesebetegségtől eltérő alapbetegség
2. Súlyos szívelégtelenség (NYHA III. vagy IV. osztály)
3. Alacsony együttműködési képességű betegek
4. Dohányzás, antioxidáns-kiegészítők (pl. karotinoidok, C-vitamin, E-vitamin és glutation), aszpirin vagy bármely más, megállapított antioxidáns tulajdonságú gyógyszer fogyasztása, hiperlipidémia, elhízás (testtömegindex >30 kg/m2), cukorbetegség, cöliákia vagy egyéb bélbetegség, életveszélyes
5. A várható élettartam kevesebb, mint 6 hónap az irányító orvosok értékelése alapján
6. Az ügyvezető orvos értékelése alapján képtelenség részt venni a vizsgálatban

Beavatkozások:

A kísérleti beavatkozás az EVOOC lesz. A résztvevők két evőkanál olívaolajat fogyasztanak a nap folyamán: egy kanál 10 g EVOOC-t (>5 mg teljes biofenol/kg EVOOC) tartalmaz ebédre, egyet pedig vacsorára. A naponta bevitt összes biofenol >10 mg lesz.

Összehasonlító:

A kontroll a finomított olívaolaj (ROO) lesz. A résztvevők két evőkanál ROO-t fogyasztanak a nap folyamán: egy kanál 10 g ROO-t ebédre és egyet vacsorára.

Társbeavatkozások:

A betegek bármilyen gyógyszert kaphatnak vérszegénységre, csontbetegségre, táplálkozásra és egyéb gyógyszerekre, beleértve a mediterrán étrendre vonatkozó étrendi tanácsokat is.

A betegek krónikus HD-ben vagy hemodiafiltrációban (HDF) részesülhetnek. Minden kezelés nagy áramlású lesz.

ESETJELENTÉS ŰRLAP Ez tartalmazza a demográfiai eredményeket és a laboratóriumi adatokat a nyomon követés során minden egyes látogatás alkalmával. Ezen túlmenően a felvételi és kizárási kritériumok jelen lesznek a véletlenszerű besorolás időpontjában. A napi táplálékot és az egyedi mennyiségeket egy „ad hoc” tervezett esetjelentési űrlapon rögzítik. A táplálékfelvételt elemzik és tápanyaggá alakítják a Medisystems (Anthropometric variable -weight) hasznos szoftver segítségével a vizsgálat során.

A fizikai aktivitást a Minnesota Leisure Time Physical Activity Questionnaire értékeli. A fizikai aktivitást nem korlátozzák.

Mód:

Ez a tanulmány egy központilag randomizált vizsgálat lesz, amelyben a résztvevők, a vizsgálók és az eredményértékelők megvakítják a kezelési szándék elve alapján.

Szervezeti szempontok:

A vizsgálatot a Schena Alapítvány végzi a Bari Egyetem Poliklinika Vese Osztályával és a Bari Egyetem MED&FOOD spin-offjával együttműködve.

Az utánkövetés időtartama 12 hét lesz. A klinikai látogatásra és a laboratóriumi ellenőrzésre 4 hetente kerül sor, 3 egymást követő hónapon keresztül.

Randomizálás:

A véletlenszerűsítést központilag, a Schena Alapítványnál hajtják végre, megfelelő rétegzéssel.

Minta nagysága:

A minta mérete opportunista. A vizsgálat kísérleti jellege alapján a vizsgálók összesen 24 személyt vesznek fel, akik közül 12 személy EVOOC-t, 12 pedig ROO-t kap. Ezért nincsenek formális mintanagyság-számítások.

NYOMON KÖVETÉS Az étrendet és a klinikai megfigyelést nefrológusok, kardiológusok és dietetikusok végzik. Mindkét csoport résztvevői táplálkozási tanácsadásban részesülnek. A tanácsadást írásos tájékoztatás kíséri a tipikus elfogyasztott élelmiszerek részletes leírásával és speciális kérdőívek használatával: 1) a mediterrán diéta betartásának 14 tétele; 2) az étkezési gyakoriság 137 tétele; 3) a fizikai aktivitás Minnesota-kérdőíve; 4) a rövid forma-36 az életminőség érdekében.

KARDIOLÓGIAI VIZSGÁLATOK

• Az intima-media vastagság vizsgálata a carotis-fal intima-media vastagságának (cIMT) mérésével történik. A visszhangmérés három zónában történik: a) proximális zóna: körülbelül 2 cm-rel az áramláselosztó előtt; b) disztális zóna: körülbelül ½ cm-rel az áramláselosztó előtt; (c) középső zóna. Ezeket az adatokat használjuk fel a cIMT számtani átlagának meghatározására.
• A brachialis artéria reaktivitás vizsgálata a brachialis artéria endothel függő áramlás által közvetített értágulatának ultrahangvizsgálatával történik. EKG
• 24 órás EKG Holter monitorozás
• 2D Color Doppler Echocardiographia A kardiológiai vizsgálatokra a hosszú intradialitikus periódus alatt kerül sor, kivéve az EKG Holter monitorozást, amelyet legalább egy órával a dialízis előtt és négy órával utána kell elvégezni.

EREDMÉNYEK

Az eredmények a következők lesznek:

• kardiovaszkuláris esemény kezdete
• összetett kimenetel: szívinfarktus, revaszkularizáció, ischaemiás stroke, perifériás artériás betegség, kardiovaszkuláris halál
• a vér LDL és HDL koleszterin koncentrációja, összkoleszterin,
• vérnyomás MÓDSZEREK A vérmintákat reggel, 12 órás koplalás után le kell fojtani. A vizeletmintát az első, reggeli vizeletürítéstől kell gyűjteni reziduális diurézis jelenlétében.

Vér- és vizeletmintát vesznek a randomizációs vizit alkalmával és minden beavatkozási időszakban (4 hetente, összesen 3 hónapig) a két dialízis közötti rövid időintervallum után.

A perifériás vér mononukleáris sejtjeit (PBMC) gyűjtik a genomvizsgálathoz. Szérummintákat gyűjtünk a gyulladást elősegítő (IL-1b, IL-6, TNFa) és gyulladásgátló (IL4, IL-10) citokinek és a CRP mérésére.

Néhány ml vizeletet gyűjtünk a tirozol és a hidroxitirozol tömegspektrometriás meghatározásához. Ezenkívül más metabolitokat mágneses magrezonanciával mérnek.

Oxidatív stressz értékelés. A vizsgálók T0-nál és 12 hét elteltével értékelik a ROS szérumkoncentrációit spektrofotometriás módszerrel, a kereskedelemben kapható kit (dROMs Test Diacron) segítségével. A kutatók értékelni fogják a szérum 8-oxodG-értékét is, amely az oxidatív DNS-károsodás markere ELISA-val (Trevigen). A kutatók azonosítani fogják a peroxidra érzékeny fluoreszcens 2',7'-diklór-dihidrofluoreszcin-diacetát (DCFH, Molecular Probes) által a PBMC-kben generált ROS természetét. A mitokondriális ROS képződés kinetikai mérését a DCFH H2O2-függő oxidációja által okozott lineáris fluoreszcencia-növekedés mérésével értékeljük. A NADPH-függő szuperoxid képződést lucigeninnel fokozott kemilumineszcenciás módszerekkel mérjük HD betegekből izolált PBMC-kben. Ezzel párhuzamosan a kutatók elkészítik a PBMC-k RIPA lizátumait, és Western blot analízissel értékelik a különböző NADPH oxidáz alegységek expresszióját. A gp91phox/Nox2 vagy Rac1 antitestek ellenanyagait az Upstate/Millipore fogja szállítani; A p22phox, a p47phox vagy a p67phox a Santa Cruz Biotechnologies cégtől vásárolható meg. Ezenkívül a kis GTPáz Rac aktivitását affinitáskicsapással értékeljük a glutation-S-transzferázhoz (GST-PAK-1-PBD) kapcsolt p21-aktivált kináz (PAK-1) kötődomén használatával glutation-agaróz gyöngyökön (Millipore). /Upstate Biotech.).

STATISZTIKAI ELEMZÉS A változó eloszlás normálisságát a ferdeség és a görbület elemzésével értékeljük. Egyfaktoros ANOVA és Kruskall-Wallis tesztet használunk a két csoport közötti különbségek elemzésére (eset-kontroll).

Az ismételt mérések általános lineáris modelljét használjuk több páros összehasonlítással a csoportok közötti különbségek felmérésére.

A finomított OO és EVOO értékek linearitását a biofenolos vegyületek dózis-válasz hatásának teszteléséhez kell meghatározni.

A minta méretére és teljesítményére vonatkozó számítások nem alkalmazhatók, tekintettel a vizsgálat kísérleti jellegére, egy opportunista minta toborzásával.

Elsődleges statisztikai elemzés: Minden elemzést a kezelés szándéka alapján végeznek el. A statisztikai szignifikancia értéke p<0,05 egy kétoldali teszt esetén.

AZ EVOOC ÉS ROO EVOOC JELLEMZŐI: Ezt az olívaolajat DNS-tanúsítvánnyal rendelkező Coratina kultivarfák nyerik.

ROO: Ez a placeboként használt olívaolaj finomított OO keveréke. A zsírsav-összetételt és a polifenoltartalmat gázkromatográfiával, illetve HPLC-vel határoztuk meg.

A polifenolok nem mutathatók ki a ROO-ban. Az EVOOC és a ROO (nutraceutic label) jellemzőit ez a protokoll tartalmazza.

Az OO-kat a MED&FOOD spin-off, a Bari Egyetem biztosítja.