EVOO Coratina Interwencja dotycząca lipidów u pacjentów z nadciśnieniem tętniczym bez cukrzycy poddawanych hemodializie (EVOOC-3H) (EVOOC-3H)

Szczegółowy opis: EXTRAVIRGIN OLIWA Z OLIWEK CORATINA INTERWENCJA NA LIPIDY U PACJENTÓW BEZ CUKRZYCY Z NADCIŚNIENIEM (H) Z HIPERLIPIDEMIĄ (H) PODDAWANYCH OKRESOWEJ HEMODIALIZA (H) (EVOOC-3H) WPROWADZENIE Co wiadomo. Głównymi przyczynami zgonów pacjentów poddawanych przewlekłej hemodializie (HD) są zdarzenia sercowo-naczyniowe.

Czynniki ryzyka sercowo-naczyniowego (nadciśnienie, cukrzyca typu 2, otyłość, wysoki poziom lipoprotein o małej gęstości (LDL), niski poziom cholesterolu związanego z lipoproteinami o dużej gęstości (HDL), palenie i zmniejszona aktywność fizyczna) są prawie powszechnie obecne u osób z HD. Dowody z randomizowanych badań klinicznych wskazują, że podawanie statyn pacjentom poddawanym HD nie zmniejsza ryzyka niekorzystnych wyników naczyniowych. W populacji ogólnej pojawia się coraz więcej dowodów na to, że dieta śródziemnomorska uzupełniona oliwą z oliwek zapewnia korzyści sercowo-naczyniowe i przeżycie. Korzystne działanie oliwy extravergine (EVOO) wynika z połączenia wysokiej zawartości jednonienasyconych kwasów tłuszczowych (MUFA) i polifenoli. EVOO Coratina (EVOOC), produkowana w regionie Puglia w prowincji Bari, charakteryzuje się wysokimi wartościami polifenoli w zakresie od 400 do 1000 mg/kg EVOO.

Co jest nieznane. Potencjalne skutki EVOOC u osób z HD nie zostały formalnie zbadane zarówno dla punktów końcowych na poziomie zastępczym, jak i pacjenta.

Dlaczego to badanie. Badacze chcą ocenić wpływ EVOOC u pacjentów bez cukrzycy z nadciśnieniem i przewlekłą chorobą Huntingtona na szereg zastępczych punktów końcowych.

CEL PROPOZYCJI Badacze zbadają wpływ EVOOC o wysokiej zawartości polifenoli w porównaniu z rafinowaną oliwą z oliwek (ROO) na poziom lipidów u pacjentów HD.

PROJEKT BADANIA

Uczestnicy:

Badacze włączą pacjentów bez cukrzycy z nadciśnieniem tętniczym i hiperlipidemią przechodzących przewlekłą HD. Nadciśnienie będzie definiowane jako skurczowe ciśnienie krwi >130 mmHg i rozkurczowe ciśnienie krwi >80 mmHg lub przyjmujące jakiekolwiek leki przeciwnadciśnieniowe.

Hiperlipidemia będzie definiowana jako stężenie cholesterolu LDL powyżej 70 mg/dl lub przyjmowanie statyn w dowolnej dawce.

Kwalifikujący się pacjenci mogą być pełnoletni. (40-80 lat)

Następujący pacjenci zostaną wykluczeni:

1. Choroba wyjściowa inna niż cukrzycowa choroba nerek lub nadciśnieniowa choroba nerek
2. Ciężka niewydolność serca (klasa III lub IV wg NYHA)
3. Pacjenci z niską podatnością
4. Palenie tytoniu, przyjmowanie suplementów przeciwutleniających (np. karotenoidów, witaminy C, witaminy E i glutationu), aspiryny lub innych leków o ustalonych właściwościach przeciwutleniających, hiperlipidemia, otyłość (wskaźnik masy ciała >30 kg/m2), cukrzyca, celiakia lub inne choroba jelit, zagrażająca życiu
5. Oczekiwana długość życia <6 miesięcy na podstawie oceny lekarzy prowadzących
6. Brak możliwości udziału w badaniu na podstawie oceny lekarza prowadzącego

Interwencje:

Eksperymentalną interwencją będzie EVOOC. Uczestnicy będą spożywać dwie łyżki oliwy z oliwek w ciągu dnia: jedna łyżka zawierająca 10 g EVOOC (>5 mg wszystkich biofenoli/kg EVOOC) podczas lunchu i jedna podczas kolacji. Całkowita ilość przyjmowanych biofenoli dziennie wyniesie >10 mg.

Porównywarka:

Kontrolą będzie rafinowana oliwa z oliwek (ROO). Uczestnicy będą spożywać dwie łyżki stołowe ROO w ciągu dnia: jedną łyżkę zawierającą 10 g ROO w porze lunchu i jedną w porze kolacji.

kointerwencje:

Pacjenci mogą otrzymywać dowolny lek na anemię, choroby kości, odżywianie i inne, w tym porady dietetyczne dotyczące diety śródziemnomorskiej.

Pacjenci mogą być poddawani przewlekłej HD lub hemodiafiltracji (HDF). Wszystkie zabiegi będą wykonywane z dużą częstotliwością.

FORMULARZ RAPORTU PRZYPADKU Obejmuje wyniki demograficzne i dane laboratoryjne podczas każdej wizyty podczas obserwacji. Ponadto kryteria włączenia i wyłączenia będą obecne w czasie randomizacji. Codzienna żywność i poszczególne ilości zostaną zapisane w zaprojektowanym ad hoc formularzu opisu przypadku. Spożycie pokarmu będzie analizowane i przeliczane na składniki odżywcze za pomocą przydatnego oprogramowania Medisystems (zmienna antropometryczna – waga) będzie mierzone podczas badania.

Aktywność fizyczna zostanie oceniona za pomocą kwestionariusza aktywności fizycznej w czasie wolnym od stanu Minnesota. Nie zostaną wprowadzone żadne ograniczenia dotyczące aktywności fizycznej.

Metody:

To badanie będzie centralnie randomizowaną próbą z zaślepieniem uczestników, badaczy i osób oceniających wyniki, w oparciu o zasadę zamiaru leczenia.

Aspekty organizacyjne:

Badanie zostanie przeprowadzone przez Fundację Schena we współpracy z Oddziałem Nefrologicznym Polikliniki Uniwersytetu w Bari oraz oddziałem MED&FOOD Uniwersytetu w Bari.

Okres obserwacji wyniesie 12 tygodni. Wizyta kliniczna i kontrola laboratoryjna będą odbywać się co 4 tygodnie przez 3 kolejne miesiące.

Randomizacja:

Randomizacja zostanie przeprowadzona centralnie w Fundacji Schena, z odpowiednim rozwarstwieniem.

Wielkość próbki:

Wielkość próby jest oportunistyczna. Badacze zrekrutują łącznie 24 osoby, z których 12 otrzyma EVOOC, a 12 otrzyma ROO, w oparciu o pilotażowy charakter tego badania. Nie ma zatem formalnych obliczeń wielkości próby.

KONTROLA Dietetyczna i kliniczna obserwacja będzie prowadzona przez nefrologów, kardiologów i dietetyków. Uczestnicy obu grup otrzymają poradę dietetyczną. Poradom towarzyszyć będą pisemne informacje ze szczegółowym opisem typowych spożywanych pokarmów oraz wykorzystaniem specjalnych kwestionariuszy: 1) 14-punktowych dotyczących przestrzegania diety śródziemnomorskiej; 2) 137 – pozycji dla częstotliwości wyżywienia; 3) kwestionariusz Minnesoty dotyczący aktywności fizycznej; 4) krótki formularz-36 dla jakości życia.

BADANIA KARDIOLOGICZNE

• Badanie grubości błony wewnętrznej i środkowej zostanie wykonane poprzez pomiar grubości błony wewnętrznej i środkowej ściany tętnicy szyjnej (cIMT). Pomiary echa zostaną wykonane w trzech strefach: (a) strefa proksymalna: około 2 cm przed rozdzielaczem przepływu; (b) strefa dystalna: około ½ cm przed rozdzielaczem przepływu; (c) strefa środkowa. Dane te posłużą do uzyskania średniej arytmetycznej wartości cIMT.
• Badanie reaktywności tętnicy ramiennej zostanie przeprowadzone poprzez ultrasonograficzną ocenę wazodylatacji tętnicy ramiennej zależnej od przepływu, zależnej od śródbłonka. EKG
• Całodobowe monitorowanie EKG metodą Holtera
• Echokardiografia 2D Color Doppler Badania kardiologiczne będą wykonywane podczas długiego okresu międzydializacyjnego z wyjątkiem monitorowania EKG metodą Holtera, które będzie wykonywane co najmniej godzinę przed i cztery godziny po dializie.

WYNIKI

Wynikiem będzie:

• początek zdarzenia sercowo-naczyniowego
• wynik złożony: zawał mięśnia sercowego, rewaskularyzacja, udar niedokrwienny, choroba tętnic obwodowych, zgon z przyczyn sercowo-naczyniowych
• stężenie we krwi cholesterolu LDL i HDL, cholesterolu całkowitego,
• ciśnienie krwi METODY Próbki krwi będą topione rano po 12 godzinach postu. Próbka moczu zostanie pobrana z pierwszej punktowej mikcji porannej w obecności diurezy resztkowej.

Próbki krwi i moczu będą pobierane podczas wizyty randomizacyjnej oraz w każdym okresie interwencji (co 4 tygodnie łącznie przez 3 miesiące) po krótkiej przerwie między dwiema sesjami dializ.

Komórki jednojądrzaste krwi obwodowej (PBMC) zostaną zebrane do badania genomu. Zostaną pobrane próbki surowicy do oznaczenia cytokin prozapalnych (IL-1b, IL-6, TNFa) i przeciwzapalnych (IL4, IL-10) oraz CRP.

Pobiera się kilka ml moczu do oznaczania tyrozolu i hydroksytyrozolu za pomocą spektrometrii mas. Ponadto inne metabolity zostaną zmierzone za pomocą magnetycznego rezonansu jądrowego.

Ocena stresu oksydacyjnego. Badacze ocenią w T0 i po 12 tygodniach stężenie ROS w surowicy metodą spektrofotometryczną przy użyciu dostępnego w handlu zestawu (dROMs Test Diacron). Badacze ocenią również pomiar 8-oxodG w surowicy, markera oksydacyjnego uszkodzenia DNA, za pomocą testu ELISA (Trevigen). Badacze zidentyfikują naturę ROS generowanych w PBMC przez wrażliwą na nadtlenek sondę fluorescencyjną dioctan 2',7'-dichlorodihydrofluorescyny (DCFH, Molecular Probes). Pomiary kinetyczne mitochondrialnego wytwarzania ROS zostaną ocenione poprzez pomiar liniowego wzrostu fluorescencji spowodowanego przez zależne od H2O2 utlenianie DCFH. Zależne od NADPH wytwarzanie nadtlenków będzie mierzone metodami chemiluminescencji wzmocnionej lucygeniną w PBMC wyizolowanych od pacjentów z HD. Równolegle badacze przygotują lizaty RIPA PBMC i ocenią ekspresję różnych podjednostek oksydazy NADPH za pomocą analizy Western blot. Przeciwciała dla przeciwciał gp91phox/Nox2 lub Rac1 zostaną dostarczone przez Upstate/Millipore; p22phox, p47phox lub p67phox zostaną zakupione od Santa Cruz Biotechnologies. Dodatkowo, aktywność małej GTPazy Rac zostanie oceniona przez wytrącanie powinowactwa przy użyciu domeny wiążącej kinazę aktywowaną przez p21 (PAK-1) połączoną z S-transferazą glutationową (GST-PAK-1-PBD) na kulkach glutationowo-agarozowych (Millipore /Upstate Biotech.).

ANALIZA STATYSTYCZNA Normalność rozkładu zmiennej zostanie oceniona poprzez analizę skośności i kurtozy. Jednoczynnikowa ANOVA i test Kruskalla-Wallisa zostaną wykorzystane do analizy różnic między dwiema grupami (przypadkowo-kontrolna).

Ogólny model liniowy dla powtarzanych pomiarów zostanie użyty z wielokrotnymi porównaniami w parach w celu oceny różnic między grupami.

Liniowość wartości dla rafinowanych OO i EVOO zostanie określona w celu przetestowania efektu dawka-odpowiedź związków biofenolowych.

Wielkość próby i obliczenia mocy nie mają zastosowania, biorąc pod uwagę pilotażowy charakter badania z rekrutacją próby oportunistycznej.

Podstawowa analiza statystyczna: Wszystkie analizy będą przeprowadzane na zasadzie zamiaru leczenia. Istotność statystyczna zostanie zdefiniowana jako p<0,05 dla testu dwustronnego.

WŁAŚCIWOŚCI EVOOC I ROO EVOOC: Ta oliwa z oliwek jest pozyskiwana z drzew odmiany Coratina, które posiadają certyfikat DNA.

ROO: Ta oliwa z oliwek używana jako placebo jest mieszanką rafinowanej OO. Skład kwasów tłuszczowych i zawartość polifenoli określono odpowiednio za pomocą chromatografii gazowej i HPLC.

Polifenole są niewykrywalne w ROO. Charakterystyka EVOOC i ROO (etykieta nutraceutyczna) jest zawarta w tym protokole.

Operatorzy obiektowi zostaną dostarczeni przez spin-off MED&FOOD, Uniwersytet w Bari.