EVOO Coratina-intervention på lipider hos ikke-diabetiske hypertensive patienter, der gennemgår hæmodialyse (EVOOC-3H) (EVOOC-3H)

Detaljeret beskrivelse: EXTRAVIRGIN OLIVE OIL CORATINA INTERVENTION PÅ LIPIDER HOS IKKE-DIABETISKE HYPERTENSIVE (H) PATIENTER MED HYPERLIPIDEMI (H) DER GÅR PERIODISKE HEMODIALYSE (H) (EVOOC-3H) INTRODUKTION Hvad er kendt. De primære dødsårsager hos patienter, der gennemgår kronisk hæmodialyse (HD), er kardiovaskulære hændelser.

Kardiovaskulære risikofaktorer (hypertension, type 2-diabetes, fedme, høje niveauer af low density lipoprotein (LDL), lave niveauer af high density lipoprotein kolesterol (HDL), rygning og nedsat fysisk aktivitet) er næsten universelt til stede hos mennesker med HS. Beviser fra randomiserede kliniske forsøg viser, at statinadministration hos patienter, der gennemgår HS, ikke reducerer risikoen for uønskede vaskulære udfald. I den almindelige befolkning er der voksende beviser for, at middelhavsdiæten suppleret med olivenolie indebærer kardiovaskulære og overlevelsesfordele. De gunstige effekter af den ekstra jomfruolivenolie (EVOO) skyldes kombinationen af ​​højt indhold af monoumættede fedtsyrer (MUFA) og polyfenoler. EVOO Coratina (EVOOC), produceret i Puglia-regionen i Bari-provinsen, er kendetegnet ved høje værdier af polyfenoler på mellem 400 og 1000 mg/kg EVOO.

Hvad er ukendt. De potentielle virkninger af EVOOC hos personer med HS er ikke blevet formelt undersøgt for både surrogat- og patientniveau-endepunkter.

Hvorfor denne undersøgelse. Forskerne ønsker at evaluere virkningerne af EVOOC hos ikke-diabetiske hypertensive patienter, der gennemgår kronisk HS på en række surrogatendepunkter.

FORSLAGETS FORMÅL Efterforskerne vil undersøge virkningerne af EVOOC med højt indhold af polyfenoler sammenlignet med raffineret olivenolie (ROO) på lipidniveauer hos HS-patienter.

STUDERE DESIGN

Deltagere:

Efterforskerne vil indskrive ikke-diabetiske hypertensive og hyperlipidæmiske patienter, der gennemgår kronisk HD. Hypertension vil blive defineret som systolisk blodtryk >130 mmHg og diastolisk blodtryk >80 mmHg eller som har antihypertensiva.

Hyperlipidæmi vil blive defineret som LDL-kolesterolværdier på mere end 70 mg/dl eller modtagelse af statiner ved enhver dosis.

Berettigede patienter kan være myndige. (40-80 år)

Følgende patienter vil blive udelukket:

1. Baseline sygdom anden end diabetisk nyresygdom eller hypertensiv nyresygdom
2. Alvorlig hjertesvigt (NYHA klasse III eller IV)
3. Patienter med lav compliance
4. Rygning, indtagelse af antioxidanttilskud (f.eks. carotenoider, C-vitamin, E-vitamin og glutathion), aspirin eller ethvert andet lægemiddel med etablerede antioxidantegenskaber, hyperlipidæmi, fedme (body mass index >30 kg/m2), diabetes, cøliaki eller andet tarmsygdom, livstruende
5. Forventet levetid <6 måneder baseret på ledende læges vurdering
6. Manglende evne til at deltage i forsøget baseret på ledende lægevurdering

Interventioner:

Den eksperimentelle intervention vil være EVOOC. Deltagerne vil indtage to spiseskefulde olivenolie i løbet af dagen: en ske indeholdende 10g EVOOC (>5 mg samlede biophenoler/kg EVOOC) til frokost og en til middag. Det samlede antal biophenoler indtaget pr. dag vil være >10 mg.

Komparator:

Styringen vil være raffineret olivenolie (ROO). Deltagerne vil indtage to spiseskefulde ROO i løbet af dagen: en ske med 10 g ROO til frokost og en til middag.

Co-interventioner:

Patienter kan modtage et hvilket som helst lægemiddel mod anæmi, knoglesygdomme, ernæring og andet, herunder kostråd mod et middelhavskostmønster.

Patienter kan være på enten kronisk HD eller hæmodiafiltration (HDF). Alle behandlinger vil være højflux.

CASE RAPPORT FORM Dette inkluderer demografiske fund og laboratoriedata ved hvert besøg under opfølgningen. Desuden vil inklusions- og eksklusionskriterier være til stede på randomiseringstidspunktet. Daglig mad og individuelle mængder vil blive registreret på 'ad hoc'-designet case-rapportformular. Indtaget af mad vil blive analyseret og omdannet til næringsstoffer ved hjælp af den nyttige software Medisystems (Anthropometric variabel -weight) vil blive målt under undersøgelsen.

Fysisk aktivitet vil blive evalueret af Minnesota Leisure Time Physical Activity Questionnaire. Der vil ikke blive givet nogen begrænsning af fysisk aktivitet.

Metoder:

Denne undersøgelse vil være et centralt randomiseret forsøg med blinding af deltagere, efterforskere og resultatbedømmere, baseret på intention to treat princippet.

Organisatoriske aspekter:

Undersøgelsen vil blive udført af Schena Foundation i samarbejde med Renal Unit på Policlinic, University of Bari, og MED&FOOD-spin-off fra University of Bari.

Opfølgningsvarighed vil være 12 uger. Klinisk besøg og laboratoriekontrol vil blive udført hver 4. uge i 3 på hinanden følgende måneder.

Randomisering:

Randomisering vil blive udført centralt i Schena Fonden med passende stratificering.

Prøvestørrelse:

Prøvestørrelsen er opportunistisk. Efterforskerne vil rekruttere i alt 24 personer, hvoraf 12 vil modtage EVOOC og 12 vil modtage ROO, baseret på denne undersøgelses pilotkarakter. Der er derfor ingen formelle stikprøvestørrelsesberegninger.

OPFØLGNING Diætmæssig og klinisk monitorering vil blive udført af nefrologer, kardiologer og diætister. Deltagerne i begge grupper vil modtage kostvejledning. Rådgivningen vil blive ledsaget af skriftlig information med detaljeret beskrivelse af typiske indtaget fødevarer og brug af specifikke spørgeskemaer: 1) de 14 punkter for overholdelse af middelhavsdiæten; 2) de 137 punkter for madfrekvensen; 3) Minnesota-spørgeskemaet til den fysiske aktivitet; 4) den korte form-36 for livskvalitet.

HARDILOGISKE UNDERSØGELSER

• Intima-medietykkelsesundersøgelse vil blive udført ved måling af carotis-væg-intima-media-tykkelsen (cIMT). Ekkomålinger vil blive udført i tre zoner: (a) proksimal zone: ca. 2 cm før flowdeleren; (b) distal zone: ca. ½ cm før strømningsdeleren; (c) midterzone. Disse data vil blive brugt til at opnå den aritmetiske gennemsnitlige cIMT-værdi.
• Brachial arterie reaktivitetsundersøgelse vil blive udført ved ultralydsvurdering af endotelafhængig flow-medieret vasodilatation af brachialis arterien. EKG
• 24 timers EKG Holter overvågning
• 2D-farve-doppler-ekkokardiografi Kardiologiske undersøgelser vil blive afholdt i den lange intradialytiske periode, bortset fra EKG Holter-monitoreringen, som vil blive udført mindst en time før og fire timer efter dialyse.

RESULTATER

Resultaterne vil være:

• kardiovaskulær begivenhed start
• sammensat resultat: myokardieinfarkt, revaskularisering, iskæmisk slagtilfælde, perifer arteriesygdom, kardiovaskulær død
• blodkoncentration af LDL og HDL kolesterol, total kolesterol,
• blodtryksmetoder Blodprøver vil blive druknet om morgenen efter 12 timers faste. Urinprøve vil blive opsamlet fra den første plet-morgen-miktion ved tilstedeværelse af resterende diurese.

Blod- og urinprøve vil blive indsamlet ved randomiseringsbesøget og ved hver interventionsperiode (hver 4. uge i i alt 3 måneder) efter det korte interval mellem to dialysesessioner.

Perifere blodmononukleære celler (PBMC'er) vil blive indsamlet til genomundersøgelsen. Serumprøver vil blive indsamlet til måling af pro-inflammatoriske (IL-1b, IL-6, TNFa) og anti-inflammatoriske (IL4, IL-10) cytokiner og CRP.

Et par ml urin vil blive opsamlet til tyrosol- og hydroxytyrosolbestemmelser ved massespektrometri. Derudover vil andre metabolitter blive målt ved kernemagnetisk resonans.

Evaluering af oxidativ stress. Efterforskerne vil evaluere ved T0 og efter 12 uger ROS-serumkoncentrationer ved spektrofotometrisk metode ved hjælp af kommercielt tilgængeligt kit (dROMs Test Diacron). Efterforskerne vil også vurdere måling af serum 8-oxodG, en markør for oxidativ DNA-skade ved ELISA (Trevigen). Efterforskerne vil identificere arten af ​​ROS genereret i PBMC'er af den peroxidfølsomme fluorescerende probe 2',7'-dichlordihydrofluorescin diacetat (DCFH, Molecular Probes). Kinetiske målinger af mitokondriel ROS-generering vil blive evalueret ved at måle den lineære fluorescensstigning forårsaget af den H2O2-afhængige oxidation af DCFH. NADPH-afhængig superoxidgenerering vil blive målt ved lucigenin-forstærkede kemiluminescensmetoder i PBMC'er isoleret fra HS-patienter. Parallelt hermed vil efterforskerne forberede RIPA-lysater af PBMC'erne og evaluere ekspressionen af ​​de forskellige NADPH-oxidaseunderenheder ved Western blot-analyse. Antistofferne for gp91phox/Nox2 eller Rac1 antistoffer vil blive leveret af Upstate/Millipore; p22phox, p47phox eller p67phox vil blive købt hos Santa Cruz Biotechnologies. Derudover vil aktiviteten af ​​den lille GTPase Rac blive evalueret ved affinitetspræcipitation ved anvendelse af det p21-aktiverede kinase (PAK-1) bindingsdomæne koblet til glutathion S-transferase (GST-PAK-1-PBD) på glutathion-agarose perler (Millipore) /Upstate Biotech.).

STATISTISK ANALYSE Normaliteten af ​​variabel fordeling vil blive vurderet ved analyse af skævhed og kurtose. En-faktor ANOVA og Kruskall-Wallis test vil blive brugt til at analysere forskellene mellem de to grupper (case-control).

Den generelle lineære model for gentagne målinger vil blive brugt med flere parrede sammenligninger for at vurdere forskelle mellem grupperne.

Linearitet af værdier på tværs af raffineret OO og EVOO vil blive bestemt for at teste dosis-respons-effekten af ​​biophenoliske forbindelser.

Prøvestørrelse og effektberegninger er ikke anvendelige i betragtning af undersøgelsens pilotkarakter med rekruttering af en opportunistisk prøve.

Primær statistisk analyse: Alle analyser vil blive udført på en intention-to-treat-basis. Statistisk signifikans vil blive defineret som p<0,05 for en tosidet test.

KARAKTERISTIKA FOR EVOOC OG ROO EVOOC: Denne olivenolie er opnået af Coratina-kultivartræer, der er DNA-certificerede.

ROO: Denne olivenolie, der bruges som placebo, er en blanding af raffineret OO. Fedtsyresammensætning og polyphenolindhold er blevet bestemt ved henholdsvis gaskromatografi og HPLC.

Polyfenoler er uopdagelige i ROO. Karakteristikaene for EVOOC og ROO (nutraceutisk etiket) er indeholdt i denne protokol.

OO'erne vil blive leveret af MED&FOOD spin-off, University of Bari.