Intervenção EVOO Coratina em lipídios em pacientes hipertensos não diabéticos em hemodiálise (EVOOC-3H) (EVOOC-3H)

Descrição Detalhada: INTERVENÇÃO DE ÓLEO EXTRAVIRGEM DE CORATINA NOS LÍPIDOS EM PACIENTES HIPERTENSIVOS (H) NÃO DIABÉTICOS COM HIPERLIPIDEMIA (H) SUBMETIDOS A HEMODIÁLISE PERIÓDICA (H) (EVOOC-3H) INTRODUÇÃO O que se sabe. As principais causas de morte em pacientes submetidos à hemodiálise (HD) crônica são os eventos cardiovasculares.

Fatores de risco cardiovascular (hipertensão, diabetes tipo 2, obesidade, altos níveis de lipoproteína de baixa densidade (LDL), baixos níveis de colesterol de lipoproteína de alta densidade (HDL), tabagismo e atividade física reduzida) estão quase universalmente presentes em pessoas em HD. Evidências de ensaios clínicos randomizados demonstram que a administração de estatinas em pacientes em HD não reduz o risco de desfechos vasculares adversos. Na população em geral, há evidências crescentes de que a dieta mediterrânea suplementada com azeite implica vantagem cardiovascular e de sobrevivência. Os efeitos favoráveis ​​do azeite de oliva extravirgem (EVOO) devem-se à combinação de alto teor de ácidos graxos monoinsaturados (MUFA) e polifenóis. O EVOO Coratina (EVOOC), produzido na região de Puglia, na província de Bari, é caracterizado por altos valores de polifenóis variando entre 400 e 1000 mg/kg de EVOO.

O que é desconhecido. Os efeitos potenciais do EVOOC em pessoas em HD não foram formalmente explorados tanto para desfechos substitutos quanto para pacientes.

Por que este estudo. Os investigadores querem avaliar os efeitos do EVOOC em pacientes hipertensos não diabéticos submetidos a HD crônica em uma série de desfechos substitutos.

OBJETIVO DA PROPOSTA Os investigadores irão investigar os efeitos do EVOOC com alto teor de polifenóis em comparação com o azeite refinado (ROO) nos níveis lipídicos em pacientes em HD.

DESIGN DE ESTUDO

Participantes:

Os investigadores incluirão pacientes hipertensos e hiperlipidêmicos não diabéticos em HD crônica. A hipertensão será definida como pressão arterial sistólica >130 mmHg e pressão arterial diastólica >80 mmHg ou com quaisquer agentes anti-hipertensivos.

A hiperlipidemia será definida como valores de colesterol LDL acima de 70 mg/dl ou recebendo estatinas em qualquer dose.

Os pacientes elegíveis podem ser maiores de idade. (40-80 anos)

Serão excluídos os seguintes pacientes:

1. Doença de base, exceto doença renal diabética ou doença renal hipertensiva
2. Insuficiência cardíaca grave (NYHA classe III ou IV)
3. Pacientes com baixa adesão
4. Tabagismo, ingestão de suplementos antioxidantes (por exemplo, carotenóides, vitamina C, vitamina E e glutationa), aspirina ou qualquer outra droga com propriedades antioxidantes estabelecidas, hiperlipidemia, obesidade (índice de massa corporal > 30 kg/m2), diabetes, doença celíaca ou outra doença intestinal, risco de vida
5. Expectativa de vida <6 meses com base na avaliação dos médicos responsáveis
6. Incapacidade de participar do estudo com base na avaliação do médico assistente

Intervenções:

A intervenção experimental será EVOOC. Os participantes irão ingerir duas colheres de sopa de azeite durante o dia: uma colher contendo 10g de EVOOC (>5mg de biofenóis totais/kg de EVOOC) ao almoço e outra ao jantar. O total de biofenóis ingeridos por dia será >10 mg.

Comparador:

O controle será azeite refinado (ROO). Os participantes irão ingerir duas colheres de sopa de ROO durante o dia: uma colher contendo 10g de ROO no almoço e outra no jantar.

Cointervenções:

Os pacientes podem estar recebendo qualquer medicamento para anemia, doenças ósseas, nutrição e outros, incluindo aconselhamento dietético para um padrão alimentar mediterrâneo.

Os pacientes podem estar em HD crônica ou hemodiafiltração (HDF). Todos os tratamentos serão de alto fluxo.

FORMULÁRIO DE RELATO DE CASO Inclui achados demográficos e dados laboratoriais em cada visita durante o acompanhamento. Além disso, os critérios de inclusão e exclusão estarão presentes no momento da randomização. A alimentação diária e as quantidades individuais serão registradas no formulário de relatório de caso projetado 'ad hoc'. A ingestão de alimentos será analisada e convertida em nutrientes usando o útil software Medisystems (variável antropométrica -peso) será medida durante o estudo.

A atividade física será avaliada pelo Minnesota Leisure Time Physical Activity Questionnaire. Nenhuma restrição de atividade física será dada.

Métodos:

Este estudo será um estudo randomizado centralizado com cegamento dos participantes, investigadores e avaliadores de resultados, com base no princípio da intenção de tratar.

Aspectos organizacionais:

O estudo será conduzido pela Fundação Schena em colaboração com a Unidade Renal da Policlínica da Universidade de Bari e o spin-off MED&FOOD da Universidade de Bari.

A duração do acompanhamento será de 12 semanas. Visita clínica e controle laboratorial serão feitos a cada 4 semanas por 3 meses consecutivos.

Randomization:

A randomização será realizada centralmente na Fundação Schena, com estratificação adequada.

Tamanho da amostra:

O tamanho da amostra é oportunista. Os investigadores recrutarão um total de 24 indivíduos, dos quais 12 receberão EVOOC e 12 receberão ROO, com base na natureza piloto deste estudo. Não há, portanto, cálculos formais de tamanho de amostra.

ACOMPANHAMENTO O acompanhamento dietético e clínico será feito por nefrologistas, cardiologistas e nutricionistas. Os participantes de ambos os grupos receberão aconselhamento dietético. O aconselhamento será acompanhado de informação escrita com descrição detalhada dos alimentos típicos ingeridos e aplicação de questionários específicos: 1) os 14 itens para a adesão à dieta mediterrânica; 2) os 137 itens para a frequência alimentar; 3) o questionário de Minnesota para a atividade física; 4) a forma abreviada-36 para a qualidade de vida.

INVESTIGAÇÕES DE CARDIOLOGIA

• O estudo da espessura médio-intimal será feito pela medida da espessura médio-intimal da parede da carótida (cIMT). As ecomedidas serão feitas em três zonas: (a) zona proximal: cerca de 2 cm antes do divisor de fluxo; (b) zona distal: cerca de ½ cm antes do divisor de fluxo; (c) zona intermediária. Esses dados serão usados ​​para obter a média aritmética do valor cIMT.
• O estudo da reatividade da artéria braquial será realizado pela avaliação ultrassonográfica da vasodilatação fluxo-mediada dependente do endotélio da artéria braquial. ECG
• Monitoramento ECG Holter 24 horas
• Ecocardiografia Doppler Colorida 2D As investigações cardiológicas serão realizadas durante o longo período intradialítico, exceto pelo monitoramento do ECG Holter que será feito pelo menos uma hora antes e quatro horas após a diálise.

RESULTADOS

Os resultados serão:

• início do evento cardiovascular
• desfecho composto: infarto do miocárdio, revascularização, acidente vascular cerebral isquêmico, doença arterial periférica, morte cardiovascular
• concentração sanguínea de colesterol LDL e HDL, colesterol total,
• pressão arterial MÉTODOS As amostras de sangue serão afogadas pela manhã após 12 horas de jejum. A amostra de urina será coletada no primeiro ponto da micção matinal na presença de diurese residual.

Amostras de sangue e urina serão coletadas na visita de randomização e em cada período de intervenção (a cada 4 semanas por um total de 3 meses) após o curto intervalo entre duas sessões de diálise.

Células mononucleares de sangue periférico (PBMCs) serão coletadas para o estudo do genoma. Amostras de soro serão coletadas para dosagem de citocinas pró-inflamatórias (IL-1b, IL-6, TNFa) e anti-inflamatórias (IL4, IL-10) e PCR.

Alguns ml de urina serão coletados para determinações de tirosol e hidroxitirosol por espectrometria de massa. Além disso, outros metabólitos serão medidos por ressonância magnética nuclear.

Avaliação do estresse oxidativo. Os investigadores avaliarão em T0 e após 12 semanas as concentrações séricas de ROS pelo método espectrofotométrico usando kit comercialmente disponível (dROMs Test Diacron). Os investigadores também avaliarão a dosagem sérica de 8-oxodG, um marcador de dano oxidativo ao DNA por ELISA (Trevigen). Os investigadores identificarão a natureza das ROS geradas em PBMCs pela sonda fluorescente sensível ao peróxido diacetato de 2',7'-diclorodihidrofluorescina (DCFH, Molecular Probes). Medições cinéticas da geração mitocondrial de ROS serão avaliadas medindo-se o aumento da fluorescência linear causada pela oxidação dependente de H2O2 do DCFH. A geração de superóxido dependente de NADPH será medida por métodos de quimioluminescência aprimorada com lucigenina em PBMCs isoladas de pacientes em HD. Paralelamente, os investigadores irão preparar lisados ​​RIPA das PBMCs e avaliar a expressão das várias subunidades da NADPH oxidase por análise de Western blot. Os anticorpos para anticorpos gp91phox/Nox2 ou Rac1 serão fornecidos pela Upstate/Millipore; p22phox, p47phox ou p67phox serão adquiridos da Santa Cruz Biotechnologies. Adicionalmente, a atividade da pequena GTPase Rac será avaliada por precipitação por afinidade usando o domínio de ligação p21-ativado quinase (PAK-1) ligado à glutationa S-transferase (GST-PAK-1-PBD) em grânulos de glutationa-agarose (Millipore / Upstate Biotech.).

ANÁLISE ESTATÍSTICA A normalidade da distribuição das variáveis ​​será avaliada pela análise de assimetria e curtose. ANOVA de um fator e teste de Kruskall-Wallis serão usados ​​para analisar as diferenças entre os dois grupos (caso-controle).

O modelo linear geral para medidas repetidas será utilizado com comparações múltiplas pareadas para avaliar as diferenças entre os grupos.

A linearidade dos valores entre OO refinado e EVOO será determinada para testar o efeito dose-resposta de compostos biofenólicos.

Os cálculos de tamanho e poder da amostra não são aplicáveis ​​devido à natureza piloto do estudo com recrutamento de uma amostra oportunista.

Análise estatística primária: Todas as análises serão realizadas com base na intenção de tratar. A significância estatística será definida como p<0,05 para um teste bilateral.

CARACTERÍSTICAS DO EVOOC E DO ROO EVOOC: Este azeite é obtido de árvores da cultivar Coratina com certificado de DNA.

ROO: Este azeite usado como placebo é uma mistura de OO refinado. A composição de ácidos graxos e o teor de polifenóis foram determinados por cromatografia gasosa e HPLC, respectivamente.

Os polifenóis são indetectáveis ​​no ROO. As características de EVOOC e ROO (rótulo nutracêutico) estão incluídas neste protocolo.

Os OOs serão fornecidos pelo spin-off MED&FOOD, Universidade de Bari.