EVOO Coratina-interventie op lipiden bij niet-diabetische hypertensieve patiënten die hemodialyse ondergaan (EVOOC-3H) (EVOOC-3H)

Gedetailleerde beschrijving: EXTRAVIRGIN OLIJFOLIE CORATINA INTERVENTIE OP LIPIDEN BIJ NIET-DIABETISCH HYPERTENSIEF (H) PATIËNTEN MET HYPERLIPIDEMIE (H) DIE PERIODIEKE HEMODIALYSE ONDERGAAN (H) (EVOOC-3H) INLEIDING Wat is bekend. De belangrijkste doodsoorzaken bij patiënten die chronische hemodialyse (HD) ondergaan, zijn cardiovasculaire gebeurtenissen.

Cardiovasculaire risicofactoren (hypertensie, diabetes type 2, obesitas, hoge niveaus van lipoproteïne met lage dichtheid (LDL), lage niveaus van lipoproteïne met hoge dichtheid (HDL), roken en verminderde fysieke activiteit) zijn bijna universeel aanwezig bij mensen met de ZvH. Bewijs uit gerandomiseerde klinische onderzoeken toont aan dat toediening van statines bij patiënten die de ZvH ondergaan het risico op nadelige vasculaire uitkomsten niet vermindert. In de algemene bevolking zijn er steeds meer aanwijzingen dat het mediterrane dieet aangevuld met olijfolie cardiovasculaire en overlevingsvoordelen oplevert. De gunstige effecten van de extra vierge olijfolie (EVOO) zijn te danken aan de combinatie van een hoog gehalte aan enkelvoudig onverzadigde vetzuren (MUFA) en polyfenolen. De EVOO Coratina (EVOOC), geproduceerd in de regio Puglia in de provincie Bari, wordt gekenmerkt door hoge waarden van polyfenolen variërend van 400 tot 1000 mg/kg EVOO.

Wat is onbekend. De potentiële effecten van EVOOC bij mensen met de ZvH zijn niet formeel onderzocht, zowel voor surrogaateindpunten als voor eindpunten op patiëntniveau.

Waarom deze studie. De onderzoekers willen de effecten van EVOOC evalueren bij niet-diabetische hypertensieve patiënten die chronische ZvH ondergaan op een reeks surrogaateindpunten.

DOEL VAN HET VOORSTEL De onderzoekers zullen de effecten onderzoeken van EVOOC met een hoog gehalte aan polyfenolen in vergelijking met geraffineerde olijfolie (ROO) op de lipideniveaus bij ZvH-patiënten.

STUDIE ONTWERP

Deelnemers:

De onderzoekers zullen niet-diabetische hypertensieve en hyperlipidemische patiënten inschrijven die chronische ZvH ondergaan. Hypertensie wordt gedefinieerd als systolische bloeddruk >130 mmHg en diastolische bloeddruk >80 mmHg of als ze antihypertensiva hebben.

Hyperlipidemie wordt gedefinieerd als LDL-cholesterolwaarden van meer dan 70 mg/dl of het ontvangen van statines in elke dosis.

Geschikte patiënten kunnen meerderjarig zijn. (40-80 jaar oud)

De volgende patiënten worden uitgesloten:

1. Basislijnziekte anders dan diabetische nierziekte of hypertensieve nierziekte
2. Ernstig hartfalen (NYHA klasse III of IV)
3. Patiënten met een lage therapietrouw
4. Roken, inname van antioxidantsupplementen (bijv. carotenoïden, vitamine C, vitamine E en glutathion), aspirine of een ander geneesmiddel met bewezen antioxiderende eigenschappen, hyperlipidemie, obesitas (body mass index >30 kg/m2), diabetes, coeliakie of andere darmziekte, levensbedreigend
5. Levensverwachting <6 maanden op basis van beoordeling door de behandelende arts
6. Onvermogen om deel te nemen aan het onderzoek op basis van beoordeling door de arts

Interventies:

De experimentele interventie zal EVOOC zijn. Deelnemers nemen gedurende de dag twee eetlepels olijfolie in: een lepel met 10 g EVOOC (> 5 mg totale biofenolen / kg EVOOC) tijdens de lunch en een tijdens het avondeten. De totale ingenomen biofenolen per dag zullen >10mg zijn.

Comparator:

De controle zal geraffineerde olijfolie (ROO) zijn. Deelnemers nemen gedurende de dag twee eetlepels ROO in: één lepel met 10 g ROO tijdens de lunch en één tijdens het avondeten.

Mede-interventies:

Patiënten kunnen elk medicijn krijgen voor bloedarmoede, botziekte, voeding en andere, inclusief voedingsadvies voor een mediterraan voedingspatroon.

Patiënten kunnen chronische HD of hemodiafiltratie (HDF) ondergaan. Alle behandelingen zullen high flux zijn.

CASE RAPPORT FORMULIER Dit omvat demografische bevindingen en laboratoriumgegevens bij elk bezoek tijdens de follow-up. Bovendien zullen in- en uitsluitingscriteria aanwezig zijn op het moment van randomisatie. Dagelijkse voeding en individuele hoeveelheden zullen worden geregistreerd op een 'ad hoc' ontworpen casusrapportageformulier. Tijdens het onderzoek wordt de inname van voedsel geanalyseerd en omgezet in nutriënten met behulp van de handige software Medisystems (Antropometrische variabele -gewicht).

Lichamelijke activiteit wordt beoordeeld door de Minnesota Leisure Time Physical Activity Questionnaire. Er wordt geen beperking van fysieke activiteit gegeven.

methoden:

Deze studie zal een centraal gerandomiseerde studie zijn met blindering van deelnemers, onderzoekers en uitkomstbeoordelaars, op basis van het intention-to-treat-principe.

Organisatorische aspecten:

De studie zal worden uitgevoerd door de Schena Foundation in samenwerking met de Renal Unit van Polikliniek, Universiteit van Bari, en de MED&FOOD spin-off van de Universiteit van Bari.

De follow-up duurt 12 weken. Klinisch bezoek en laboratoriumcontrole zullen gedurende 3 opeenvolgende maanden om de 4 weken worden uitgevoerd.

Randomisatie:

Randomisatie vindt centraal bij Stichting Schena plaats, met passende stratificatie.

Steekproefgrootte:

De steekproefomvang is opportunistisch. De onderzoekers zullen in totaal 24 personen rekruteren, van wie er 12 EVOOC zullen ontvangen en 12 ROO, op basis van het pilootkarakter van deze studie. Er zijn daarom geen formele berekeningen van de steekproefomvang.

FOLLOW-UP Dieet- en klinische monitoring zal gebeuren door nefrologen, cardiologen en diëtisten. Deelnemers aan beide groepen krijgen voedingsadvies. De counseling zal vergezeld gaan van schriftelijke informatie met een gedetailleerde beschrijving van typisch ingenomen voedsel en het gebruik van specifieke vragenlijsten: 1) de 14-items voor het volgen van het mediterrane dieet; 2) de 137-items voor de voedselfrequentie; 3) de Minnesota-vragenlijst voor de fysieke activiteit; 4) de short-form-36 voor de kwaliteit van leven.

CARDIOLOGISCHE ONDERZOEKEN

• Onderzoek naar de dikte van de intima-media zal worden uitgevoerd door de meting van de dikte van de intima-media van de halsslagaderwand (cIMT). Er worden echometingen uitgevoerd in drie zones: (a) proximale zone: ongeveer 2 cm voor de stroomverdeler; (b) distale zone: ongeveer ½ cm voor de stroomverdeler; (c) middelste zone. Deze gegevens zullen worden gebruikt om de rekenkundig gemiddelde cIMT-waarde te verkrijgen.
• Een reactiviteitsonderzoek van de arteria brachialis zal worden uitgevoerd door middel van echografisch onderzoek van endotheelafhankelijke stromingsgemedieerde vasodilatatie van de arteria brachialis. ECG
• 24 uur ECG Holter-bewaking
• 2D-kleurendoppler-echocardiografie Cardiologisch onderzoek zal worden uitgevoerd tijdens de lange intradialytische periode, met uitzondering van de ECG Holter-bewaking die ten minste een uur voor en vier uur na de dialyse zal worden uitgevoerd.

UITKOMSTEN

De resultaten zullen zijn:

• begin van een cardiovasculaire gebeurtenis
• samengestelde uitkomst: myocardinfarct, revascularisatie, ischemische beroerte, perifere arteriële ziekte, cardiovasculaire dood
• bloedconcentratie van LDL- en HDL-cholesterol, totaal cholesterol,
• bloeddruk METHODEN Bloedmonsters worden 's ochtends na 12 uur vasten verdronken. Urinemonster zal worden verzameld bij de eerste urinelozing in de ochtend in aanwezigheid van resterende diurese.

Bloed- en urinemonsters worden afgenomen bij het randomisatiebezoek en bij elke interventieperiode (elke 4 weken gedurende in totaal 3 maanden) na het korte interval tussen twee dialysesessies.

Perifere mononucleaire bloedcellen (PBMC's) zullen worden verzameld voor de genoomstudie. Serummonsters zullen worden verzameld voor de meting van pro-inflammatoire (IL-1b, IL-6, TNFa) en ontstekingsremmende (IL4, IL-10) cytokinen en CRP.

Er wordt een paar ml urine verzameld voor tyrosol- en hydroxytyrosolbepalingen door middel van massaspectrometrie. Daarnaast zullen andere metabolieten worden gemeten door middel van kernspinresonantie.

Evaluatie van oxidatieve stress. De onderzoekers zullen op T0 en na 12 weken de ROS-serumconcentraties evalueren met behulp van een spectrofotometrische methode met behulp van een in de handel verkrijgbare kit (dROMs Test Diacron). De onderzoekers zullen ook de meting van serum 8-oxodG, een marker van oxidatieve DNA-schade door ELISA (Trevigen) beoordelen. De onderzoekers zullen de aard van ROS identificeren die in PBMC's wordt gegenereerd door de peroxidegevoelige fluorescerende sonde 2',7'-dichloordihydrofluorescinediacetaat (DCFH, Molecular Probes). Kinetische metingen van mitochondriale ROS-generatie zullen worden geëvalueerd door de lineaire fluorescentietoename veroorzaakt door de H2O2-afhankelijke oxidatie van DCFH te meten. NADPH-afhankelijke superoxidegeneratie zal worden gemeten door middel van lucigenine-versterkte chemiluminescentiemethoden in PBMC's geïsoleerd uit ZvH-patiënten. Tegelijkertijd zullen de onderzoekers RIPA-lysaten van de PBMC's bereiden en de expressie van de verschillende NADPH-oxidase-subeenheden evalueren door middel van Western-blotanalyse. De antilichamen voor gp91phox/Nox2- of Rac1-antilichamen worden geleverd door Upstate/Millipore; p22phox, p47phox of p67phox worden gekocht bij Santa Cruz Biotechnologies. Daarnaast zal de activiteit van het kleine GTPase Rac geëvalueerd worden door affiniteitsprecipitatie met behulp van het p21-geactiveerde kinase (PAK-1) bindingsdomein gekoppeld aan glutathion S-transferase (GST-PAK-1-PBD) op glutathion-agarose korrels (Millipore /Upstate Biotech.).

STATISTISCHE ANALYSE De normaliteit van variabele distributie zal worden beoordeeld door analyse van scheefheid en kurtosis. One-factor ANOVA en Kruskall-Wallis-test zullen worden gebruikt om de verschillen tussen de twee groepen te analyseren (case-control).

Het algemene lineaire model voor herhaalde metingen zal worden gebruikt met meerdere gepaarde vergelijkingen om verschillen tussen de groepen te beoordelen.

Lineariteit van waarden tussen verfijnde OO en EVOO zal worden bepaald voor het testen van het dosis-responseffect van biofenolverbindingen.

Steekproefomvang en powerberekeningen zijn niet van toepassing gezien het pilootkarakter van het onderzoek met rekrutering van een opportunistische steekproef.

Primaire statistische analyse: Alle analyses worden uitgevoerd op basis van intention-to-treat. Statistische significantie wordt gedefinieerd als p<0,05 voor een tweezijdige test.

EIGENSCHAPPEN VAN EVOOC EN ROO EVOOC: Deze olijfolie wordt verkregen door Coratina-cultivarbomen die DNA-gecertificeerd zijn.

ROO: Deze olijfolie die als placebo wordt gebruikt, is een mengsel van geraffineerde OO. De vetzuursamenstelling en het polyfenolgehalte zijn bepaald door middel van respectievelijk gaschromatografie en HPLC.

Polyfenolen zijn niet detecteerbaar in ROO. De kenmerken van EVOOC en ROO (nutraceutisch label) zijn opgenomen in dit protocol.

De OO's worden geleverd door de spin-off MED&FOOD, Universiteit van Bari.