EVOO Coratina Interventio lipideihin hemodialyysissä olevilla ei-diabeettisilla hypertensiivisillä potilailla (EVOOC-3H) (EVOOC-3H)

Yksityiskohtainen kuvaus: EXTRAVIRGIN OLIVE OIL CORATINA INTERVENTIO LIPIDEIHIN EI-DIABETTISILLE KOKOPAHTUMAILLE (H) POTILAILILLE, JOLLA ON HYPERLIPIDEMIA (H) JOHDANTO Mitä tiedetään. Kroonisen hemodialyysin (HD) potilaiden ensisijaiset kuolinsyyt ovat sydän- ja verisuonitapahtumat.

Kardiovaskulaariset riskitekijät (hypertensio, tyypin 2 diabetes, liikalihavuus, korkea matalatiheyksisen lipoproteiinin (LDL) taso, alhainen korkeatiheyksisen lipoproteiinikolesterolin (HDL), tupakointi ja vähentynyt fyysinen aktiivisuus) ovat lähes yleisesti läsnä HD-potilailla. Satunnaistetuista kliinisistä tutkimuksista saadut todisteet osoittavat, että statiinien antaminen HD-potilaille ei vähennä haitallisten verisuonitulosten riskiä. Yleisön väestön keskuudessa on yhä enemmän todisteita siitä, että oliiviöljyllä täydennetty Välimeren ruokavalio merkitsee sydän- ja verisuonijärjestelmän ja selviytymisen etua. Ekstraneitsytoliiviöljyn (EVOO) suotuisat vaikutukset johtuvat korkean monotyydyttymättömien rasvahappojen (MUFA) ja polyfenolien yhdistelmästä. EVOO Coratina (EVOOC), joka valmistetaan Puglian alueella Barin maakunnassa, on ominaista korkeat polyfenoliarvot, jotka vaihtelevat välillä 400-1000 mg/kg EVOO:ta.

Mikä on tuntematon. EVOOC:n mahdollisia vaikutuksia HD-potilailla ei ole virallisesti tutkittu sekä korvike- että potilastason päätepisteiden osalta.

Miksi tämä tutkimus. Tutkijat haluavat arvioida EVOOC:n vaikutuksia ei-diabeettisilla hypertensiivisillä potilailla, jotka kärsivät kroonisesta HD:stä useisiin korvikepäätepisteisiin.

EHDOTUKSEN TAVOITE Tutkijat selvittävät korkean polyfenolipitoisuuden EVOOC:n vaikutuksia puhdistettuun oliiviöljyyn (ROO) verrattuna HD-potilaiden lipiditasoihin.

OPINTUSUUNNITTELU

Osallistujat:

Tutkijat ottavat mukaan ei-diabeettisia hypertensiivisiä ja hyperlipidemiapotilaita, joilla on krooninen HD-hypertensio. Hypertensioksi määritellään systolinen verenpaine > 130 mmHg ja diastolinen verenpaine > 80 mmHg tai joilla on verenpainetta alentavia aineita.

Hyperlipidemia määritellään LDL-kolesteroliarvoiksi yli 70 mg/dl tai statiinien saamiselle millä tahansa annoksella.

Tukikelpoiset potilaat voivat olla täysi-ikäisiä. (40-80 vuotta vanha)

Seuraavat potilaat suljetaan pois:

1. Muu perussairaus kuin diabeettinen munuaissairaus tai hypertensiivinen munuaissairaus
2. Vaikea sydämen vajaatoiminta (NYHA-luokka III tai IV)
3. Potilaat, joilla on heikko hoitomyöntyvyys
4. Tupakointi, antioksidanttisten lisäravinteiden (esim. karotenoidit, C-vitamiini, E-vitamiini ja glutationi), aspiriinin tai muiden lääkkeiden nauttiminen, joilla on vakiintuneita antioksidanttisia ominaisuuksia, hyperlipidemia, liikalihavuus (painoindeksi > 30 kg/m2), diabetes, keliakia tai muu suolistosairaus, hengenvaarallinen
5. Elinajanodote <6 kuukautta johtavan lääkärin arvion perusteella
6. Kyvyttömyys osallistua tutkimukseen johtavan lääkärin arvion perusteella

Interventiot:

Kokeellinen interventio on EVOOC. Osallistujat nauttivat kaksi ruokalusikallista oliiviöljyä päivän aikana: yksi lusikka, joka sisältää 10 g EVOOC:ta (>5 mg biofenoleja/kg EVOOC:ta) lounaalla ja yksi päivällisellä. Päivän aikana nautittujen biofenolien kokonaismäärä on > 10 mg.

Vertailija:

Kontrollina käytetään puhdistettua oliiviöljyä (ROO). Osallistujat nauttivat kaksi ruokalusikallista ROO:ta päivän aikana: yksi lusikka sisältää 10g ROO:ta lounaalla ja yksi illallisella.

Yhteisinterventiot:

Potilaat voivat saada mitä tahansa lääkettä anemiaan, luusairauteen, ravitsemukseen ja muihin lääkkeisiin, mukaan lukien välimerelliseen ruokavalioon liittyviä ravitsemusneuvoja.

Potilaat voivat olla joko kroonisessa HD- tai hemodiafiltraatiossa (HDF). Kaikki hoidot ovat suurivirtaisia.

TAPAUSRAPORTTILOMAKE Tämä sisältää demografiset löydökset ja laboratoriotiedot jokaisella käynnillä seurannan aikana. Lisäksi sisällyttämis- ja poissulkemiskriteerit ovat läsnä satunnaistamisen yhteydessä. Päivittäiset ruoat ja yksittäiset määrät kirjataan "ad hoc" -muotoiseen tapausraporttilomakkeeseen. Ruoan saanti analysoidaan ja muunnetaan ravintoaineiksi hyödyllisellä Medisystems-ohjelmistolla (Anthropometric variable -weight) mitataan tutkimuksen aikana.

Fyysinen aktiivisuus arvioidaan Minnesota Leisure Time Physical Activity Questionnaire -kyselyllä. Fyysistä aktiivisuutta ei rajoiteta.

Menetelmät:

Tämä tutkimus on keskitetysti satunnaistettu tutkimus, jossa osallistujat, tutkijat ja tulosarvioijat sokeutetaan aikomus hoitaa -periaatteen perusteella.

Organisatoriset näkökohdat:

Tutkimuksen suorittaa Schena Foundation yhteistyössä Barin yliopiston Policlinicin munuaisyksikön ja Barin yliopiston MED&FOOD-spin-offin kanssa.

Seurannan kesto on 12 viikkoa. Kliininen käynti ja laboratoriotarkastus tehdään 4 viikon välein 3 peräkkäisen kuukauden ajan.

Satunnaistaminen:

Satunnaistaminen suoritetaan keskitetysti Schena-säätiössä asianmukaisella kerroksella.

Otoskoko:

Otoskoko on opportunistinen. Tutkijat rekrytoivat yhteensä 24 henkilöä, joista 12 saa EVOOC:n ja 12 ROO:ta tämän tutkimuksen pilottiluonteen perusteella. Tästä syystä ei ole olemassa virallisia otoskokolaskelmia.

SEURANTA Ruokavalion ja kliinisen seurannan suorittavat nefrologit, kardiologit ja ravitsemusterapeutit. Molempien ryhmien osallistujat saavat ravitsemusneuvontaa. Neuvontaan liitetään kirjallinen informaatio, jossa on yksityiskohtainen kuvaus tyypillisistä nautituista ruoista ja erityisten kyselylomakkeiden käyttö: 1) Välimeren ruokavalion noudattamisen 14 kohtaa; 2) ruokatiheyden 137 kohtaa; 3) Minnesotan fyysistä aktiivisuutta koskeva kyselylomake; 4) lyhyt muoto-36 elämänlaadun kannalta.

KARDIOLOGISET TUTKIMUKSET

• Intima-median paksuustutkimus tehdään mittaamalla kaulavaltimon seinämän intima-median paksuus (cIMT). Kaikumittaukset tehdään kolmella vyöhykkeellä: a) proksimaalinen vyöhyke: noin 2 cm ennen virtauksen jakajaa; (b) distaalinen vyöhyke: noin ½ cm ennen virtauksen jakajaa; (c) keskivyöhyke. Näitä tietoja käytetään aritmeettisen keskiarvon cIMT-arvon saamiseksi.
• Olkavaltimon reaktiivisuustutkimus suoritetaan endoteeliriippuvaisen virtausvälitteisen olkapäävaltimon verisuonten laajenemisen ultraäänitutkimuksella. EKG
• 24 tunnin EKG Holter -valvonta
• 2D Color Doppler Echocardiography Kardiologisia tutkimuksia tehdään pitkän intradialyysijakson aikana lukuun ottamatta EKG Holter -seurantaa, joka tehdään vähintään tuntia ennen dialyysiä ja neljä tuntia sen jälkeen.

TULOKSET

Tulokset tulevat olemaan:

• sydän- ja verisuonitapahtuman alkaminen
• yhdistelmätulos: sydäninfarkti, revaskularisaatio, iskeeminen aivohalvaus, ääreisvaltimotauti, sydän- ja verisuonikuolema
• veren LDL- ja HDL-kolesterolipitoisuus, kokonaiskolesteroli,
• verenpaine MENETELMÄT Verinäytteet upotetaan aamulla 12 tunnin paaston jälkeen. Virtsanäyte kerätään ensimmäisestä aamuvirtsauksesta jäännösdiureesin läsnä ollessa.

Veri- ja virtsanäyte kerätään satunnaistamiskäynnillä ja jokaisella interventiojaksolla (4 viikon välein yhteensä 3 kuukauden ajan) kahden dialyysikerran välisen lyhyen tauon jälkeen.

Perifeerisen veren mononukleaarisolut (PBMC:t) kerätään genomitutkimusta varten. Seeruminäytteitä kerätään tulehdusta edistävien (IL-1b, IL-6, TNFa) ja anti-inflammatoristen (IL4, IL-10) sytokiinien ja CRP:n mittaamiseksi.

Muutama ml virtsaa kerätään tyrosoli- ja hydroksityrosolimäärityksiä varten massaspektrometrialla. Lisäksi muita metaboliitteja mitataan ydinmagneettisella resonanssilla.

Oksidatiivisen stressin arviointi. Tutkijat arvioivat T0:ssa ja 12 viikon kuluttua ROS-seerumipitoisuudet spektrofotometrisellä menetelmällä käyttäen kaupallisesti saatavilla olevaa pakkausta (dROMs Test Diacron). Tutkijat arvioivat myös seerumin 8-oksodG:n, oksidatiivisen DNA-vaurion merkkiaineen ELISA:lla (Trevigen) mittauksen. Tutkijat tunnistavat peroksidiherkän fluoresoivan koettimen 2',7'-diklooridihydrofluoresiinidiasetaatin (DCFH, Molecular Probes) PBMC:issä tuottaman ROS:n luonteen. Mitokondrioiden ROS-kehityksen kineettisiä mittauksia arvioidaan mittaamalla DCFH:n H2O2-riippuvaisen hapettumisen aiheuttamaa lineaarista fluoresenssin kasvua. NADPH-riippuvainen superoksidin muodostuminen mitataan lusigeniinillä tehostetuilla kemiluminesenssimenetelmillä HD-potilaista eristetyissä PBMC:issä. Samanaikaisesti tutkijat valmistavat PBMC:iden RIPA-lysaatteja ja arvioivat NADPH-oksidaasin eri alayksiköiden ilmentymisen Western blot -analyysillä. Upstate/Millipore toimittaa vasta-aineet gp91phox/Nox2- tai Rac1-vasta-aineille; p22phox, p47phox tai p67phox ostetaan Santa Cruz Biotechnologiesilta. Lisäksi pienen GTPaasi Racin aktiivisuus arvioidaan affiniteettisaostuksella käyttämällä p21-aktivoitua kinaasia (PAK-1) sitovaa domeenia, joka on liitetty glutationi-S-transferaasiin (GST-PAK-1-PBD) glutationi-agaroosihelmillä (Millipore). /Upstate Biotech.).

TILASTOINEN ANALYYSI Muuttujajakauman normaaleja arvioidaan vinouden ja kurtoosin analysoinnilla. Yksitekijäistä ANOVAa ja Kruskall-Wallis-testiä käytetään analysoimaan kahden ryhmän välisiä eroja (tapauskontrolli).

Yleistä lineaarista mallia toistuville mittauksille käytetään useiden parivertailujen kanssa ryhmien välisten erojen arvioimiseksi.

Jalostetun OO:n ja EVOO:n arvojen lineaarisuus määritetään biofenoliyhdisteiden annos-vastevaikutuksen testaamiseksi.

Otoskoon ja tehon laskelmia ei voida soveltaa, koska tutkimuksen pilottiluonne ja opportunistisen otoksen rekrytointi.

Ensisijainen tilastollinen analyysi: Kaikki analyysit tehdään hoitotarkoituksen perusteella. Tilastollinen merkitsevyys määritellään p < 0,05 kaksipuoliselle testille.

EVOOCIN JA ROO EVOOCIN OMINAISUUDET: Tämä oliiviöljy on saatu DNA-sertifioiduista Coratina-lajikepuista.

ROO: Tämä lumelääkkeenä käytetty oliiviöljy on sekoitus puhdistettua OO:ta. Rasvahappokoostumus ja polyfenolipitoisuus on määritetty kaasukromatografialla ja vastaavasti HPLC:llä.

Polyfenoleja ei voida havaita ROO:ssa. EVOOC:n ja ROO:n (nutraceutic label) ominaisuudet on liitetty tähän protokollaan.

OO:t tarjoaa MED&FOOD-spin-off, Barin yliopisto.