Intervence EVOO Coratina na lipidech u nediabetických hypertoniků podstupujících hemodialýzu (EVOOC-3H) (EVOOC-3H)

Podrobný popis: EXTRAVIRGIN OLIVOVÝ OLEJ CORATINA ZÁSAH NA LIPIDY U NEDIABETICKÝCH HYPERTENZIVNÍCH (H) PACIENTŮ S HYPERLIPIDEMIÍ (H) PODCHÁZEJÍCÍCH S PERIODICKOU HEMODIALÝZOU (H) (EVOOC-3H) ÚVOD Co je známo. Primární příčinou úmrtí pacientů podstupujících chronickou hemodialýzu (HD) jsou kardiovaskulární příhody.

Kardiovaskulární rizikové faktory (hypertenze, diabetes 2. typu, obezita, vysoké hladiny lipoproteinů s nízkou hustotou (LDL), nízké hladiny cholesterolu s lipoproteiny s vysokou hustotou (HDL), kouření a snížená fyzická aktivita) jsou téměř všeobecně přítomny u lidí s HD. Důkazy z randomizovaných klinických studií ukazují, že podávání statinů pacientům podstupujícím HD nesnižuje riziko nepříznivých vaskulárních výsledků. V běžné populaci přibývá důkazů, že středomořská strava doplněná olivovým olejem znamená kardiovaskulární výhodu a výhodu při přežití. Příznivé účinky extrapanenského olivového oleje (EVOO) jsou dány kombinací vysokého obsahu mononenasycených mastných kyselin (MUFA) a polyfenolů. EVOO Coratina (EVOOC), vyráběná v regionu Puglia v provincii Bari, se vyznačuje vysokými hodnotami polyfenolů v rozmezí 400 až 1000 mg/kg EVOO.

Co je neznámé. Potenciální účinky EVOOC u lidí na HD nebyly formálně prozkoumány jak pro náhradní, tak pro pacientské koncové body.

Proč tato studie. Výzkumníci chtějí vyhodnotit účinky EVOOC u nediabetických hypertoniků podstupujících chronickou HD na sérii náhradních koncových bodů.

CÍL NÁVRHU Řešitelé budou zkoumat účinky EVOOC s vysokým obsahem polyfenolů ve srovnání s rafinovaným olivovým olejem (ROO) na hladiny lipidů u HD pacientů.

STUDOVAT DESIGN

Účastníci:

Vyšetřovatelé zařadí nediabetické hypertenzní a hyperlipidemické pacienty podstupující chronickou HD Hypertenze bude definována jako systolický krevní tlak >130 mmHg a diastolický krevní tlak >80 mmHg nebo užívající jakákoli antihypertenziva.

Hyperlipidémie bude definována jako hodnoty LDL cholesterolu vyšší než 70 mg/dl nebo užívání statinů v jakékoli dávce.

Způsobilí pacienti mohou být plnoletí. (40-80 let)

Následující pacienti budou vyloučeni:

1. Základní onemocnění jiné než diabetické onemocnění ledvin nebo hypertenzní onemocnění ledvin
2. Těžké srdeční selhání (NYHA třída III nebo IV)
3. Pacienti s nízkou compliance
4. Kouření, příjem antioxidačních doplňků (např. karotenoidy, vitamín C, vitamín E a glutathion), aspirin nebo jakýkoli jiný lék s prokázanými antioxidačními vlastnostmi, hyperlipidémie, obezita (index tělesné hmotnosti >30 kg/m2), cukrovka, celiakie nebo jiné střevní onemocnění, život ohrožující
5. Očekávaná délka života < 6 měsíců na základě hodnocení vedoucích lékařů
6. Neschopnost zúčastnit se studie na základě hodnocení řídícího lékaře

Zásahy:

Experimentální intervencí bude EVOOC. Účastníci během dne vypijí dvě polévkové lžíce olivového oleje: jednu lžíci obsahující 10 g EVOOC (>5 mg celkových biofenolů/kg EVOOC) k obědu a jednu k večeři. Celkový příjem biofenolů za den bude > 10 mg.

Srovnávač:

Kontrolou bude rafinovaný olivový olej (ROO). Účastníci během dne zkonzumují dvě polévkové lžíce ROO: jednu lžíci obsahující 10 g ROO při obědě a jednu při večeři.

Kointervence:

Pacienti mohou dostávat jakýkoli lék na anémii, onemocnění kostí, výživu a další, včetně dietních doporučení zaměřených na středomořskou stravu.

Pacienti mohou být na chronické HD nebo hemodiafiltraci (HDF). Všechna ošetření budou vysoce plynulá.

FORMULÁŘ PŘÍPADOVÉ HLÁŠENÍ Zahrnuje demografické nálezy a laboratorní údaje při každé návštěvě během sledování. Kromě toho budou v době náhodného výběru přítomna kritéria pro zařazení a vyloučení. Denní jídlo a jednotlivá množství budou zaznamenávána do formuláře kazuistiky navrženého ad hoc. Příjem potravy bude analyzován a přeměněn na živiny pomocí užitečného softwaru Medisystems (Anthropometric variable -weight) bude měřen během studie.

Fyzická aktivita bude hodnocena dotazníkem Minnesota Leisure Time Physical Activity Questionnaire. Nebude stanoveno žádné omezení fyzické aktivity.

Metody:

Tato studie bude centrálně randomizovaná studie se zaslepením účastníků, vyšetřovatelů a hodnotitelů výsledků na základě principu záměru léčit.

Organizační aspekty:

Studii provede nadace Schena ve spolupráci s Renal Unit na poliklinice, University of Bari a MED&FOOD spin-off University of Bari.

Délka sledování bude 12 týdnů. Klinická návštěva a laboratorní kontrola budou prováděny každé 4 týdny po dobu 3 po sobě jdoucích měsíců.

Randomizace:

Randomizace bude provedena centrálně v nadaci Schena s vhodnou stratifikací.

Velikost vzorku:

Velikost vzorku je příležitostná. Vyšetřovatelé naberou celkem 24 jedinců, z nichž 12 obdrží EVOOC a 12 obdrží ROO, na základě pilotní povahy této studie. Neexistují proto žádné formální výpočty velikosti vzorku.

SLEDOVÁNÍ Dietní a klinické sledování budou provádět nefrologové, kardiologové a dietologové. Účastníci obou skupin dostanou dietní poradenství. Poradenství bude doprovázeno písemnými informacemi s podrobným popisem typických konzumovaných potravin a použitím specifických dotazníků: 1) 14 položek pro dodržování středomořské stravy; 2) 137 položek pro frekvenci jídla; 3) dotazník z Minnesoty pro fyzickou aktivitu; 4) krátká forma-36 pro kvalitu života.

KARDIOLOGICKÁ VYŠETŘENÍ

• Studie tloušťky intima-media bude provedena měřením tloušťky intima-media stěny karotidy (cIMT). Měření echa budou provedena ve třech zónách: (a) proximální zóna: asi 2 cm před rozdělovačem toku; (b) distální zóna: asi ½ cm před rozdělovačem toku; c) střední pásmo. Tato data budou použita k získání aritmetického průměru hodnoty cIMT.
• Studie reaktivity brachiální arterie bude provedena ultrasonografickým hodnocením endoteliálně závislé na průtoku zprostředkované vazodilataci brachiální arterie. EKG
• 24hodinové Holterovo monitorování EKG
• 2D barevná dopplerovská echokardiografie Kardiologická vyšetření budou prováděna během dlouhého intradialytického období s výjimkou Holterova monitorování EKG, které bude provedeno nejméně jednu hodinu před a čtyři hodiny po dialýze.

VÝSLEDKY

Výsledky budou:

• začátek kardiovaskulární příhody
• kompozitní výsledek: infarkt myokardu, revaskularizace, ischemická cévní mozková příhoda, onemocnění periferních tepen, kardiovaskulární úmrtí
• krevní koncentrace LDL a HDL cholesterolu, celkového cholesterolu,
• krevní tlak METODY Vzorky krve se utopí ráno po 12 hodinách hladovění. Vzorek moči bude odebrán z první bodové ranní mikce za přítomnosti reziduální diurézy.

Vzorek krve a moči bude odebrán při randomizační návštěvě a při každém intervenčním období (každé 4 týdny po dobu celkem 3 měsíců) po krátkém intervalu mezi dvěma dialýzami.

Pro studii genomu budou odebrány mononukleární buňky periferní krve (PBMC). Budou odebrány vzorky séra pro měření prozánětlivých (IL-1b, IL-6, TNFa) a protizánětlivých (IL4, IL-10) cytokinů a CRP.

Pro stanovení tyrosolu a hydroxytyrosolu pomocí hmotnostní spektrometrie se odebere několik ml moči. Kromě toho budou další metabolity měřeny nukleární magnetickou rezonancí.

Hodnocení oxidačního stresu. Vyšetřovatelé vyhodnotí v T0 a po 12 týdnech sérové ​​koncentrace ROS spektrofotometrickou metodou za použití komerčně dostupné soupravy (dROMs Test Diacron). Vyšetřovatelé budou také hodnotit měření sérového 8-oxodG, markeru oxidativního poškození DNA metodou ELISA (Trevigen). Výzkumníci budou identifikovat povahu ROS generovaných v PBMC fluorescenční sondou 2',7'-dichlordihydrofluorescin diacetát (DCFH, Molecular Probes) citlivou na peroxid. Kinetická měření tvorby mitochondriálních ROS budou hodnocena měřením lineárního nárůstu fluorescence způsobené oxidací DCFH závislou na H2O2. Generace NADPH-dependentního superoxidu bude měřena lucigeninem zesílenými chemiluminiscenčními metodami v PBMC izolovaných od HD pacientů. Paralelně výzkumníci připraví RIPA lyzáty PBMC a vyhodnotí expresi různých NADPH oxidázových podjednotek analýzou Western blot. Protilátky pro gp91phox/Nox2 nebo Rac1 protilátky dodá Upstate/Millipore; p22phox, p47phox nebo p67phox budou zakoupeny od Santa Cruz Biotechnologies. Kromě toho bude aktivita malé GTPázy Rac hodnocena afinitní precipitací pomocí vazebné domény aktivované kinázy p21 (PAK-1) spojené s glutathion S-transferázou (GST-PAK-1-PBD) na kuličkách glutathion-agarózy (Millipore /Upstate Biotech.).

STATISTICKÁ ANALÝZA Normálnost rozdělení proměnných bude posouzena analýzou šikmosti a špičatosti. K analýze rozdílů mezi těmito dvěma skupinami (případ-kontrola) budou použity jednofaktorová ANOVA a Kruskall-Wallisův test.

Obecný lineární model pro opakovaná měření bude použit s více párovými srovnáními, aby bylo možné posoudit rozdíly mezi skupinami.

Linearita hodnot napříč rafinovanými OO a EVOO bude určena pro testování účinku biofenolických sloučenin na dávku.

Výpočty velikosti vzorku a výkonu nejsou použitelné vzhledem k pilotní povaze studie s náborem oportunního vzorku.

Primární statistická analýza: Všechny analýzy budou prováděny na základě záměru léčby. Statistická významnost bude definována jako p<0,05 pro dvoustranný test.

CHARAKTERISTIKA EVOOC A ROO EVOOC: Tento olivový olej získávají stromy kultivaru Coratina, které mají certifikaci DNA.

ROO: Tento olivový olej používaný jako placebo je směs rafinovaného OO. Složení mastných kyselin a obsah polyfenolů byly stanoveny plynovou chromatografií a HPLC.

Polyfenoly jsou v ROO nedetekovatelné. Charakteristiky EVOOC a ROO (nutraceutické označení) jsou uvedeny v tomto protokolu.

OO budou poskytovány spin-offem MED&FOOD, University of Bari.