Sebészeti kontra perkután drenázs a magas fokú hasnyálmirigy-trauma kezelésében

A magas fokú hasnyálmirigy-trauma (HGPT), bár nem gyakori, kihívást jelentő diagnosztikai és terápiás dilemmákat jelent a traumasebészek számára. A HGPT több kezelési stratégiájáról számoltak be, amelyek magas morbiditási és mortalitási arányt jelentettek. Emellett kevés prospektív tanulmány vizsgálta a HGPT-ben szenvedő betegek optimális kezelési stratégiáját.

Célunk volt a sebészeti drenázs és a perkután drenázs összehasonlítása a HGPT kezelésében. Ennek érdekében a stratégia a precíz leendő klinikai feljegyzések kiterjedt klinikai kezelési adatainak integrálása a betegek nagy csoportjában. A vizsgálatban részt vevő összes klinikai osztályon betegek is vannak, szoros együttműködésben a Trauma, Intenzív Terápia és Sebészeti osztályok között. A demográfiai és klinikai paramétereket egy adatbázisban gyűjtik össze.

A diagnózis megerősítése után a betegek felvétele a tervezett kórházi kezelés előtt, valamint a jogosultsági feltételek ellenőrzése és a beleegyező nyilatkozat aláírása után történik. A klinikai kezelés során több mintát gyűjtenek: vérmintát és műtéti mintát. A szokásos gyakorlat szerint a posztoperatív kezelést a vizsgáló belátása szerint, egy hektáron felállított algoritmus segítségével írják elő. A vizsgálat során több mintát is gyűjtenek (vér- és biológiai szövetmintát).

Ezekkel a kezelésekkel egyidejűleg rögzítésre kerülnek a klinikai adatok a kórelőzményről, a kórházi kezelés előtti anamnézisről, a műtéti anamnézisről, a kezelési előzményről, a műtét utáni kezelésről, ha előírják, a műtét és a képlogikai diagnózis közötti kezelési előzményeket. A klinikai adatokat a hazabocsátás után 12 hónappal a szokásos gyakorlat szerint szervezett tervezett vizit során is gyűjtik, hosszú távú vizsgálat céljából.

A kohorsz felállításával együtt számos vizsgálatot végeznek majd:

• A HGPT-ben szenvedő betegek diagnózisának és kezelési idejének összehasonlítása
• Sebészeti módszerek és intraoperatív állapotok tanulmányozása HGPT-ben szenvedő betegeknél
• HGPT-ben szenvedő betegek intenzív osztályos újraélesztésének vizsgálata
• Vizsgálat a szövődményekről, az intenzív osztályon való tartózkodás időtartamáról és a kórházi tartózkodás időtartamáról a HGPT-ben szenvedő betegeknél
• HGPT-ben szenvedő betegek tápláléktámogatási kezelésének tanulmányozása
• A HGPT-ben szenvedő betegek mortalitásának és költségeinek tanulmányozása

Az összes biológiai mintát -80°C-on, vagy a mintáktól függően szobahőmérsékleten tárolják: A csövekben gyűjtött mintákat azonnal szobahőmérsékleten küldik a Jinling Kórház, Nanjing, Kína központi patológiai osztályára. Az összes többi, -80°C-on tárolt mintát a Nanjing Egyetem Orvostudományi Karának Általános Sebészeti Kutatóintézetébe küldik.

A mintaelemzéseket dedikált kutatóközpontok végzik: DNS- és RNS-kivonás transzkriptomanalízishez, szövettani elemzésekhez stb.

Szövettani elemzések: A kimetszett hasnyálmirigy vagy bélszövet szerkezetének elemzése.

Molekuláris biológia: A teljes genom expressziós elemzését microarray segítségével végezzük, majd génontológia és klaszterezési elemzések követik.

Mikrobióta: A csípőbél nyálkahártyájához kapcsolódó mikrobióta bakteriális összetételét a műtét idején 16S (MiSeq, Illumina) szekvenálás segítségével elemezzük. A kapott szekvenciákat a Qiime pipeline segítségével elemezzük az összetétel, az alfa és béta diverzitás értékelésére.

Immunológia: Az immunsejtek fenotípusa: Az immunsejteket vérből és friss nyálkahártyaszövetekből vonják ki. Ezen sejtek fenotípusát citometriával elemezzük.

A neutrofil extracelluláris csapdák elemzése:

A sejtmentes DNS, a sejtmentes nukleoszómák, a neutrofil elasztáz (NE) és a mieloperoxidáz (MPO) koncentrációit a szérumban és a plazmában Human Cell Death Detection ELISA-val vagy szendvics ELISA-val mértük.

A hasnyálmirigy-szövetet gyorsan eltávolítottuk, és különböző részekre osztották a későbbi elemzésekhez. Az egyiket konfokális mikroszkópiára használták, a harmadikat pedig folyékony nitrogénben gyorsfagyasztották a hasnyálmirigy mieloperoxidáz (MPO), a hiszton 3 és 4 hiszton szintjének stb. biokémiai mennyiségi meghatározására. Az egyiket formalinban rögzítették szövettani elemzés céljából.