Drenaggio chirurgico contro drenaggio percutaneo nella gestione del trauma pancreatico di alto grado

Il trauma pancreatico di alto grado (HGPT), sebbene raro, presenta dilemmi diagnostici e terapeutici impegnativi per i chirurghi traumatologici. Sono state segnalate molteplici strategie di gestione dell'HGPT, che erano associate a un alto livello di morbilità e tasso di mortalità. Inoltre, pochi studi prospettici hanno studiato la strategia di gestione ottimale dei pazienti con HGPT.

Abbiamo mirato a confrontare il drenaggio chirurgico con il drenaggio percutaneo nella gestione dell'HGPT. Per fare ciò, la strategia consiste nell'integrare precise cartelle cliniche prospettiche e ampi dati sul trattamento clinico in un'ampia coorte di pazienti. Tutti i reparti clinici, partecipanti allo studio, includono pazienti, con una stretta collaborazione tra i reparti di Traumatologia, Terapia Intensiva e Chirurgia. Dati demografici e parametri clinici sono raccolti in un database.

Una volta confermata la diagnosi, si procede all'inclusione dei pazienti, prima della gestione programmata dell'ospedale, e dopo la verifica dei criteri di eleggibilità e la firma del modulo di consenso. Durante la gestione clinica vengono raccolti diversi campioni: campioni di sangue e campioni chirurgici. Come prassi abituale, il trattamento postoperatorio sarà prescritto a discrezione dello sperimentatore, con l'aiuto di un algoritmo consolidato. Durante questo esame vengono raccolti anche diversi campioni (campione di sangue e tessuto biologico).

Contestualmente a tali gestioni vengono registrati i dati clinici riguardanti l'anamnesi, la storia del trattamento preospedaliero, la storia chirurgica, la storia del trattamento, il trattamento post-operatorio se prescritto, la storia del trattamento tra intervento chirurgico e diagnosi logica per immagini. I dati clinici vengono raccolti anche 12 mesi dopo la dimissione durante una visita programmata organizzata come di consueto, per uno studio a lungo termine.

Insieme alla creazione della coorte verranno eseguiti diversi studi:

• Confronto tra il tempo di diagnosi e il tempo di trattamento dei pazienti con HGPT
• Studio delle metodiche chirurgiche e delle condizioni intraoperatorie nei pazienti con HGPT
• Studio del trattamento di rianimazione in terapia intensiva di pazienti con HGPT
• Studio delle complicanze, durata della degenza in terapia intensiva e durata della degenza ospedaliera per i pazienti con HGPT
• Studio del trattamento di supporto nutrizionale per i pazienti con HGPT
• Studio della mortalità e del costo per i pazienti con HGPT

Tutti i campioni biologici sono conservati in siti a -80°C, oa temperatura ambiente a seconda dei campioni: I campioni raccolti in provette, vengono inviati immediatamente, a temperatura ambiente, al dipartimento centrale di patologia del Jinling Hospital, Nanjing, Cina. Tutti gli altri campioni, conservati a -80°C, vengono inviati all'istituto di ricerca di Chirurgia Generale, Facoltà di Medicina dell'Università di Nanjing, Cina.

Le analisi dei campioni vengono eseguite da centri di ricerca dedicati: estrazione del DNA e dell'RNA per l'analisi del trascrittoma, analisi istologiche, ecc:

Analisi istologiche: Analisi della struttura del pancreas o del tessuto intestinale asportato.

Biologia molecolare: le analisi dell'espressione dell'intero genoma vengono eseguite utilizzando microarray e seguite da analisi di ontologia genetica e clustering.

Microbiota: la composizione batterica del microbiota associato alla mucosa ileale viene analizzata al momento dell'intervento chirurgico utilizzando il sequenziamento 16S (MiSeq, Illumina). Le sequenze ottenute vengono analizzate utilizzando la pipeline Qiime per valutare la composizione, la diversità alfa e beta.

Immunologia: fenotipo delle cellule immunitarie: le cellule immunitarie vengono estratte dal sangue e dai tessuti freschi della mucosa. Il fenotipo di queste cellule viene analizzato mediante citometria.

Analisi delle trappole extracellulari dei neutrofili:

Le concentrazioni di DNA libero da cellule, nucleosomi liberi da cellule, elastasi neutrofila (NE) e mieloperossidasi (MPO) sono state misurate nel siero e nel plasma mediante Human Cell Death Detection ELISA o ELISA sandwich.

Il tessuto pancreatico è stato rimosso rapidamente e diviso in diverse parti per analisi successive. Uno è stato utilizzato per la microscopia confocale e un terzo è stato congelato a scatto in azoto liquido per la quantificazione biochimica dei livelli di mieloperossidasi pancreatica (MPO), istone 3 e istone 4, ecc. Uno è stato fissato in formalina per l'analisi istologica.