Chirurgická versus perkutánní drenáž v léčbě vysokého stupně pankreatického traumatu

Vysoce kvalitní trauma pankreatu (HGPT), i když je neobvyklé, představuje pro traumatologické chirurgy náročná diagnostická a terapeutická dilemata. Bylo hlášeno několik strategií léčby HGPT, což bylo spojeno s vysokou mírou morbidity a mortality. Kromě toho několik prospektivních studií zkoumalo optimální strategii léčby pacientů s HGPT.

Naším cílem bylo porovnat chirurgickou drenáž s perkutánní drenáží v léčbě HGPT. Za tímto účelem je strategií integrovat přesné prospektivní klinické záznamy rozsáhlé údaje o klinické léčbě u velké kohorty pacientů. Všechna klinická oddělení, která se studie účastní, zahrnují pacienty s úzkou spoluprací mezi oddělením traumatologie, intenzivní péče a chirurgie. Demografické a klinické parametry se shromažďují v databázi.

Jakmile je diagnóza potvrzena, je provedeno zařazení pacientů, před plánovaným vedením nemocnice a po kontrole kritérií způsobilosti a podpisu formuláře souhlasu. Během klinické péče se odebírá několik vzorků: vzorky krve a chirurgické vzorky. Jako obvyklá praxe bude pooperační léčba předepsána podle uvážení zkoušejícího s pomocí akre-zavedeného algoritmu. Během tohoto vyšetření je také odebráno několik vzorků (vzorek krve a biologické tkáně).

Současně s těmito managementy se zaznamenávají klinická data týkající se anamnézy, historie přednemocniční léčby, chirurgické historie, historie léčby, pooperační léčby, pokud je předepsána, historie léčby mezi operací a logická diagnóza. Klinická data se také shromažďují 12 měsíců po propuštění během plánované návštěvy organizované jako obvyklá praxe pro dlouhodobou studii.

Spolu se sestavením kohorty bude provedeno několik studií:

• Porovnání doby diagnózy a doby léčby pacientů s HGPT
• Studium operačních metod a intraoperačních stavů u pacientů s HGPT
• Studie resuscitační léčby na JIP u pacientů s HGPT
• Studie komplikací, délky pobytu na JIP a doby hospitalizace u pacientů s HGPT
• Studie léčby nutriční podpory u pacientů s HGPT
• Studie mortality a nákladů na pacienty s HGPT

Všechny biologické vzorky jsou skladovány na místech při -80 °C nebo při pokojové teplotě v závislosti na vzorcích: Vzorky odebrané do zkumavek jsou okamžitě odeslány při pokojové teplotě do centrálního patologického oddělení v nemocnici Jinling, Nanjing, Čína. Všechny ostatní vzorky, skladované při -80 °C, jsou odeslány do výzkumného ústavu všeobecné chirurgie, Medical School of Nanjing University, Čína.

Analýzy vzorků provádějí specializovaná výzkumná centra: extrakce DNA a RNA pro analýzu transkriptomu, histologické analýzy atd.

Histologické analýzy: Analýza struktury vyříznuté slinivky nebo střevní tkáně.

Molekulární biologie: Analýza exprese celého genomu se provádí pomocí microarray a následuje genová ontologie a shlukové analýzy.

Mikrobiota: Bakteriální složení mikrobioty spojené s ileální sliznicí se analyzuje v době operace pomocí sekvenování 16S (MiSeq, Illumina). Získané sekvence jsou analyzovány pomocí potrubí Qiime k posouzení složení, alfa a beta diverzity.

Imunologie: Fenotyp imunitních buněk: Imunitní buňky jsou extrahovány z krve a čerstvých slizničních tkání. Fenotyp těchto buněk je analyzován cytometrií.

Analýza extracelulárních pastí neutrofilů:

Koncentrace bezbuněčné DNA, bezbuněčných nukleozomů, neutrofilní elastázy (NE) a myeloperoxidázy (MPO) byly měřeny v séru a plazmě pomocí ELISA detekce lidské buněčné smrti nebo sendvičové ELISA.

Pankreatická tkáň byla rychle odstraněna a rozdělena na různé části pro pozdější analýzy. Jedna byla použita pro konfokální mikroskopii a jedna třetina byla bleskově zmražena v kapalném dusíku pro biochemickou kvantifikaci hladin pankreatické myeloperoxidázy (MPO), histonu 3 a histonu 4 atd. Jeden byl fixován ve formalínu pro histologickou analýzu.