A sziklevél perfúzió használata a placentán keresztüli kábítószer-transzfer vizsgálatára (DRUGS-PTP)

Etikai okokból terhes nőket nem vonnak be a klinikai vizsgálatokba, így számos gyógyszer biztonságosságára és hatásosságára vonatkozóan kevés adat áll rendelkezésre. Ismeretes, hogy a xenobiotikumok átjutnak a placenta gáton, de a transzfer mennyiségére és mechanizmusaira vonatkozó tanulmányok továbbra sem elegendőek. A gyógyszertranszfer értékelésének különböző módszerei közül az emberi sziklevél perfúziója az egyik legfontosabb. A sziklevél két oldalát, a magzati és az anyai oldalt a szülés után egy órán belül EARLE táptalajjal perfundáljuk kettős zárt körben. A vizsgált gyógyszert (bármilyen terhes anyának adott gyógyszer lehet) és az antipirint (a kontrollmolekulát) a 37°C-on megvalósított három órás perfúzió elején adjuk hozzá 12 ml/perc anyai áramlási sebességgel és 6 ml magzati áramlási sebességgel. /perc. A perfúzió során mintákat gyűjtenek, és a gyógyszeradagolást a Cochin Kórház farmakológiai osztályán végzik el. A sziklevél szöveteit is összegyűjtjük, hogy tanulmányozzuk a fehérjéket és az expresszált ARN-eket. A gyógyszerkoncentrációkat a magzati anyai koncentrációk arányának és a magzati transzfer sebességének (a magzati gyógyszer mennyisége a teljes gyógyszermennyiséghez viszonyítva a perfúzió végén) kiszámításával elemzik. Ezután a Monolix szoftveren végzett modellezésre kerül sor, hogy megbecsüljük az átviteli állandókat a két rész között. A modellezés lehetővé teszi az egyének közötti variabilitás becslését és olyan kovariánsok tesztelését, mint a nem, a terhesség időtartama, a genetika vagy a fehérje expressziója. A fehérjéket megfelelő módszerrel (western blot vagy proteomikai analízis) vizsgálják. A genetikai vizsgálat a jelölt gén megközelítésből fog állni. A polimorfizmusokat a transzportereket vagy enzimeket vagy ezek szabályozóit kódoló génekben választjuk ki.