Sirkkalehtiperfuusion käyttäminen huumeiden siirtymisen tutkimiseen istukan läpi (DRUGS-PTP)

Eettisistä syistä raskaana olevat naiset eivät ole mukana kliinisissä kokeissa, joten monien lääkkeiden turvallisuudesta ja tehosta on vähän tietoa. Tiedetään, että ksenobiootit kulkeutuvat istukan esteen läpi, mutta tämän siirron määrää ja mekanismeja koskevat tutkimukset ovat edelleen riittämättömiä. Eri menetelmistä lääkkeiden siirron arvioimiseksi ihmisen sirkkalehtien perfuusio on yksi tärkeimmistä menetelmistä. Sirkkalehtien kaksi puolta, sikiön ja äidin puoli, perfusoidaan tunnin sisällä synnytyksestä EARLE-elatusaineella kaksinkertaisessa suljetussa piirissä. Tutkittu lääke (se voi olla mikä tahansa raskaana oleville äideille annettu lääke) ja antipyriini (kontrollimolekyyli) lisätään kolmen tunnin perfuusion alussa, joka toteutetaan 37 °C:ssa, äidin virtausnopeudella 12 ml/min ja sikiön 6 ml:lla. /min. Näytteet kerätään perfuusion varrella ja lääkeannostus tehdään Cochinin sairaalan farmakologian osastolla. Sirkkalehtien kudoksia kerätään myös proteiinien ja ekspressoituneiden ARN:ien tutkimiseksi. Lääkepitoisuudet analysoidaan laskemalla sikiön ja äidin pitoisuussuhteet ja sikiön siirtonopeus (sikiön lääkemäärä suhteessa lääkkeen kokonaismäärään perfuusion lopussa). Sitten tehdään mallinnus Monolix-ohjelmistolla siirtovakioiden arvioimiseksi kahden osaston välillä. Mallintamisen avulla voidaan arvioida yksilöiden välistä vaihtelua ja testata yhteismuuttujia, kuten sukupuoli, raskauden kesto, genetiikka tai proteiinien ilmentyminen. Proteiineja tutkitaan tarkoituksenmukaisella menetelmällä (Western blot tai proteominen analyysi). Geneettinen tutkimus koostuu ehdokasgeenilähestymistavasta. Polymorfismit valitaan geeneissä, jotka koodaavat kuljettajia tai entsyymejä tai niiden säätelyaineita.