Использование перфузии семядолей для изучения переноса лекарств через плаценту (DRUGS-PTP)

По этическим соображениям беременные женщины не включаются в клинические испытания, поэтому данных о безопасности и эффективности многих препаратов недостаточно. Известно, что ксенобиотики проникают через плацентарный барьер, но исследования количества и механизмов этого переноса остаются недостаточными. Среди различных методологий оценки переноса лекарств перфузия семядолей человека является одной из наиболее актуальных. Две стороны семядолей, плодовая и материнская, перфузируются в течение часа после родов средой EARLE в двойном замкнутом контуре. Исследуемый препарат (это может быть любой препарат, назначаемый беременным) и антипирин (контрольная молекула) добавляют в начале трехчасовой перфузии, осуществляемой при 37°С, со скоростью потока у матери 12 мл/мин, у плода 6 мл. /мин. Образцы берутся по ходу перфузии, а дозировка лекарств производится в фармакологическом отделении больницы Кочин. Ткани семядолей также будут собираться для изучения белков и экспрессируемых ARN. Концентрации лекарственного средства будут проанализированы путем расчета соотношения концентраций плода и матери и скорости передачи плода (количество лекарственного средства для плода по отношению к общему количеству лекарственного средства в конце перфузии). Затем будет выполнено моделирование в программном обеспечении Monolix для оценки констант переноса между двумя отсеками. Моделирование позволит оценить межиндивидуальную изменчивость и протестировать сопутствующие переменные, такие как пол, продолжительность беременности, генетика или экспрессия белка. Белки будут изучаться соответствующим методом (вестерн-блоттинг или протеомный анализ). Генетическое исследование будет состоять из подхода генов-кандидатов. Полиморфизмы будут выбраны в генах, кодирующих транспортеры или ферменты или их регуляторы.