Könnyfilm markerek száraz szem szindróma esetén

Az alanyokat a szemszárazság diagnózisa és a betegség súlyosságára vonatkozó becslés alapján veszik fel, amelyet a vizsgáló a páciens kórtörténete és klinikai vizsgálata alapján állapít meg.

A szemszárazság súlyosságát az Ocular Surface Disease Index (OSDI) rubrikában > 12 pontozással határozzák meg, ami szokásos gyakorlat.

Olyan betegeket vesznek fel, akiknél száraz szemet diagnosztizáltak, de nem írtak fel gyógyszert az állapot kezelésére.

A beleegyező nyilatkozat aláírása után az alanyok elvégzik a rutin ápolási szemvizsgálatot.

A PI minden karon egymást követő betegeket tartalmaz. Miután a megbízatást mindkét karban teljesítették, a nyomozó leállítja a toborzást. A vizsgáló olyan betegeket foglal magában, akik a műkönnycseppek használatát választják egy csoportban. A másik csoportba a vizsgáló választja ki azokat a betegeket, akik szándékosan beleegyeznek a ciklosporin szemcseppek használatába. Ha ezek a betegek úgy döntenek, hogy nem vesznek részt a vizsgálatban, akkor is azt a kezelést fogják alkalmazni, amelyet használni szeretnének.

• Vizsgálati kar: A kezelést naponta kétszer ciklosporin szemcseppel kezdjük, tartósítószer-mentes műkönnycseppekkel naponta 4 alkalommal (Kezelés).
• Kontroll kar: Tartósítószer mentes műkönnycseppek naponta 4 alkalommal (Control).

Szemcseppek menetrendje:

• Ha napi 4 alkalommal kell bevenni, az alany reggel, délután, kora este és lefekvés előtt csepegtet egy cseppet.
• Ha napi kétszeri beadásra utasítják, az alany reggel és este egy cseppet csepegtet.
• Az alanyokat arra is utasítják, hogy a szemcseppeket 3-5 perccel távolítsák el.

Mind a ciklosporint, mind a mesterséges könnyet az alany orvosa rendeli meg, amely az alany gyógyszerészén keresztül lesz elérhető. Ezeket a cseppeket általában az alany rutinkezelésének részeként írják fel.

Mind az alanyok, mind az orvosok tisztában lesznek a kezelés típusával; az adatbevitel és -elemzés azonban vak lenne. Ez úgy történik, hogy minden egyes tantárgyhoz adunk egy hivatkozási kódot.

Az alanyok 8 héten keresztül maguknak adják be a szemcseppeket.

-------------------------------------------------- -------

Kutatási eljárások:

A következő mintákat gyűjtik a kiinduláskor és a 8. héten:

Alapállapot (1. látogatás):

• Randomizálás
• Könnyfolyadék gyűjtemény
• Impressziós citológia

4. hét (2. látogatás):

• Adatgyűjtés: Az alany a szokásos szemészeti vizsgálat részeként rendszeresen felkeresi szemorvosát. A következők kerülnek összegyűjtésre: Demográfiai adatok; Klinikai előzmények és hivatali látogatások; Képek és Fényképészet; és mikrobiológiai feljegyzések.

8. hét (3. látogatás):

• Könnyfolyadék gyűjtemény
• Impressziós citológia

Az 1. és 3. vizit akár 20 percet is igénybe vesz a résztvevő rutin ápolási szemvizsgálatához.

-------------------------------------------------- -------

Az eljárások magyarázata:

Zsibbadás érzéstelenítő csepp (Proparakain 0,5%):

Az alany zsibbadást okozó érzéstelenítő cseppet (Proparacaine 0,5%) kap a gyulladt szemébe a szokásos ellátása részeként. Ennek a cseppnek a hatása a becseppentés után 20 percen belül elmúlik, de az alanynak nem kell maradnia addig, amíg a zsibbadás megszűnik.

Könnyfolyadék-gyűjtés (Schirmer-teszt):

Az alany könnyeinek egy kis részét úgy gyűjtik össze, hogy papírcsíkokat helyeznek a szeme sarkába.

Lenyomat citológia:

A kutatók egyetlen anyagmintát gyűjtenek az alany szemének felszínéről, majd sejtszinten értékelik. A lenyomat-citológia során az alanynak meg kell néznie egyenesen előre, az állát kissé felemelve. Egy csepp érzéstelenítő szemcseppet csepegtetünk a szem alsó fornixába. A lenyomat-citológiai eszköz (EYEPRIM; OPIA Technologies SAS, Párizs, Franciaország vagy ezzel egyenértékű) dugattyúját úgy nyomják, hogy a membránnal finoman érintse a szaruhártyát 5 másodpercig. A nyomás a készülék eltávolítása előtt megszűnik. Ezután a membránt óvatosan átvisszük az eszközből egy 1,5 ml-es csőbe egy steril csipesz segítségével. Több EYEPRIM membrán gyűjthető. Egy csepp mesterséges könnycseppet csepegtetnének a szem felszínére. A résztvevőt megkérik, hogy csukja be a szemét néhány másodpercre. Kapilláris csövet vagy Schirmer-csíkot használnak a könnyfilm összegyűjtésére.

A kutatási eljárások teljes időtartama körülbelül 20 perc lesz.

-------------------------------------------------- -------

Minták:

A mikrobiológiai elemzést az UPMC Szemközpont Szemészeti Mikrobiológiai Laboratóriumában dolgozzák fel.

A könnyfolyadék-mintákat ELISA-val elemzik:

• Mátrix metalloproteináz-9
• SLURP-1
• HLA-DR5
• IL-1RA,
• IL-6 és
• IL-8

Impressziós citológiai mintákat használnak a teljes RNS izolálására, amelyet cDNS-vé alakítanak át, és a fenti célpontok megfelelő transzkriptumainak QPCR-értékelésére használnák. A QPCR-ek az ELISA-val együtt meggyőző bizonyítékot szolgáltatnának a 0,09%-os ciklosporin hatásának(i) tisztázására a szemfelszíni gyulladás ezen markereinek expressziójára. A vizsgálat végén leleplezik a tantárgyi feladatokat, és elemzik a kezelés és a kontrollcsoport közötti különbséget.