Tränenfilmmarker beim Syndrom des trockenen Auges

Die Probanden werden auf der Grundlage ihrer Diagnose trockener Augen und einer Schätzung der Schwere der Erkrankung rekrutiert, die der Prüfarzt auf der Grundlage der Krankengeschichte und der klinischen Untersuchung des Patienten vornehmen würde.

Der Schweregrad des Trockenen Auges wird durch eine Bewertung von > 12 auf der Ocular Surface Disease Index (OSDI)-Rubrik bestimmt, was eine Standardpraxis ist.

Patienten, bei denen Trockenes Auge diagnostiziert wurde, denen jedoch kein Medikament zur Behandlung dieser Erkrankung verschrieben wurde, werden rekrutiert.

Nach Unterzeichnung einer Einverständniserklärung führen die Probanden ihre routinemäßige Augenuntersuchung durch.

Der PI umfasst aufeinanderfolgende Patienten für jeden Arm. Sobald das Mandat in beiden Armen abgeschlossen ist, stoppt der Ermittler die Rekrutierung. Der Prüfarzt schließt Patienten ein, die sich für die Verwendung künstlicher Tränentropfen in einer Gruppe entscheiden. Für die andere Gruppe wählt der Prüfarzt Patienten aus, die freiwillig der Verwendung von Ciclosporin-Augentropfen zustimmen würden. Wenn diese Patienten sich entscheiden, nicht an der Studie teilzunehmen, werden sie am Ende dennoch die Behandlung anwenden, die sie gerne anwenden würden.

• Studienarm: Die Behandlung wird mit Ciclosporin-Augentropfen zweimal täglich mit konservierungsmittelfreien künstlichen Tränentropfen 4-mal täglich begonnen (Behandlung).
• Kontrollarm: Konservierungsmittelfreie künstliche Tränentropfen 4 mal täglich (Kontrolle).

Zeitplan für Augentropfen:

• Wenn angewiesen wird, 4-mal täglich einzunehmen, wird der Proband morgens, nachmittags, am frühen Abend und vor dem Schlafengehen einen Tropfen einträufeln.
• Wenn angewiesen wird, zweimal täglich einzunehmen, wird der Proband morgens und abends einen Tropfen einträufeln.
• Die Probanden werden auch angewiesen, Augentropfen um 3-5 Minuten zu verteilen.

Sowohl das Cyclosporin als auch die künstlichen Tränen werden vom Arzt des Probanden bestellt, die über den Apotheker des Probanden erhältlich sind. Diese Tropfen werden normalerweise als Teil der routinemäßigen Behandlung des Patienten verschrieben.

Sowohl Patienten als auch Ärzte sind sich der Art der Behandlung bewusst; die Dateneingabe und -analyse wäre jedoch verblindet. Dies geschieht, indem jedem einzelnen Thema ein Verknüpfungscode zugewiesen wird.

Die Probanden verabreichen sich die Augentropfen 8 Wochen lang selbst.

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Forschungsverfahren:

Die folgenden Proben würden zu Studienbeginn und in Woche 8 entnommen:

Baseline (Besuch 1):

• Randomisierung
• Sammlung von Tränenflüssigkeit
• Impression Zytologie

Woche 4 (Besuch 2):

• Datenerhebung: Der Proband wird sich im Rahmen seiner routinemäßigen Augenuntersuchung normalerweise an seinen Augenarzt wenden. Folgendes wird erhoben: Demografische Daten; Anamnese und Arztbesuche; Bilder und Fotografie; und mikrobiologische Aufzeichnungen.

Woche 8 (Besuch 3):

• Sammlung von Tränenflüssigkeit
• Impression Zytologie

Die Besuche 1 und 3 verlängern die routinemäßige Augenuntersuchung des Teilnehmers um bis zu 20 Minuten.

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Erläuterung der Verfahren:

Betäubende Anästhesietropfen (Proparacain 0,5 %):

Das Subjekt erhält einen betäubenden Anästhesietropfen (Proparacain 0,5 %) in das entzündete Auge als Teil seiner Standardbehandlung. Die Wirkung dieses Tropfens lässt 20 Minuten nach dem Einträufeln nach, aber der Proband muss nicht bleiben, bis die Betäubung nachlässt.

Tränenflüssigkeitssammlung (Schirmer-Test):

Eine kleine Menge der Tränen des Probanden wird gesammelt, indem Papierstreifen in den Augenwinkel gelegt werden.

Impression Zytologie:

Die Ermittler werden eine einzelne Materialprobe von der Augenoberfläche des Probanden entnehmen und diese dann auf zellulärer Ebene auswerten. Während der Impressionszytologie wird der Proband gebeten, mit leicht angehobenem Kinn geradeaus zu schauen. Ein Tropfen betäubender Augentropfen wird in den unteren Augenwinkel eingeträufelt. Der Kolben des Eindruckzytologiegeräts (EYEPRIM; OPIA Technologies SAS, Paris, Frankreich oder gleichwertig) wird gedrückt, um die Hornhaut mit der Membran 5 Sekunden lang sanft zu berühren. Der Druck wird vor dem Entfernen des Geräts abgelassen. Die Membran wird dann vorsichtig mit einer sterilen Pinzette aus dem Gerät in ein 1,5-ml-Röhrchen überführt. Es können mehrere EYEPRIM-Membranen gesammelt werden. Ein Tropfen einer künstlichen Träne würde auf die Augenoberfläche geträufelt werden. Der Teilnehmer wird gebeten, sein Auge für einige Sekunden zu schließen. Zum Sammeln des Tränenfilms wird ein Kapillarröhrchen oder ein Schirmer-Streifen verwendet.

Die Gesamtdauer der Untersuchungsverfahren beträgt ca. 20 Minuten.

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Proben:

Mikrobiologische Analysen werden im Ophthalmology Microbiology Lab des UPMC Eye Center durchgeführt.

Die Tränenflüssigkeitsproben würden mit ELISA analysiert auf:

• Matrixmetalloproteinase-9
• SLURP-1
• HLA-DR5
• IL-1RA,
• IL-6 und
• IL-8

Impressionszytologie-Proben würden verwendet, um Gesamt-RNA zu isolieren, die in cDNA umgewandelt und für die QPCR-Evaluierung entsprechender Transkripte für die oben genannten Ziele verwendet wird. QPCRs zusammen mit ELISAs würden überzeugende Beweise liefern, um die Wirkung(en) von 0,09 % Cyclosporin auf die Expression dieser Marker einer Entzündung der Augenoberfläche aufzuklären. Am Ende der Studie werden die Probandenzuordnungen entlarvt und der Unterschied zwischen Behandlungs- und Kontrollgruppe analysiert.