Marcatori del film lacrimale nella sindrome dell'occhio secco

I soggetti saranno reclutati in base alla loro diagnosi di secchezza oculare e una stima della gravità della malattia che verrebbe fatta dallo sperimentatore sulla base della storia del paziente e dell'esame clinico.

La gravità dell'occhio secco è determinata da un punteggio > 12 nella rubrica OSDI (Ocular Surface Disease Index), che è una pratica standard.

Saranno reclutati pazienti a cui è stato diagnosticato l'occhio secco, ma a cui non è stato prescritto un farmaco per trattare tale condizione.

Dopo aver firmato un modulo di consenso, i soggetti completeranno il loro esame oculistico di routine.

Il PI includerà pazienti consecutivi per ciascun braccio. Una volta completato il mandato in entrambe le braccia, l'investigatore interromperà il reclutamento. Lo sperimentatore includerà i pazienti che sceglieranno di utilizzare lacrime artificiali in un gruppo. Per l'altro gruppo, lo sperimentatore sceglierà i pazienti che accetterebbero elettivamente di utilizzare colliri di ciclosporina. Se questi pazienti scelgono di non far parte dello studio, finiranno comunque per utilizzare il trattamento che vorrebbero utilizzare.

• Braccio dello studio: il trattamento inizierà con colliri di ciclosporina due volte al giorno con gocce lacrimali artificiali prive di conservanti 4 volte al giorno (trattamento).
• Braccio di controllo: lacrime artificiali senza conservanti 4 volte al giorno (controllo).

Orario del collirio:

• Se gli viene chiesto di prendere 4 volte al giorno, il soggetto instillerà una goccia al mattino, pomeriggio, prima serata e prima di coricarsi.
• Se gli viene chiesto di prendere 2 volte al giorno, il soggetto instillerà una goccia al mattino e alla sera.
• I soggetti saranno anche istruiti a distanziare i colliri di 3-5 minuti.

Sia la ciclosporina che le lacrime artificiali saranno ordinate dal medico del soggetto, che sarà disponibile tramite il farmacista del soggetto. Queste gocce sono normalmente prescritte come parte delle cure di routine del soggetto.

Sia i soggetti che i medici saranno a conoscenza del tipo di trattamento; tuttavia l'inserimento e l'analisi dei dati sarebbero ciechi. Ciò avverrà assegnando ad ogni singolo soggetto un codice di collegamento.

I soggetti si autosomministrano i colliri per 8 settimane.

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Procedure di ricerca:

I seguenti campioni sarebbero raccolti al basale e alla settimana 8:

Linea di base (Visita 1):

• Randomizzazione
• Raccolta di liquido lacrimale
• Citologia dell'impronta

Settimana 4 (Visita 2):

• Raccolta dati: il soggetto seguirà normalmente il proprio oftalmologo come parte del suo esame oculistico di routine. Verranno raccolti: dati demografici; Anamnesi e visite ambulatoriali; Immagini e Fotografia; e record di microbiologia.

Settimana 8 (Visita 3):

• Raccolta di liquido lacrimale
• Citologia dell'impronta

Le visite 1 e 3 aggiungeranno fino a 20 minuti all'esame oculistico di routine del partecipante.

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Spiegazione delle procedure:

Goccia di anestesia paralizzante (proparacaina 0,5%):

Il soggetto riceverà una goccia di anestesia paralizzante (proparacaina 0,5%) nell'occhio infiammato come parte del loro standard di cura. L'effetto di questa goccia svanirà in 20 minuti dopo l'instillazione, ma il soggetto non è obbligato a rimanere finché l'intorpidimento non si attenua.

Raccolta del liquido lacrimale (test di Schirmer):

Una piccola quantità di lacrime del soggetto verrà raccolta posizionando strisce di carta nell'angolo dell'occhio.

Citologia dell'impronta:

Gli investigatori raccoglieranno un singolo campione di materiale dalla superficie dell'occhio del soggetto e poi lo valuteranno a livello cellulare. Durante la citologia per impronta al soggetto verrà chiesto di guardare dritto davanti a sé con il mento leggermente sollevato. Una goccia di collirio anestetico viene instillata nel fornice inferiore dell'occhio. Lo stantuffo del dispositivo per citologia ad impronta (EYEPRIM; OPIA Technologies SAS, Parigi, Francia o equivalente) viene spinto a toccare delicatamente la cornea con la membrana per 5 secondi. La pressione viene rilasciata prima di rimuovere il dispositivo. La membrana viene quindi trasferita con cura dal dispositivo in una provetta da 1,5 mL utilizzando un paio di pinze sterili. È possibile raccogliere più membrane EYEPRIM. Una goccia di lacrima artificiale verrebbe instillata sulla superficie dell'occhio. Al partecipante verrebbe chiesto di chiudere gli occhi per alcuni secondi. Un tubo capillare o una striscia di Schirmer verrebbero utilizzati per raccogliere il film lacrimale.

La durata complessiva delle procedure di ricerca sarà di circa 20 minuti.

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Campioni:

L'analisi microbiologica sarà elaborata presso l'Ophthalmology Microbiology Lab dell'UPMC Eye Center.

I campioni di liquido lacrimale verrebbero analizzati mediante ELISA per:

• Metalloproteinasi-9 della matrice
• SLURP-1
• HLA-DR5
• IL-1RA,
• IL-6 e
• IL-8

I campioni di citologia per impressione verrebbero utilizzati per isolare l'RNA totale, che verrà convertito in cDNA e utilizzato per la valutazione QPCR dei trascritti corrispondenti per i target di cui sopra. I QPCR insieme agli ELISA fornirebbero prove convincenti per chiarire gli effetti della ciclosporina allo 0,09% sull'espressione di questi marcatori di infiammazione della superficie oculare. Alla fine dello studio, le assegnazioni dei soggetti saranno smascherate e la differenza tra il trattamento e i gruppi di controllo analizzati.