Markery slzného filmu u syndromu suchého oka

Subjekty budou vybrány na základě jejich diagnózy suchých očí a odhadu závažnosti onemocnění, který by provedl zkoušející na základě pacientovy anamnézy a klinického vyšetření.

Závažnost suchého oka se určuje skórem > 12 v rubrice Index onemocnění povrchu oka (OSDI), což je standardní postup.

Budou přijati pacienti, u kterých bylo diagnostikováno suché oko, ale kterým nebyl předepsán lék k léčbě tohoto stavu.

Po podepsání formuláře souhlasu subjekty dokončí svou rutinní oční prohlídku.

PI bude zahrnovat po sobě jdoucí pacienty pro každé rameno. Jakmile je mandát v obou ramenech dokončen, vyšetřovatel zastaví nábor. Zkoušející zahrne pacienty, kteří se rozhodnou používat kapky umělých slz, do jedné skupiny. Pro druhou skupinu výzkumník vybere pacienty, kteří by volitelně souhlasili s používáním cyklosporinových očních kapek. Pokud se tito pacienti rozhodnou nebýt součástí studie, budou stejně nakonec používat léčbu, kterou by chtěli používat.

• Rameno studie: Léčba bude zahájena očními kapkami s cyklosporinem dvakrát denně s kapkami umělých slz bez konzervačních látek 4krát denně (Léčba).
• Kontrolní rameno: 4krát denně kapky umělých slz bez konzervačních látek (kontrola).

Harmonogram očních kapek:

• Pokud dostanete pokyn užívat 4krát denně, subjekt si vkápne jednu kapku ráno, odpoledne, brzy večer a před spaním.
• Pokud pacient dostane pokyn užívat 2krát denně, kápne si jednu kapku ráno a večer.
• Subjekty budou také instruovány, aby si po 3-5 minutách nakapaly oči.

Cyklosporin i umělé slzy objedná lékař subjektu, který bude k dispozici prostřednictvím lékárníka subjektu. Tyto kapky jsou normálně předepisovány jako součást rutinní péče subjektu.

Jak subjekty, tak lékaři si budou vědomi typu léčby; zadávání dat a analýza by však byly zaslepeny. To se provede tak, že každému jednotlivému subjektu přidělíte propojovací kód.

Subjekty si budou samy podávat oční kapky po dobu 8 týdnů.

-------------------------------------------------- -------

Postupy výzkumu:

Následující vzorky budou odebrány na začátku a v týdnu 8:

Výchozí stav (1. návštěva):

• Randomizace
• Sbírka slzné tekutiny
• Impresní cytologie

4. týden (2. návštěva):

• Shromažďování údajů: Subjekt bude normálně sledovat svého oftalmologa jako součást běžného očního vyšetření. Budou shromažďovány následující údaje: Demografické údaje; Klinická anamnéza a návštěvy ordinace; Obrázky a fotografie; a mikrobiologické záznamy.

8. týden (návštěva 3):

• Sbírka slzné tekutiny
• Impresní cytologie

Návštěva 1 a 3 přidá až 20 minut k běžné oční prohlídce v péči o účastníka.

-------------------------------------------------- -------

Vysvětlení postupů:

Znecitlivující anestetická kapka (proparakain 0,5 %):

Subjekt dostane znecitlivující anestetickou kapku (Proparacain 0,5 %) do oka, které je zanícené, jako součást standardní péče. Účinek této kapky odezní za 20 minut po instilaci, ale subjekt nemusí zůstat, dokud necitlivost odezní.

Odběr slzné tekutiny (Schirmerův test):

Malé množství slz subjektu bude zachyceno umístěním papírových proužků do koutku oka.

Impresní cytologie:

Vyšetřovatelé odeberou jeden vzorek materiálu z povrchu oka subjektu a poté jej vyhodnotí na buněčné úrovni. Během otiskové cytologie bude subjekt požádán, aby se díval přímo před sebe s mírně zvednutou bradou. Kapka anestetických očních kapek se vkape do dolního fornixu oka. Píst zařízení pro otiskovou cytologii (EYEPRIM; OPIA Technologies SAS, Paříž, Francie nebo ekvivalent) je zatlačen tak, aby se po dobu 5 sekund jemně dotkl rohovky membránou. Před vyjmutím zařízení se tlak uvolní. Membrána se poté opatrně přenese ze zařízení do zkumavky o objemu 1,5 ml pomocí sterilních kleští. Může být odebráno více membrán EYEPRIM. Jedna kapka umělé slzy se nakape na povrch oka. Účastník bude požádán, aby na několik sekund zavřel oko. Ke sběru slzného filmu by se použila kapilára nebo Schirmerův proužek.

Celková doba výzkumných procedur bude přibližně 20 minut.

-------------------------------------------------- -------

Vzorky:

Mikrobiologická analýza bude zpracována v Laboratoři oftalmologické mikrobiologie Očního centra UPMC.

Vzorky slzné tekutiny by byly analyzovány metodou ELISA na:

• Matrixová metaloproteináza-9
• SLURP-1
• HLA-DR5
• IL-1RA,
• IL-6 a
• IL-8

Vzorky otiskovací cytologie by byly použity k izolaci celkové RNA, která bude převedena na cDNA a použita pro QPCR hodnocení odpovídajících transkriptů pro výše uvedené cíle. QPCR spolu s ELISA by poskytly přesvědčivé důkazy k objasnění účinku (účinků) 0,09% cyklosporinu na expresi těchto markerů zánětu očního povrchu. Na konci studie budou přiřazení předmětu demaskována a bude analyzován rozdíl mezi léčenou a kontrolní skupinou.