Nem invazív preimplantációs genetikai vizsgálat az aneuploidiák kimutatására, sejtmentes DNS felhasználásával elhasznált táptalajban (niPGT-A)
Nem invazív preimplantációs genetikai vizsgálat az aneuploidiák kimutatására (niPGT-A) – A sejtmentes DNS elemzésének értékelése elhasznált táptalajban
Az elhasznált táptalajban (SCM) jelen lévő embrionális sejtmentes DNS (cfDNS) elemzése nem invazív alternatíva az aneuploidiák (PGT-A) beültetés előtti genetikai vizsgálatához, amely elkerüli a biopszia technikai kihívásait és korlátait. A nem invazív PGT-A (niPGT-A) módszert vizsgáló kezdeti vizsgálatok változó konkordanciáról számoltak be az SCM-ben lévő cfDNS és a trofektoderma minta között (~ 30%-86%), és mind a belső sejttömeg, mind a trofektoderma hozzájárulását jelezték a cfDNS-hez. az SCM-ben.
Ennek a tanulmánynak az a célja, hogy értékelje az embriótenyésztő táptalaj használatát a PGT-A genetikai anyagának forrásaként, és validáljon egy niPGT-A protokollt cfDNS használatával SCM-ben.
A tanulmány áttekintése
Állapot
Körülmények
Beavatkozás / kezelés
Részletes leírás
Számos tanulmány igazolta, hogy az SCM-ből származó cfDNS kimutatható és amplifikálható az embrionális fejlődés különböző szakaszaiban, változó amplifikációs siker mellett. Különbségek az analitokban, az SCM-gyűjtés időzítése és az embriótenyésztés időtartama a gyűjtött táptalajban, az asszisztált keltetés (AH), teljes genom amplifikációs módszerek, átfogó kromoszómaszűrési módszerek és következő generációs szekvenálási (NGS) platformok, bioinformatikai elemzések és stratégiák Az anyai fertőzés azonosítása mind hozzájárul a niPGT-A végső teljesítményéhez.
A tanulmány célja egy nem invazív PGT-A (niPGT-A) módszer validálása, amely a humán blasztocisztából az SCM-be felszabaduló cfDNS-t használ.
A másodlagos meddőség miatt PGT-A-val végzett termékenységi kezelés alatt álló betegek felvételére kerül sor. A megtermékenyítés utáni 6. napon SCM-et gyűjtenek a blasztociszta biopszia előtt. Az SCM-et ebben a szakaszban általában eldobják. A trofektoderma biopszia és a mintavétel az IVF laboratórium klinikai PGT-A standard gyakorlatát követi.
Három aneuploidia szűrési készletet hasonlítanak össze, amelyek különböző teljes genom amplifikációs módszerekre támaszkodnak, majd az NGS-t az Ion GeneStudio™ S5 Prime System rendszeren (ThermoFisher Scientific) alkalmazzák. A cfDNS és a trofektoderma biopsziák közötti összhangot körülbelül 150 blasztociszta esetében értékelik ki a legjobban teljesítő niPGT-A protokollal.
A transzferre szánt embrió(k) kiválasztása kizárólag a biopsziás sejtekből származó PGT-A eredményen alapul. A páciens IVF+PGT-A kezelési terve és idővonala nem változik.
Tanulmány típusa
Kapcsolatok és helyek
Részvételi kritériumok
Jogosultsági kritériumok
Tanulmányozható életkorok
Egészséges önkénteseket fogad
Tanulmányozható nemek
Mintavételi módszer
Tanulmányi populáció
Leírás
Bevételi kritériumok:
- PGT-A-val (rekombináns FSH antagonista protokoll kettős triggerrel) végzett termékenységi kezelés alatt álló betegek
- Másodlagos meddőség
- BMI 18- 35 kg/m2
- Sperma: friss ejakulált spermium (absztinencia: 2-3 nap)
- Legalább egy blasztociszta biopszia a 6. napon
Kizárási kritériumok:
- Magas progeszteronszint a kiváltás napján (>1,5 ng/ml)
- Üveges petesejtek
- Fagyasztott sperma
- A PGT-SR és a PGT-M javallatai
Tanulási terv
Hogyan készül a tanulmány?
Tervezési részletek
- Megfigyelési modellek: Kohorsz
- Időperspektívák: Leendő
Kohorszok és beavatkozások
Csoport / Kohorsz |
Beavatkozás / kezelés |
|---|---|
|
Kétféle mintát (TE és SCM) gyűjtenek a vizsgálatban szereplő összes blasztocisztáról
|
A PGT-A és niPGT-A következő generációs szekvenálási (NGS) analízissel hajtják végre a kromoszóma kópiaszám-variációját (CNV).
Az embriótranszfer kizárólag a PGT-A trofektoderma biopsziák eredményeire támaszkodik.
|
Mit mér a tanulmány?
Elsődleges eredményintézkedések
Eredménymérő |
Intézkedés leírása |
Időkeret |
|---|---|---|
|
Általános egyezés a cfDNS-re SCM-ben és a trofektoderma biopsziában kapott eredmények között
Időkeret: 4 hónap
|
Általános ploiditási egyezési arány: az egyező (euploid-euploid vagy aneuploid-aneuploid) eredmények száma/eredményt tartalmazó cfDNS-minták teljes száma
|
4 hónap
|
|
Kromoszómánkénti eltérés a cfDNS-re kapott eredmények között SCM-ben és trofektoderma biopsziában
Időkeret: 4 hónap
|
Kromoszómánkénti eltérés: a tévesen azonosított kromoszómahibák száma/24*a cfDNS-eredménnyel rendelkező embriók teljes száma
|
4 hónap
|
|
Kromoszómánkénti konkordancia a cfDNS-re kapott eredmények között SCM-ben és trofektodermában
Időkeret: 4 hónap
|
Kromoszómahiba konkordancia: helyesen azonosított kromoszómahibák száma/az észlelt kromoszómahibák teljes száma
|
4 hónap
|
|
A niPGT-A érzékenysége cfDNS használatával SCM-ben
Időkeret: 4 hónap
|
Hamis negatív arány: 1- (igazi euploid eredmény / az eredménnyel rendelkező minták teljes száma)
|
4 hónap
|
|
Az niPGT-A specifitása cfDNS használatával SCM-ben
Időkeret: 4 hónap
|
Hamis pozitív arány: 1- (valós aneuploid eredmény / az eredménnyel rendelkező minták teljes száma)
|
4 hónap
|
Másodlagos eredményintézkedések
Eredménymérő |
Intézkedés leírása |
Időkeret |
|---|---|---|
|
Terhesség kimenetele embriótranszferen átesett betegeknél – Beültetési arány
Időkeret: 12 hónap
|
Beültetési arány = az echográfiás szűrés során megfigyelt terhességi zsákok száma a terhesség 6 hetében / az átvitt embriók száma
|
12 hónap
|
|
Terhesség kimenetele embriótranszferen átesett betegeknél – Biokémiai terhességi arány
Időkeret: 12 hónap
|
Biokémiai terhességi arány = pozitív βhCG teszt > 15 NE, de nincs magzati szívverés / terhességi zsák ultrahangvizsgálaton
|
12 hónap
|
|
Terhesség kimenetele embriótranszferen átesett betegeknél – Klinikai terhességi arány
Időkeret: 12 hónap
|
Klinikai terhességi arány (%), amelyet pozitív βhCG teszt és a terhességi zsák vagy szívverés ultrahangos megerősítése határoz meg
|
12 hónap
|
|
Terhesség kimenetele embrióátültetésen átesett betegeknél – Vetélési arány
Időkeret: 12 hónap
|
A vetélési arány (%), amelyet egy vagy több terhességi zsák ultrahangos vizualizálása határoz meg, beleértve a méhen kívüli terhességet is, spontán terhesség-kieséssel 20 hét előtt
|
12 hónap
|
|
Terhesség kimenetele embriótranszferen átesett betegeknél – Klinikai terhességi arány
Időkeret: 12 hónap
|
Folyamatos terhességi arány (20 héten túl)
|
12 hónap
|
|
Terhesség kimenetele embrióátültetésen átesett betegeknél – Beültetési sikertelenség aránya
Időkeret: 12 hónap
|
Beültetési hiba (%)
|
12 hónap
|
Együttműködők és nyomozók
Szponzor
Nyomozók
- Kutatásvezető: Souraya Jaroudi, ART Fertility Clinics
Publikációk és hasznos linkek
Általános kiadványok
- Shamonki MI, Jin H, Haimowitz Z, Liu L. Proof of concept: preimplantation genetic screening without embryo biopsy through analysis of cell-free DNA in spent embryo culture media. Fertil Steril. 2016 Nov;106(6):1312-1318. doi: 10.1016/j.fertnstert.2016.07.1112. Epub 2016 Aug 24.
- Feichtinger M, Vaccari E, Carli L, Wallner E, Madel U, Figl K, Palini S, Feichtinger W. Non-invasive preimplantation genetic screening using array comparative genomic hybridization on spent culture media: a proof-of-concept pilot study. Reprod Biomed Online. 2017 Jun;34(6):583-589. doi: 10.1016/j.rbmo.2017.03.015. Epub 2017 Mar 28.
- Rubio C, Navarro-Sanchez L, Garcia-Pascual CM, Ocali O, Cimadomo D, Venier W, Barroso G, Kopcow L, Bahceci M, Kulmann MIR, Lopez L, De la Fuente E, Navarro R, Valbuena D, Sakkas D, Rienzi L, Simon C. Multicenter prospective study of concordance between embryonic cell-free DNA and trophectoderm biopsies from 1301 human blastocysts. Am J Obstet Gynecol. 2020 Nov;223(5):751.e1-751.e13. doi: 10.1016/j.ajog.2020.04.035. Epub 2020 May 26.
- Fang R, Yang W, Zhao X, Xiong F, Guo C, Xiao J, Chen L, Song X, Wang H, Chen J, Xiao X, Yao B, Cai LY. Chromosome screening using culture medium of embryos fertilised in vitro: a pilot clinical study. J Transl Med. 2019 Mar 8;17(1):73. doi: 10.1186/s12967-019-1827-1.
- Huang L, Bogale B, Tang Y, Lu S, Xie XS, Racowsky C. Noninvasive preimplantation genetic testing for aneuploidy in spent medium may be more reliable than trophectoderm biopsy. Proc Natl Acad Sci U S A. 2019 Jul 9;116(28):14105-14112. doi: 10.1073/pnas.1907472116. Epub 2019 Jun 24.
- Capalbo A, Romanelli V, Patassini C, Poli M, Girardi L, Giancani A, Stoppa M, Cimadomo D, Ubaldi FM, Rienzi L. Diagnostic efficacy of blastocoel fluid and spent media as sources of DNA for preimplantation genetic testing in standard clinical conditions. Fertil Steril. 2018 Oct;110(5):870-879.e5. doi: 10.1016/j.fertnstert.2018.05.031. Erratum In: Fertil Steril. 2019 Jan;111(1):194.
- Ho JR, Arrach N, Rhodes-Long K, Ahmady A, Ingles S, Chung K, Bendikson KA, Paulson RJ, McGinnis LK. Pushing the limits of detection: investigation of cell-free DNA for aneuploidy screening in embryos. Fertil Steril. 2018 Aug;110(3):467-475.e2. doi: 10.1016/j.fertnstert.2018.03.036. Epub 2018 Jun 28.
- Kuznyetsov V, Madjunkova S, Antes R, Abramov R, Motamedi G, Ibarrientos Z, Librach C. Evaluation of a novel non-invasive preimplantation genetic screening approach. PLoS One. 2018 May 10;13(5):e0197262. doi: 10.1371/journal.pone.0197262. eCollection 2018.
- Vera-Rodriguez M, Diez-Juan A, Jimenez-Almazan J, Martinez S, Navarro R, Peinado V, Mercader A, Meseguer M, Blesa D, Moreno I, Valbuena D, Rubio C, Simon C. Origin and composition of cell-free DNA in spent medium from human embryo culture during preimplantation development. Hum Reprod. 2018 Apr 1;33(4):745-756. doi: 10.1093/humrep/dey028.
- Xu J, Fang R, Chen L, Chen D, Xiao JP, Yang W, Wang H, Song X, Ma T, Bo S, Shi C, Ren J, Huang L, Cai LY, Yao B, Xie XS, Lu S. Noninvasive chromosome screening of human embryos by genome sequencing of embryo culture medium for in vitro fertilization. Proc Natl Acad Sci U S A. 2016 Oct 18;113(42):11907-11912. doi: 10.1073/pnas.1613294113. Epub 2016 Sep 29.
Tanulmányi rekorddátumok
Tanulmány főbb dátumok
Tanulmány kezdete (Tényleges)
Elsődleges befejezés (Tényleges)
A tanulmány befejezése (Tényleges)
Tanulmányi regisztráció dátumai
Először benyújtva
Először nyújtották be, amely megfelel a minőségbiztosítási kritériumoknak
Első közzététel (Tényleges)
Tanulmányi rekordok frissítései
Utolsó frissítés közzétéve (Tényleges)
Az utolsó frissítés elküldve, amely megfelel a minőségbiztosítási kritériumoknak
Utolsó ellenőrzés
Több információ
A tanulmányhoz kapcsolódó kifejezések
Kulcsszavak
További vonatkozó MeSH feltételek
Egyéb vizsgálati azonosító számok
- 2010-ABU-011-SJ
Terv az egyéni résztvevői adatokhoz (IPD)
Tervezi megosztani az egyéni résztvevői adatokat (IPD)?
Gyógyszer- és eszközinformációk, tanulmányi dokumentumok
Egy amerikai FDA által szabályozott gyógyszerkészítményt tanulmányoz
Egy amerikai FDA által szabályozott eszközterméket tanulmányoz
az Egyesült Államokban gyártott és onnan exportált termék
Ezt az információt közvetlenül a clinicaltrials.gov webhelyről szereztük be, változtatás nélkül. Ha bármilyen kérése van vizsgálati adatainak módosítására, eltávolítására vagy frissítésére, kérjük, írjon a következő címre: register@clinicaltrials.gov. Amint a változás bevezetésre kerül a clinicaltrials.gov oldalon, ez a webhelyünkön is automatikusan frissül. .