Kettős hipotermiás oxigenizált gépi perfúzió májtranszplantáció során, donorokból származó allograftokat használva agyhalál után

Ez egy párhuzamos, randomizált, ellenőrzött vizsgálat lesz a vég-ischaemiás hipotermiás oxigénes gépi perfúzió hatásairól az agyhalál utáni donorok májátültetésénél. A betegeket randomizálják hipotermiás perfúzióra vagy egyszerű hideg tárolásra (1:3 arány). Az elsődleges végpont a korai graft diszfunkció (MEAF) pontszám modellje lesz, amely az allograft működésének nemrégiben validált folyamatos mérése a májátültetés utáni korai időszakban, a szérum alanin-transzamináz (ALT) aktivitásával, a protrombin idő nemzetközi normalizált arányával ( INR) és a szérum bilirubin koncentrációja az első posztoperatív napon belül. Az eredeti vizsgálatban az átlagos MEAF pontszám 5,01 volt, 1,99 szórással. Ennek a tanulmánynak az elsődleges hipotézise az átlagos MEAF pontszám 5-ről 3,5-re történő csökkentése hipotermiás oxigénes gépi perfúzióval. Az I. típusú hiba 0,05-ös küszöbértéke és a 0,90-es teljesítmény, az 1:3-as allokációs arány és az 1,99-es szórás mellett az ilyen eltérés kimutatásához szükséges betegek száma 26 a hipotermiás perfúziós csoportban és 78 az egyszerű betegekben. hűtőtároló csoport (összesen 104). A felvételi kritériumok közé tartozik a 18 év feletti életkor, az elhunyt donor májátültetés és a beleegyezés megadása. A kizárási kritériumok közé tartozik a szívhalál utáni adományozás és a csökkentett vagy osztott graft. A másodlagos kimenetelű mérések magukban foglalják a 2 éves recipiens és graft túlélést, az epeúti szövődmények 2 éves előfordulási gyakoriságát, valamint a 90 napos posztoperatív időszak szövődményeit típusonként és súlyosságuk szerint a Clavien-Dindo osztályozási rendszer szerint.

A tájékozott beleegyezés megadását követően a recipienseket véletlenszerűen, 1:3 arányban besorolják a hipotermiás perfúziós csoportba vagy az egyszerű statikus hűtőtárolási csoportba. A hipotermiás perfúziós csoportban az allograftokat vég-ischaemiás hipotermiás oxigenizált perfúziónak vetik alá 12 Celsius-fokon mind a májartérián, mind a portális vénán keresztül, 4 Celsius fokos egyszerű hideg tárolás után, közvetlenül a beültetés előtt. A perfúzió legalább 2 óráig tart, és folyamatban lévő hepatektómia esetén az időtartam meghosszabbodik, hogy a perfúziót követően azonnal végre lehessen hajtani a graft beültetést. A mikro- és makrovezikuláris steatosis és az ATP-tartalom értékelésére két ék-allograft biopsziát végeznek a perfúzió elején és 2 órás perfúzió után. A perfuzátumból az elején és 30 percenként mintát vesznek a nátrium-, kálium- és laktátkoncentráció, a CO2 parciális nyomás és az FMN értékeléséhez. A perfuzátum hőmérsékletét, a portális és az artériás áramlást, valamint a portál és az artériás ellenállást szorosan ellenőrizni kell az eljárás során. Az egyszerű hűtőtároló csoportban az allograftokat perfuzátumban, 4 Celsius fokon tárolják a beszerzéstől a beültetésig. Az egyszerű hűtőtárolás végén ék biopsziát veszünk a mikro- és makrovezikuláris steatosis és az ATP tartalom felmérésére. Mindkét csoportban a back-table eljárás során az allograftot 1 liter perfuzátummal átöblítik a portális vénán keresztül. Az öblítés végén perfuzátummintát vesznek a jobb májvénából az FMN és a laktátkoncentráció értékeléséhez.

Mindkét csoportban klinikai, antropometriai és laboratóriumi transzplantáció előtti adatokat gyűjtenek. Ez magában foglalja: transzplantáció indikációját, Child-Turcotte-Pugh osztályozást, hepatitis B és C vírusfertőzés jelenlétét, a végstádiumú májbetegség (MELD) pontszámának modelljét (kivétel nélkül pontok), a beteg súlyát, magasságát, testtömeg-indexét és derékbőség, szérum bilirubin, kreatinin, glükóz és albumin koncentráció, INR és a transzaminázok szérum aktivitása. Össze kell gyűjteni a releváns donor- és beszerzési adatokat, beleértve a donor életkorát, magasságát, testtömeg-indexét, a halál okát, etnikai hovatartozását, a szérum nátrium- és bilirubinkoncentrációját, a transzaminázok szérumaktivitását, az INR-t és az extrakciós időt. A donor kockázati indexet minden esetben kiszámítjuk. Összegyűjtjük a hideg ischaemia időtartamát és számos intraoperatív paramétert, beleértve a meleg ischaemia időtartamát, az intraoperatív transzfúziókat, a szérum nátrium- és káliumszint változásait, a posztreperfúziós szindróma előfordulását és a műtét időtartamát. A portális reperfúzió után 90 perccel minden betegnél ékbiopsziát kell végezni az ischaemia-reperfúziós sérülés (Suzuki-pontszám), az apoptózis, az endoteliális aktiváció (vWF és P-szelektin), a veleszületett immunitás aktiválása (TLR4) és az oxidatív sérülés szövettani értékelése céljából. MDA) és ATP-tartalom. Vérmintákat vesznek közvetlenül a reperfúzió előtt, 90 perccel a reperfúzió után, és az első posztoperatív napon a proinflammatorikus citokinek (TNFα, IL-2, IL-10), a sejtmag károsodásának (HMGB1, 8-OHdG) és a hepatocita-, ill. cholangiocyta sérülés (transzaminázok és GGT aktivitás). A transzplantációt követően minden beteget szigorúan követnek a központ protokollja szerint a transzaminázok és a GGTP szérum aktivitásának, a bilirubin és a kreatinin koncentrációjának, valamint az INR értékének értékelésével naponta kétszer az első 3 posztoperatív napon és naponta vagy 2-3 naponként. a klinikai értékelés szerint) ezt követően. A 90 posztoperatív időszakban fellépő összes szövődményt rögzíteni kell, beleértve az elsődleges nem-funkciót, a korai allograft diszfunkciót, az epeszivárgást, a kilökődési epizódokat és az érrendszeri szövődményeket. Kórházi elbocsátást követően a betegeket a központ protokollja szerint, rendszeres rendelésekkel követik a járóbeteg-szakrendelésen, a transzplantációt követő első 2 hónapban 2 hetente, 6 hónapig havonta, 1 évig 2-3 havonta. , majd 3-6 havonta. Minden szövődmény, különösen az epeúti szövődmények előfordulását rögzíteni kell. Mindkét csoportot összehasonlítják az elsődleges és a másodlagos kimenetel, az egyéb előre meghatározott klinikai kimenetelek, az allograft sérülés és az ATP-tartalom a beültetés előtt, valamint az ischaemia-reperfúziós sérülés jelei, az oxidatív károsodás, az apoptózis, az ATP-tartalom, a veleszületett immunitás aktiválódása, és endoteliális aktiválás allograft biopsziákban reperfúziót követően. Az összehasonlításokba beletartoznak a pro-inflammatorikus citokin felszabadulás, a nukleáris sérülés keringő markerei és az allograft funkció és sérülés egyéb laboratóriumi markerei is. A reperfúzió előtt és után kapott perfuzátumminták és allograft biopsziák elemzését tervezzük, hogy meghatározzuk mind a hipotermiás perfúzió hatását a máj ATP-tartalmára, mind a mitokondriális károsodásra (FMN). Ezen túlmenően a perfuzátum-elemzések (különösen az FMN) eredményeit értékelni fogják a klinikai kimenetel méréseivel, a reperfúzió utáni allograft biopsziák értékelésének eredményeivel, valamint az allograft funkció, a sérülés és a gyulladásos válasz szérummarkereivel való lehetséges összefüggés szempontjából annak érdekében, hogy meghatározzák a pre-ben játszott szerepét. - az allograft életképességének transzplantációs értékelése.