A sejtgyilkosság T -sejt -aktivátora ("Tack") a "Vizsgálaton ("TACKITON)

Háttér:

A kombinált antiretrovirális terápiák (CART) a HIV -t krónikus kezelhető egészségi állapotgá alakították sok PLWH számára.

A erős kocsi ellenére a PLWH túlnyomó többségének viremia maradék, amely a 20 példány/ml plazma jelenlegi klinikai vizsgálatok kimutatásának határán marad, de gyakran nagyon érzékeny vizsgálatokkal detektálható. Számos tanulmány jelentése szerint a PLWH-nak megfelel a CART-nak, a gyógyszerrezisztencia mutációk nélkül, folyamatosan kimutatható, alacsony szintű viremiát mutat (más néven nem szoptatható viremia, NSV), általában 20-400 példány/ml között, 1-től 250-ig terjedő frekvenciánként. 9% és 10%. Ontarioban az elmúlt két évben a PLWH 11,9% -ának volt két vagy több egymást követő értéke az alacsony szintű viremia (LLV) (személyes kommunikáció Vanessa Tran, Ontario közegészségügyi laboratóriumai). Noha a megfelelő kocsi alacsony szintű viremia nem tükrözi a kezelési kudarcot, bizonyítékok vannak arra, hogy ez nem lehet klinikailag jelentéktelen. A nagy kohorszok legújabb tanulmányai a virológiai kudarc 2-3-os esélyét előrejelzik, és megnövelték az összes halálozási és nem AIDS eseményt az LLV-vel. Fehér et. al. kimutatták, hogy a detektálható LLV a hibás és a replikáció kompetens vírust tartalmazó klónok kiterjedésének köszönhető, amelyek az antigénekre adott válaszként valószínűleg proliferálódnak. Így az LLV -ben szenvedő egyéneknek valószínűleg nagyon nagy a proliferált klónok populációi a tározójukban. Az, hogy a napi vírustermelés magasabb szintje fenntartja -e a gyulladást és az immun aktiválást, nem érthető -e. Ezenkívül ezeknek az eredményeknek a klinikai rövid távú jelentősége azonban nem egyértelmű, ezek az egyének egyedülálló csoportot képviselnek a rezervoár méretének csökkentő gyógyítási stratégiáinak további tanulmányozására.

A legfrissebb megfigyelések azt sugallják, hogy néhány NNRTI-t (különösen az efavirenz) újratelepíthetnek, hogy megöljék ezeket a vírustermelő sejteket. A HIV-proteáz enzim egy nagyobb GAG-POL protein prekurzor része, amelyet inaktív monomerként állítanak elő a fertőzött sejtek citoplazmájában a HIV transzkripció után. Annak érdekében, hogy a HIV -proteáz aktív legyen, dimerizálnia kell, és ennek a dimerizációnak csak a vírusrészecskékben történik, amelyek a sejtből robbantak, ami érett, fertőző vírusrészecskéket eredményez. Kimutatták, hogy egyes NNRTI-k, például az efavirenz indukálhatják az intracelluláris gag-pol dimerizációt és a korai proteáz aktiválódását a citoszolban a kezdő előtt, ami kiválthatja a Card8 (kaszpáz toborzási domén protein 8) gyulladásos, ami a HIV-1- sejtek előállítása piroptózison keresztül. Ez a folyamat akkor fordul elő, amikor a vegyület kötődik a GAG-Pol poliprotein RT doménjéhez, amely olyan konformációs változáshoz vezet, amely inkább a sejt citoplazmáján belüli dimerizációt indukálja, nem pedig a vírusrészecskékben, és a proteáz enzim ebből következő autokatalitikus aktivitását. Így az EFV indukálhatja a GAG-POL dimerizációt a citoplazmában, amely kiváltja a CARD8 érzékelést és a gyulladásos aktiválást az intra-citoplazmatikus proteáz-kártyák aktiválását a proteáz-inhibitorok jelenléte blokkolja (pl. Indinavir). A Simonetti Lab előzetes adatai (az egyik társvizsgáló) CD4+ T-sejtek felhasználásával, a kosárban lévő emberekből, akik nem szuppresszív, de alacsony szintű viremiát tapasztaltak, kimutatták, hogy az efavirenz (EFV) mikromoláris koncentrációja az erős T-en az erős T-nél erős termelést eredményez. A sejtek aktiválása CD3/CD28 stimulációval, a CARD8 HIV proteáz aktivitásának érzékelése miatt. Más szavakkal, ezeket a vírusfertőzött sejteket EFV jelenlétében elpusztítottuk immun aktiválás során. A kontroll kísérletekben, a proteáz -gátló lopinavir hozzáadásával, az EFV hatása teljesen megsemmisül. Kísérleteket végeztünk az EFV -vel 5um -on, amelyet plazmában lehet elérni az egyének nagy részén, az ajánlott teljes adaggal (600 mg Q.D.). Korábbi farmakokinetikai vizsgálatok azt mutatták, hogy az EFV elérte az EC50 feletti plazmakoncentrációt, amely a gyilkossági hatáshoz szükséges (1UM), és még magasabb koncentrációt ér el a szövetekben. A legfrissebb munka beszámolt az NNRTI-szerű molekulákról, amelyek összehasonlítható vírusellenes aktivitással rendelkeznek az EFV-vel, de szignifikánsan magasabb hatékonyság a dimerizáció és a Card8 által közvetített gyilkosság indukálásában. Az ilyen vegyületek azonban továbbra is a preklinikai vizsgálat korai szakaszában vannak, és azok farmakokinetikai profilját és aktivitását in vivo nem vizsgálták meg. A HIV -fertőzött sejtek piroptózissal történő elpusztításának ezt a hatását a CARD8 érzékelése után TACK -nak nevezték (a sejtgyilkosság célzott aktivátora). Az EFV képviseli a legjobb TACK-molekulát annak megvizsgálására, hogy a CARD8-FLlammázát terápiás lehetőségként lehet-e használni a HIV-ben élő emberekben az ART-nál élő embereknél. A javasolt tanulmányban a CART fokozódását az EFV -vel a CARD8 érzékelés indukálására és a vírus replikációjának nem blokkolására használják.

Hipotézis:

A PLWH számára, akik ragaszkodnak a CART-hoz, nincs dokumentált ellenállásuk a jelenlegi kosárral, vagy az EFV-vel, és akik tartósan nem szoptatható viremiát (NSV) dokumentáltak, az efavirenz rövid távú hozzáadásával, mint egy tack-molekula [a sejtgyilkosság célzott aktivátora. ], csökkenti a plazma HIV-1 RNS vírusterhelését.

Az elsődleges végpont plazma HIV viremia -t összehasonlítják a kiindulási állapotban (2. látogatás) 8 hetes EFV után. (Látogasson el a 7. oldalra) Másodlagos végpontok

HIV vírusos tározók:

QVOA (replikáció kompetens vírus kinövési vizsgálata) a kiindulási állapotban és 2 hónapos EFV-intakt Proviral DNS-vizsgálatban, a kiindulási állapotban, 2 hónapos EFV-sejt-asszociált HIV RNS-en, az EFV 2 hónapos és utáni és utáni és utáni és utáni és után.

Immun aktiválás:

Az immun aktiválás és a sejthalál markerei a plazmában (kiindulási és 2 hónap):

CRP, LDH, IL-1 béta, TNF, IL-6, Gasermin D, Th1 és Th2 citokinek és kemokinek markerei a T-sejt (CD4 és CD8) aktiválását a kiindulási és 2 hónapos áramlási citometrián keresztül mérve.

A T -sejtek a HIV -fehérjékhez a kiindulási és 2 hónapon belül.

Tanulmányterv:

Ez egy prospektív, nem randomizált tanulmány, amelyben mindegyik beiratkozott alany saját kontrollja lesz, mielőtt két hónapos Efavirenz-t vezet be, mint TACK-molekulát. A tanulmány egyetlen helyszínen, a torontói Maple Leaf Clinic -en, az Unity Health St. Michael's Kórházban és a Torontói Egyetemen található. A beiratkozás után a tanulmány időtartama 20 hét. Minden alanyt felvesznek a torontói Maple Leaf Clinicbe. Vérhúzás történik a Maple Leaf Clinic -en. A vírustartályok intenzívebb tanulmányozására szolgáló leukapherezis eljárások opcionálisak lesznek, és a kiindulási és 8 héten fognak fordulni. A kiindulási értéket úgy definiálják, hogy az alapvető vér húzásának és/vagy leukapheresisnek az időpontja, és az egyének napi egyszer 8 hétig 600 mg PO -nál indulnak, hogy a következő napon megkezdődjenek. A résztvevőket a kiindulási látogatás előtt körülbelül - 4 héttel az alapvonal előtt azonosítják a jogosultság biztosítása érdekében. 14 résztvevőt szándékozunk beiratkozni. A -4 hetes látogatáskor (1. látogatás) a tanulmányi gyógyszerész áttekinti az összes egyidejű gyógyszert, a megfelelést, a jelenlegi művészeti kezelést és a javasolt művészeti rendet teljes EFV adagolással. A potenciális mellékhatás/toxicitások - az EFV ismert, de visszafordítható neurológiai hatásait - és azok kezelését tárgyaljuk. Ebben az időpontban vírusterhelést kapunk a tartós alacsony szintű viremia megerősítésére. A kiindulási állapotban (0. idő), ha az előző VL LLV-t mutatott, akkor a következő vizsgálatokat kell elvégezni: HIV vírusterhelés, QVOA, IPDA a HIV-tartály méréseihez, a sejtekhez kapcsolódó HIV RNS, a plazma és az immun aktiválás T-sejtmarkereinek, a HIV-specifikus HIV-specifikus T -sejt immunitás. A kiindulási állapotban a 70 cm3 -es vérhúzás helyett az alanyokat felajánlják a leukapheresisben (opcionális), amely nagyobb sejtszámokat biztosít a HIV -tározó jobb kihallgatásához. A későbbi látogatások 1 hét (v3), 3 hét (V4), 5 hét (V5) és 7 hét (V6) után követik a plazma vírusterhelést és az IPDA tározókat. 8 héten (V7) a résztvevők abbahagyják az EFV -t, és megvizsgálják a vírusterhelést, a HIV -tározókat, a plazmát és a sejtmarkert, és megvizsgálják a T -sejt immunitását. Az alanyoknak leukapheresist (opcionális) kínálnak, hogy jobban jellemezzék a HIV -tározót és a T -sejt immunvizsgálatát. A követő látogatások mérik a plazma vírusterhelést és a tartályokat a 9., 12., 12. (V9) és 16 (V10) héten. Minden látogatás során a résztvevőket felülvizsgálják a potenciális mellékhatások/toxicitások, beleértve a neuropszichiátriai tüneteket, valamint a betartást, és a CRF-t felülvizsgálják. A potenciális mellékhatásokat vérhúzással kell megvizsgálni és ennek megfelelően kezelni (például a kiütés, az antihisztaminok, a HC krém, a +/- abbahagyása esetén az EFV-t, ha a vizsgálati orvos mérsékelt vagy súlyos AE-t mérsékelt vagy súlyos AE-t. Kovacs). Minden látogatásra a megadott időpont +/- 3 napjára kerül sor.

Mintavétel. A vért SST/EDTA/ACD csövek felhasználásával gyűjtik a különféle vizsgálatokhoz. A kiindulási és 8 héten, ha az alanyok leukapherézisen mennek keresztül, akkor csak egy 5 ml -es cső vér a vírusterheléshez. A vérmennyiségek a következők: Szűrőlátogatás (25 ml), 75 ml az összes többi látogatásnál (ha a leukapheresis nem történt meg). Minden látogatáskor az EFV mellékhatásait, az új vagy a folyamatos gyógyszereket, beleértve a kosárrendszert, az értékelést és a betartást ki kell értékelni. Az immunbiztonság biztosítása érdekében a CD4 számát a szűréskor, a WK 8 és a 16 -os szűréskor végzik.

Statisztikai elemzés:

A statisztikai elemzéseket a Johns Hopkins CFAR Biostatistics és az Epidemiology Core (BEM) és a CTN támogatásával végezzük; Az időpontok közötti különbségeket a teljes kohorszban a Wilcoxon rangsor vagy a Kruskal-Wallis teszttel hasonlítják össze. A résztvevőn belüli (log-transzformált) HIV-1 RNS, DNS, az időpontok közötti változásokat a résztvevő-specifikus lineáris regressziós modellekkel becsüljük meg, és összehasonlítják a NO változás nullhipotézisével a Wilcoxon által aláírt rangú teszttel. Ugyanezt a megközelítést alkalmazzák az immun aktiválás és a gyulladás oldható markereire.

Várható eredmények és következmények A HIV -tározó nem bomlik természetes módon, vagy nem használja a CART -t. A javasolt kutatás a HIV -kitartás transzlációs aspektusaival foglalkozik, a klinikai ellátás azonnali következményeivel. A CARD8 A 8 -as gyulladásos aktiválás EFV -vel történő kiaknázása potenciálisan kiküszöböli a GAG/POL transzkripciósan aktív provírusokat az LLV okaként, amely jelenleg korlátozott terápiás lehetőségekkel rendelkezik, mivel a jelenlegi antiretrovirális szerek nem befolyásolják a vírus expresszióját. Az LLV csökkentése megszabadíthatja a klinikusokat és a betegeket a téves és potenciálisan káros kísérletektől az indokolatlan kezelési módváltás, a gyógyszeres kudarc szorongásától vagy a szexuális partnerek számára történő átvitel személyes kockázataitól. Az újonnan azonosított káros gyulladás és a krónikus immun aktiválás jelentős és kezelhető okának csökkentésének lehetősége súlyos következményekkel jár a megelőzhető egyidejű betegségek előfordulásának és eredményeinek javításában. Ha ezek az erőfeszítések a fegyelemmel haladnak, akkor a gyulladásos marker csökkentését először lehet felhasználni a HIV -kezelés klinikai ellátási kaszkádjában. Tekintettel arra, hogy a rezervoár nagy része tükrözi a fertőzött klónok bővülését, egy ilyen stratégia képes lehet ezeket kiküszöbölni. A közelmúltban a CURE -tanulmányok megtapasztalták a részvételt, hogy a közösségek vonakodnak vállalni a kosár megszakítását a kutatásban. Ez a terv biztonságbiztosítást nyújthat az önkéntesek számára, miközben kielégíti a vizsgálói követelményeket az ellenőrizhető jelekre, például az IPDA -ra és a VQOA -ra való támaszkodásra vagy az LLV csökkentésére. A Tack Therapeutics célja kétszer: 1) a replikációs kompetens vírusok rezervoárjának jelentős csökkentése; és 2) a folyamatos antigén stimuláció csökkentése érdekében, amely transzkripciósan aktív, de hibás vírusok beavatkozásait tartalmazó látványos fertőzött sejtek klónjaiból származik, amelyek ezeket az egyéneket nem észlelhetetlenné alakíthatják.

Toborzás, összesen 26 résztvevőt toboroznak a vizsgálatra.