Aktivátor T buněk zabíjení buněk („cvovačka“) na „studii ("TACKITON)

Pozadí:

Kombinované antiretrovirové terapie (CART) transformovaly HIV na chronický zvládnutelný zdravotní stav pro mnoho PLWH.

Přes silný vozík má velká většina PLWH zbytky virémie, která zůstává pod hranicí detekce současných klinických testů 20 kopií/ml plazmy, ale často může být detekována vysoce citlivými testy. Řada studií uvádí, že PLWH v souladu s vozíkem bez mutací rezistence na léčivo má trvalou detekovatelnou virémii nízké úrovně (také označované jako nesnesitelná virémie, NSV), obvykle od 20-400 kopií/ml, v frekvenci od 1 z 250 do 250 do 250 9% a 10%. V Ontariu mělo za poslední dva roky 11,9% PLWH dvě nebo více po sobě jdoucí hodnoty virémie nízké úrovně (LLV) (osobní komunikace Vanessa Tran, Ontario Public Health Labs). Přestože je virémie nízké úrovně na kompatibilním vozíku pocit, že neodráží selhání léčby, existuje důkaz, že to nemusí být klinicky nevýznamné. Nedávné studie velkých kohort předpovídají 2-3násobnou šanci na virologické selhání a zvýšily všechny příčiny úmrtnosti a událostí bez AIDS s LLV. Bílá et. al. ukázali, že detekovatelný LLV je způsoben expanzí klonů obsahujících defektní i replikační kompetentní virus, které se pravděpodobně proliferují v reakci na antigeny. Jednotlivci s LLV tedy mají pravděpodobně velmi velké populace proliferovaných klonů ve svých nádržích. Zda tato vyšší úroveň produkce denního viru udržuje zánět a imunitní aktivaci, je špatně pochopeno. Kromě toho je klinický krátkodobý význam těchto zjištění nejasný, ale tito jedinci však představují jedinečnou skupinu pro další studium strategií vyléčení, které snižují velikost nádrže.

Nedávná pozorování naznačují, že některé NNRTIS (zejména Efavirenz) by mohly být znovu zabíjeny, aby zabili tyto buňky produkující viru. Enzym HIV proteázy je součástí většího prekurzoru proteinu GAG-Pol, který je produkován jako neaktivní monomer v cytoplazmě infikovaných buněk po transkripci HIV. Aby byla proteáza HIV aktivní, musí se dimerizovat a tato dimerizace probíhá pouze v částice viru, která se vydala z buňky, což má za následek zralé, infekční virové částice. Ukázalo se, že někteří NNRTI, jako je Efavirenz, mohou vyvolat intracelulární dimerizaci gag-pol a předčasnou aktivaci proteázy v cytosolu před pučením, což může spustit zánětlivou kartu8 (protein pro protein 8 kaspázy), což vede k smrti HIV-1- produkující buňky prostřednictvím pyroptózy. K tomuto procesu dochází, když se sloučenina váže na RT doménu polyproteinu GAG-Pol, což vede k konformační změně, která indukuje jeho dimerizaci v buněčné cytoplazmě spíše než v částici viru a na následnou autokatalytickou aktivitu proteázového enzymu. EFV tedy může indukovat dimerizaci GAG-Pol v cytoplazmě, která spustí karet8 snímací a zánětlivou aktivaci intracytoplazmatické aktivace proteázy-karty8 by bylo blokováno přítomností inhibitorů proteázy (např.. indinavir). Předběžné údaje z laboratoře Simonetti Lab (jeden ze spoluvětatorů) s využitím CD4+ T buněk od lidí na vozíku zažívají nesprpresivní, ale virémie nízké úrovně, ukázaly, že mikromolární koncentrace Efavirenzu (EFV) mohou významně snížit produkci viru po silné T Aktivace buněk stimulací CD3/CD28 v důsledku snímání karty8 proteázové aktivity HIV. Jinými slovy, tyto buňky infikované virem byly zabito v přítomnosti EFV během imunitní aktivace. V kontrolních experimentech, s přidáním inhibitoru proteázy lopinavir, je účinek EFV zcela zrušen. Pokusy byly prováděny s EFV při 5UM, které lze dosáhnout v plazmě u velké frakce jedinců s doporučenou plnou dávkou (600 mg q.d.). Předchozí studie farmakokinetiky ukázaly, že EFV dosahující koncentraci plazmy nad EC50 vyžadovalo pro jeho zabíjecí účinek (1UM) a dosahuje ještě vyšší koncentrace v tkáních. Nedávná práce uváděla molekuly podobné NNRTI se srovnatelnou antivirovou aktivitou s EFV, ale výrazně vyšší účinnost při vyvolávání dimerizace a zabíjení zprostředkované karty. Takové sloučeniny jsou však stále v raných stádiích předklinického zkoumání a jejich farmakokinetický profil a aktivita in vivo nebyla prozkoumána. Tento účinek zabíjení HIV infikovaných buněk pyroptózou po snímání karty se nazývá CORT (cílený aktivátor zabíjení buněk). EFV představuje nejlepší molekulu připisování pro testování, zda může být nafouklum, který může být u lidí žijících s HIV na ART EFV uznáván jako nejslibnější a nejsilnější sloučeninu NNRTI jako terapeutická možnost. V navrhované studii se intenzifikace vozíku pomocí EFV používá k indukovanému snímání karty8 a ne blokování replikace viru.

Hypotéza:

Pro PLWH, kteří jsou přilnaví k vozíku, bez zdokumentované odolnosti vůči jejich současnému vozíku nebo EFV a kteří zdokumentovali přetrvávající nepředvídatelnou virémii (NSV), krátkodobý přidání Efavirenzu, jako molekulu připisování [cílený aktivátor zabíjení buněk zabíjení buněk ], sníží virovou zátěž Plazmatické HIV-1 RNA.

Primární koncový bod virémie HIV Plazma bude porovnána na začátku (návštěva 2) po 8 týdnech EFV. (Navštivte 7) Sekundární koncové body

HIV virové nádrže:

QVOA (test růstu viru s replikací kompetentního viru) na začátku a po 2 měsících EFV neporušeného testu DNA na začátku, během a po 2 měsících HIV RNA spojené s EFV na začátku, během a po 2 měsících po 2 měsících po 2 měsících po 2 měsících po 2 měsících po 2 měsících po 2 měsících po 2 měsících EFV po 2 měsících EFV

Imunitní aktivace:

Markery imunitní aktivace a buněčné smrti v plazmě (základní linie a 2 měsíce):

CRP, LDH, IL-1 Beta, TNF, IL-6, Gasdermin D, Th1 a Th2 cytokiny a chemokinové markery aktivace T buněk (CD4 a CD8) měřené na začátku a 2 měsíce prostřednictvím průtokové cytometrie.

T buňky responsnes k HIV proteinům na začátku a 2 měsíce.

Návrh studie:

Jedná se o prospektivní, ne-randomizovanou studii, ve které bude každý zapsaný subjekt působit jako jejich vlastní kontrola před a po zavedení dvou měsíců Efavirenzu jako molekuly tašení. Studie bude na jednom místě, na klinice Maple Leaf Clinic v Torontu, Unity Health St. Michael's Hospital a University of Toronto. Po zápisu je doba trvání studie 20 týdnů. Všechny subjekty budou přijato na kliniku Maple Leaf Clinic, Toronto. Krevné odběr krve dojde na klinice Maple Leaf. Postupy leukaferézy pro intenzivnější studium virových nádrží a imunity budou volitelné a dojde na začátku a 8 týdnů. Základní linie je definována jako čas na výchozí odběr krve a/nebo leukaferéze a jednotlivci budou zahájeni na EFV 600 mg PO jednou denně po dobu 8 týdnů, aby začali další den. Účastníci budou identifikováni před základní návštěvou asi 4 týdny před základní linií, aby zajistili způsobilost. Máme v úmyslu zapsat 14 účastníků. Při návštěvě -4 týdnů (návštěva 1) bude studijní lékárník zhodnotit všechny doprovodné léky, dodržování předpisů, přezkoumat současný umělecký režim a navrhovaný umělecký režim s přidáním plné dávky EFV. Potenciální vedlejší účinek/toxicita - zjevně známé, ale reverzibilní neurologické účinky EFV - a jejich řízení bude diskutováno. V tomto časovém bodě bude získána virová zátěž pro potvrzení přetrvávající virémie nízké úrovně. Na začátku, (čas 0), pokud předchozí VL ukázala LLV, budou provedeny následující testy: HIV virová zátěž, QVOA, IPDA pro měření HIV nádrže, HIV RNA spojená s buňkami, plazma a markery T buněk imunitní aktivace, HIV specifické pro HIV, HIV specifické pro HIV, HIV specifické Imunita T buněk. Na začátku namísto odběru krve 70 ccm budou subjekty nabízeny k účasti na leukaferéze (volitelné), která poskytne větší čísla buněk k lepšímu výslechu nádrže HIV. Následující návštěvy 1 týden (V3), 3 týdny (V4), 5 týdnů (V5) a 7 týdnů (V6) budou následovat plazmatickou virovou zátěž a nádrže pomocí IPDA. Po 8 týdnech (V7) budou účastníci přestat EFV a virové zátěž, HIV nádrže, plazmatické a buněčné markery imunitní aktivace a imunity T buněk. Subjektům bude nabízena leukaferéza (volitelná), aby lépe charakterizovaly imunitní studie HIV a imunitních studií T buněk. Následné návštěvy měří plazmatická virová zátěž a nádrže v týdnu 9 (V8), 12 (V9) a 16 (V10). Při všech návštěvách budou účastníci přezkoumáni z hlediska potenciálních vedlejších účinků/toxicity včetně neuropsychiatrických symptomů a adherence a přezkoumání CRF. Potenciální vedlejší účinky budou zkoumány odběhnutím krve a odpovídajícím způsobem léčeny (např. Vyrážka, poskytnout antihistaminika, HC krém, +/- přerušit EFV, pokud je střední až těžká AE studiem lékařem (C. Kovacs). Všechny návštěvy se budou konat +/- 3 dny uvedeného časového bodu.

Vzorkování. Krev bude shromažďována pomocí zkumavek SST/EDTA/ACD pro různé testy. Při začátku a 8 týdnů, pokud subjekty podstoupí leukaferézu, bude v těchto časových bodech místo toho provedena pouze jedna 5 ml trubice krve pro virovou zátěž. Objemy krve jsou následující: Screeningová návštěva (25 ml), 75 ml při všech ostatních návštěvách (pokud to leukaferéze není provedena). Při každé návštěvě je hodnocení prováděno vedlejší účinky EFV, budou hodnoceny nové nebo pokračující léky, včetně režimu vozíku a adherence. Pro zajištění imunitní bezpečnosti se při screeningu provádějí počty CD4, WK 8 a 16.

Statistická analýza:

Statistické analýzy budou prováděny s podporou biostatistiky Johns Hopkins CFAR a jádra epidemiologie (BEM) a CTN; Rozdíly mezi časovými body v celé kohortě budou porovnány pomocí testu Wilcoxon Rank-Sum nebo Kruskal-Wallis. V rámci účastníků (log-transformované) HIV-1 RNA, DNA, změny mezi časovými body, budou odhadnuty u modelů lineárních regresních specifických pro účastníka a porovnány s nulovou hypotézou bez změny pomocí testu Wilcoxon Sign-Rank. Stejný přístup bude aplikován na rozpustné markery imunitní aktivace a zánětu.

Očekávané výsledky a důsledky, že nádrž HIV nedokáže přirozeně rozkládat nebo používat vozík. Navrhovaný výzkum se bude zabývat translačními aspekty perzistence HIV s okamžitými důsledky pro klinickou péči. Využití aktivace inflammasomu Card8 s EFV má potenciál eliminovat transkripčně aktivní provirus GAG/Pol jako příčinu LLV, která má v současné době omezené terapeutické možnosti, vzhledem k tomu, že současná antiretrovirová látka neovlivňuje expresi viru. Snížení LLV by mohlo osvobodit klinické lékaře a pacienty z zavádějících a potenciálně škodlivých pokusů o přepínání neopodstatněných režimů, úzkost selhání léku nebo osobní rizika přenosu na sexuální partnery. Potenciál snížit významnou a léčitelnou příčinu nově identifikovaného nepříznivého zánětu a chronické imunitní aktivace má hluboké důsledky pro zlepšení incidence a výsledků doprovodných onemocnění. Pokud se toto úsilí postupuje s disciplínou, mohlo by se poprvé použít redukci zánětlivých markerů v Cascade Clinical Care Clinical Care. Vzhledem k tomu, že většina nádrže odráží rozšíření infikovaných klonů, může být taková strategie schopna je odstranit. Nedávno studie CURE zažily účast váhavost od komunit, které se zdráhaly souhlasit s přerušením vozíku ve výzkumu. Tento návrh by mohl poskytnout zajištění bezpečnosti dobrovolníkům a zároveň uspokojit požadavky vyšetřovatelů pro spoléhání se na ověřitelné signály, jako jsou IPDA a VQOA nebo snížení LLV. Cílem řešení terapeutik jsou dvakrát: 1) podstatně snížit rezervoár replikačních kompetentních virů; a 2) snížit probíhající antigenní stimulaci z klonů latentně infikovaných buněk obsahujících transkripčně aktivní, ale vadné viry, které by mohly tyto jedince převést na nezjistitelné, by bylo prospěšné.

Nábor bude pro studii přijímán celkem 26 účastníků.