Der T -Zell -Aktivator des Zelltötens ("Tack") It on "Study ("TACKITON)

Hintergrund:

Kombinierte antiretrovirale Therapien (CART) haben HIV für viele PLWH in einen chronisch -fähigen Gesundheitszustand verwandelt.

Trotz eines starken Karrens hat die überwiegende Mehrheit der PLWH -Reste an Virämie, die unter der Grenze der Nachweis von aktuellen klinischen Assays von 20 Exemplaren/ml -Plasma bleibt, aber häufig durch hochempfindliche Assays festgestellt werden kann. Eine Reihe von Studien berichtet 9% und 10%. In Ontario hatten in den letzten zwei Jahren 11,9% der PLWH zwei oder mehr aufeinanderfolgende Werte für Virämie mit niedriger Ebene (LLV) (persönliche Kommunikation Vanessa Tran, Ontario Public Health Labs). Obwohl eine niedrige Virämie im konformen CART nicht das Behandlungsversagen widerspiegelt, gibt es Hinweise darauf, dass es möglicherweise nicht klinisch unbedeutend ist. Jüngste Studien mit großen Kohorten sagen eine 2-3-fache Chance auf virologisches Versagen voraus und erhöhten alle Ursachen für Mortalität und Nicht-AIDS-Ereignisse mit LLV. White ET. al. zeigten, dass nachweisbarer LLV auf die Ausdehnung von Klonen zurückzuführen ist, die sowohl defektes als auch replikationskompetentes Virus enthalten, die sich wahrscheinlich als Reaktion auf Antigene proliferieren. Daher haben Personen mit LLV wahrscheinlich sehr große Populationen von vermehrten Klonen in ihren Stauseen. Ob dieses höhere Maß an täglicher Virusproduktion Entzündungen und Immunaktivierung aufrechterhalten, ist nur schlecht bekannt. Darüber hinaus ist die klinische kurzfristige Bedeutung dieser Befunde unklar, diese Personen stellen jedoch eine einzigartige Gruppe dar, um weiterheilige Strategien zu untersuchen, die die Reservoirgröße verringern.

Jüngste Beobachtungen deuten darauf hin, dass einige NNRTIs (insbesondere Efavirenz) um diese Virus-produzierenden Zellen abzutöten könnten. Das HIV-Protease-Enzym ist Teil eines größeren Gag-Pol-Protein-Vorläufers, der nach HIV-Transkription als inaktives Monomer im Zytoplasma infizierter Zellen hergestellt wird. Damit die HIV -Protease aktiv ist, muss sie dimerisieren, und diese Dimerisierung erfolgt nur innerhalb des Viruspartikels, das von der Zelle abgebogen ist, was zu reifen, infektiösen Viruspartikeln führt. Es wurde gezeigt, dass einige nnrtis wie efavirenz vor dem Knospendimerisierung und vorzeitige Protease-Aktivierung im Cytosol intrazellulären Gag-Pole-Dimerisierung und vorzeitige Protease-Aktivierung induzieren können Zellen durch Pyroptose produzieren. Dieser Prozess tritt auf, wenn die Verbindung an die RT-Domäne des Gag-Pol-Polyproteins bindet, was zu einer Konformationsänderung führt, die seine Dimerisierung innerhalb des Zellzytoplasass und nicht im Viruspartikel und die daraus resultierende autokatalytische Aktivität des Proteaseenzyms induziert. Somit kann EFV eine Gag-Pol-Dimerisierung im Zytoplasma induzieren, die die CARD8-Sensing und die Intra-cytoplasmatische Inflammasom-Aktivierung von Inflammasom-Aktivierung durch das Vorhandensein von Proteaseinhibitoren blockieren (z. Indinavir). Vorläufige Daten aus dem Simonetti-Labor (einer der Co-Investigatoren) unter Verwendung von CD4+ T-Zellen von Personen auf Wagen, die nicht suppressive, aber niedrige Virämie auftreten, haben gezeigt, dass mikromolare Konzentrationen von Efavirenz (EFV) die Virusproduktion bei starkem t signifikant reduzieren können Die Zellaktivierung durch CD3/CD28 -Stimulation aufgrund der CARD8 -Erfindung der HIV -Proteaseaktivität. Mit anderen Worten, diese von Viren infizierten Zellen wurden in Gegenwart von EFV während der Immunaktivierung getötet. In Kontrollversuche ist die Wirkung von EFV mit der Zugabe des Protease -Inhibitors Lopinavir vollständig aufgehoben. Die Experimente wurden mit EFV bei 5UM durchgeführt, das in einem großen Teil von Personen mit der empfohlenen vollständigen Dosis (600 mg q.d.) in Plasma erreicht werden kann. Frühere Pharmakokinetikstudien zeigten, dass EFV die Plasmakonzentration über dem für seinen Abtötungseffekt (1UM) erforderlichen EC50 erreicht und in Geweben noch höhere Konzentrationen erreicht. Jüngste Arbeiten berichteten über nnrti-ähnliche Moleküle mit vergleichbarer antiviraler Aktivität mit EFV, aber signifikant höhere Wirksamkeit bei der Induzierung von Dimerisierung und CARD8-vermittelter Abtötung. Solche Verbindungen befinden sich jedoch noch in den frühen Stadien vorklinischer Untersuchungen, und ihr pharmakokinetisches Profil und ihre Aktivität in vivo wurden nicht untersucht. Dieser Effekt des Abtötens von HIV -infizierten Zellen durch Pyroptose nach CARD8 -Erfindung wurde als Tack (gezielter Aktivator des Zelltötens) bezeichnet. EFV stellt das beste Tack-Molekül dar, um zu testen, ob das CARD8-Inflammasom als therapeutische Option bei Menschen mit HIV auf ART genutzt werden kann. In der vorgeschlagenen Studie wird die Intensivierung von CART mit EFV zur induzierten CARD8 -Erfindung und zur Nicht -Blockierung der viralen Replikation verwendet.

Hypothese:

Für PLWH, die sich an einen Wagen haften, ohne dokumentierte Resistenz gegen ihren aktuellen Karren oder EFV und die anhaltende nicht suppressible Virämie (NSV) dokumentiert haben ], reduziert die HIV-1-RNA-Viruslast von Plasma.

Die primäre Endpunkt -Plasma -HIV -Virämie wird nach 8 Wochen EFV zu Studienbeginn (Besuch 2) verglichen. (Besuchen Sie 7) Sekundäre Endpunkte

HIV -Virusreservoirs:

QVOA (Replikationskompetenz-Virus-Auswachsen-Assay) zu Studienbeginn und nach 2 Monaten EFV-intakter proviraler DNA-Assay zu Studienbeginn während und nach 2 Monaten EFV-Zell-assoziiert

Immunaktivierung:

Marker für die Immunaktivierung und den Zelltod in Plasma (Grundlinie und 2 Monate):

CRP, LDH, IL-1 Beta, TNF, IL-6, Gadermin D, Th1- und Th2-Zytokine und Chemokine-Marker der Aktivierung von T-Zellen (CD4 und CD8), die zu Studienbeginn und 2 Monate über Durchflusszytometrie gemessen wurden.

T -Zelle Resposnes zu HIV -Proteinen zu Studienbeginn und 2 Monaten.

Studiendesign:

Dies ist eine prospektive, nicht randomisierte Studie, in der jedes eingeschriebene Subjekt vor und nach der Einführung von zwei Monaten Efavirenz als Tack-Molekül als ihre eigene Kontrolle fungieren wird. Die Studie befindet sich an einem einzigen Standort in der Maple Leaf Clinic in Toronto, dem Unity Health St. Michael's Hospital und der University of Toronto. Nach der Einschreibung beträgt die Untersuchungsdauer 20 Wochen. Alle Probanden werden in die Maple Leaf Clinic in Toronto rekrutiert. In der Maple Leaf Clinic treten Blutstraßen auf. Leukaphhereseverfahren zur intensiveren Untersuchung von Virenreservoirs und der Immunität sind optional und treten zu Studienbeginn und 8 Wochen auf. Die Grundlinie ist als Zeit für Basis -Blut -Unentschieden und/oder Leukaphherese definiert, und Einzelpersonen werden einmal täglich 8 Wochen lang mit EFV 600 mg PO begonnen, um am nächsten Tag zu beginnen. Die Teilnehmer werden vor dem Basisbesuch etwa - 4 Wochen vor dem Ausgangswert identifiziert, um die Berechtigung zu gewährleisten. Wir beabsichtigen, 14 Teilnehmer einzuschreiben. Beim Besuch -4 Wochen (Besuch 1) wird der Studienapotheker alle begleitenden Medikamente, die Einhaltung der Aktualisierung und das vorgeschlagene Kunstschema untersuchen, um die vollständige Dosis -EFV hinzuzufügen. Potentielle Nebenwirkung/Toxizitäten - vorgesichts der bekannten, aber reversiblen neurologischen Effekte von EFV - und das Management von ihnen werden diskutiert. Zu diesem Zeitpunkt wird eine Viruslast erhalten, um eine anhaltende Virämie mit niedriger Ebene zu bestätigen. Zu Studienbeginn (Zeit 0), wenn vorherige VL LLV zeigte, werden folgende Assays durchgeführt: HIV-Viruslast, QVOA, IPDA für HIV-Reservoirmessungen, zellassoziierte HIV-RNA, Plasma und T-Zell-Marker für die Immunaktivierung, HIV-Spezifik T -Zell -Immunität. Zu Studienbeginn anstelle einer 70 -cm3 -Blutentnahme werden Probanden angeboten, um an Leukaphherese (optional) teilzunehmen, die größere Zellenzahlen bereitstellen, um das HIV -Reservoir besser zu befragen. Nachfolgende Besuche in 1 Woche (V3), 3 Wochen (V4), 5 Wochen (V5) und 7 Wochen (V6) folgen der Plasma -Viruslast und Reservoirs durch IPDA. Nach 8 Wochen (V7) werden die Teilnehmer EFV und Viruslast, HIV -Reservoire, Plasma- und Zellmarker für die Immunaktivierung und die T -Zell -Immunität einstellen. Probanden werden Leukaphherese (optional) angeboten, um den HIV -Reservoir- und T -Zell -Immunstudien besser zu charakterisieren. Nachfolgerbesuchen messen Plasma -Viruslasten und Reservoirs in den Wochen 9 (V8), 12 (V9) und 16 (V10). Bei allen Besuchen werden die Teilnehmer auf potenzielle Nebenwirkungen/Toxizitäten wie neuropsychiatrische Symptome und die Einhaltung von CRF überprüft. Mögliche Nebenwirkungen werden mit Blutstraßen untersucht und entsprechend behandelt (z. B. Ausschlag, die Antihistaminika, HC-Creme, +/- EFV-Deaktivieren Sie durch Studienarzt (C. Kovacs). Alle Besuche finden +/- 3 Tage des angegebenen Zeitpunkts statt.

Probenahme. Das Blut wird mit SST/EDTA/ACD -Röhrchen für die verschiedenen Assays gesammelt. Zu Studienbeginn und 8 Wochen, wenn die Probanden Leukaphherese unterzogen werden, werden stattdessen nur eine 5 -ml -Rohrblutrohr für die Viruslast zu diesen Zeitpunkten durchgeführt. Die Blutmengen sind wie folgt: Screening -Besuch (25 ml), 75 ml bei allen anderen Besuchen (falls die Leukapherese nicht ausgeführt). Bei jedem Besuch erfolgt die Bewertung von EFV -Nebenwirkungen, neuen oder anhaltenden Medikamenten, einschließlich des CART -Regimes, und die Einhaltung wird bewertet. Um die Immunsicherheit zu gewährleisten, werden die CD4 -Zählungen bei Screening, WK 8 und 16, durchgeführt.

Statistische Analyse:

Statistische Analysen werden mit Unterstützung des Johns Hopkins CFAR Biostatistics and Epidemiology Core (BEM) und des CTN durchgeführt. Unterschiede zwischen den Zeitpunkten in der gesamten Kohorte werden unter Verwendung des Wilcoxon-Rangsummens oder des Kruskal-Wallis-Tests verglichen. Die HIV-1-RNA im Teilnehmer (logarithmisch transformierte) DNA, Änderungen zwischen den Zeitpunkten werden mit Teilnehmernspezifischen linearen Regressionsmodellen geschätzt und mit der Nullhypothese ohne Änderung unter Verwendung des Wilcoxon-Signed-Rank-Tests verglichen. Der gleiche Ansatz wird auf lösliche Marker für die Immunaktivierung und Entzündung angewendet.

Erwartete Ergebnisse und Implikationen Das HIV -Reservoir verfällt nicht auf natürliche Weise oder benutzt CART. Die vorgeschlagene Forschung wird sich mit translationalen Aspekten der HIV -Persistenz mit sofortigen Auswirkungen auf die klinische Versorgung befassen. Das Nieren von CARD8 -Entzündungsaktivierung mit EFV kann GAG/POL transkriptionell aktive Proviren als Ursache für LLV beseitigen, die derzeit nur begrenzte therapeutische Optionen aufweist, da derzeitige antiretrovirale Wirkstoffe die Virusxpression nicht beeinflussen. Durch die Reduzierung von LLV können Kliniker und Patienten von fehlgeleiteten und potenziell schädlichen Versuchen, ungerechtfertigte Regimewechsel, Angst vor dem Versagen von Arzneimitteln oder persönlichen Risiken von Übertragungen an Sexualpartner zu befreien. Das Potenzial, eine signifikante und behandelbare Ursache für neu identifizierte nachteilige Entzündungen und die chronische Immunaktivierung zu senken, hat tiefgreifende Auswirkungen auf die Verbesserung der Inzidenz und die Ergebnisse vermeidbarer gleichzeitiger Krankheiten. Wenn diese Bemühungen mit Disziplin voranschreiten, könnte in der klinischen Cascade der HIV -Behandlung zum ersten Mal eine Entzündungsmarkerreduzierung angewendet werden. Angesichts der Tatsache, dass ein Großteil des Reservoirs die Erweiterung infizierter Klone widerspiegelt, kann eine solche Strategie möglicherweise beseitigt werden. In jüngster Zeit haben Cure -Studien die Beteiligung von Gemeinden erlebt, die es zögern, sich den Unterbrechungen der Forschung zuzustimmen, die sich mit den Unterbrechungen der Karren zuzustimmen. Dieses Design könnte Freiwilligen Sicherheitssicherung bieten und gleichzeitig die Ermittleranforderungen für die Abhängigkeit von überprüfbaren Signalen wie IPDA und VQOA oder Reduzierung von LLV erfüllen. Das Ziel der Tack -Therapeutika ist zwei Falten: 1) das Reservoir der replikationskompetenden Viren erheblich zu verringern; und 2) die kontinuierliche Antigenstimulation von Klonen von latent infizierten Zellen zu verringern, die transkriptionell aktive, aber defekte Vireninterventionen enthalten, die diese Personen in nicht nachweisbare Umstellung konvertieren könnten, wären vorteilhaft.

Rekrutierung insgesamt 26 Teilnehmer werden für die Studie eingestellt.