세포 사멸의 T 세포 활성화 제 ( "압정"). ("TACKITON)

배경:

조합 항 레트로 바이러스 요법 (CART)은 HIV를 많은 PLWH의 만성 관리 가능한 건강 상태로 변형시켰다.

강력한 카트에도 불구하고, PLWH의 대다수는 20 카피/mL 혈장의 현재 임상 분석의 검출 한계보다 낮지 만 종종 매우 민감한 분석법에 의해 검출 될 수있는 바이러스 혈증의 잔류 잔기를 가지고있다. 다수의 연구에 따르면 PLWH는 약물 내성 돌연변이가없는 CART를 준수하는 것으로보고된다 9% 및 10%. 온타리오에서는 지난 2 년 동안 PLWH의 11.9%가 저수준 Viremia (LLV) (개인 커뮤니케이션 Vanessa Tran, Ontario Public Health Labs)의 2 개 이상의 연속 값을 가졌습니다. 준수 CART에서 낮은 수준의 바이러스 혈증은 치료 실패를 반영하지 않는 것으로 느껴지지만, 임상 적으로 중요하지 않을 수 있다는 증거가 있습니다. 대형 코호트에 대한 최근의 연구는 바이러스 학적 실패의 2-3 배 확률을 예측하고 LLV로 모든 원인 사망률과 비 AIDS 사건을 증가시켰다. 흰색 ET. 알. 검출 가능한 LLV는 항원에 반응하여 확산되는 결함 및 복제 유능한 바이러스를 함유하는 클론의 확장에 기인한다는 것을 보여 주었다. 따라서 LLV를 가진 개인은 저수지에 매우 많은 증식 클론을 가지고있을 것입니다. 이 더 높은 수준의 일일 바이러스 생산이 염증을 유지하고 면역 활성화를 유지하는지 여부는 잘 이해되지 않습니다. 더욱이, 이러한 발견의 임상 단기 중요성은 불분명하지만, 이들 개인은 저수지 크기를 감소시키는 추가 치료 전략을 연구하기위한 고유 한 그룹을 나타냅니다.

최근의 관찰에 따르면, 일부 NNRTI (특히 efavirenz)가 이러한 바이러스 생성 세포를 죽이기 위해 용도 변경 될 수 있음을 시사합니다. HIV 프로테아제 효소는 HIV 전사 후 감염된 세포의 세포질에서 비활성 단량체로서 생성되는 더 큰 GAG-Pol 단백질 전구체의 일부이다. HIV 프로테아제가 활성화되기 위해서는 이량 체화되어야하며,이 이량 체화는 세포에서 벗어난 바이러스 입자 내에서만 발생하여 성숙하고 감염성 바이러스 입자를 초래합니다. efavirenz와 같은 일부 NNRTI는 신진 전에 세포 내 GAG-POL 이량 체화 및 조기 프로테아제 활성화를 유도 할 수 있으며, 이는 CARD8 (카스파 제 모집 도메인 단백질 8) 염증을 유발하여 HIV-1- pyroptosis를 통해 세포를 생산합니다. 이 과정은 화합물이 GAG-Pol 폴리 단백질의 RT 도메인에 결합하여 바이러스 입자보다는 세포 세포질 내에서 이량 체화를 유도하는 입체 형태 변화 및 프로테아제 효소의자가 촉매 활성을 유도하는 형태 변화를 초래할 때 발생한다. 따라서 EFV는 세포질에서 GAG-Pol 이량 체화를 유도 할 수 있으며, 이는 Card8 감지 및 염증성 활성화 내-세포질 내 프로테아제 -CARD8 활성화를 트리거한다 (EG. 인디 나비르). 비 억제력이지만 낮은 수준의 바이러스 혈증을 경험하는 카트의 사람들로부터 CD4+ T 세포를 사용하여 Simonetti Lab (공동 조사자 중 하나)의 예비 데이터는 마이크로 몰 농도의 efavirenz (EFV)가 강한 T에서 바이러스 생산을 크게 감소시킬 수 있음을 보여주었습니다. HIV 프로테아제 활성의 Card8 감지로 인한 CD3/CD28 자극에 의한 세포 활성화. 다시 말해, 이들 바이러스 감염된 세포는 면역 활성화 동안 EFV의 존재 하에서 사멸되었다. 제어 실험에서, 프로테아제 억제제 Lopinavir의 첨가와 함께, EFV의 효과가 완전히 폐지된다. 5UM에서 EFV로 실험을 수행하였으며, 이는 권장 된 전체 용량 (600mg q.d.)을 가진 개인의 많은 부분에서 혈장에서 도달 할 수 있습니다. 이전의 약동학 연구에 따르면 EFV는 사멸 효과 (1UM)에 필요한 EC50 이상의 혈장 농도에 도달하고 조직에서 훨씬 더 높은 농도에 도달 함을 보여주었습니다. 최근의 연구는 EFV에 비해 항 바이러스 활성을 갖는 NNRTI- 유사 분자를보고했지만 이량 체화 및 Card8- 매개 사멸을 유도하는 데 유의하게 더 높은 효능이 있다고보고했다. 그러나, 이러한 화합물은 여전히 ​​전임상 조사의 초기 단계에 있으며 생체 내에서의 약동학 적 프로파일 및 활성은 탐구되지 않았다. Card8 감지 후 열로 혈관증에 의해 HIV 감염 세포를 사멸시키는이 효과는 Tack이라고 불렀다 (세포 사멸의 표적 활성화 제). EFV는 ART EFV에 HIV를 앓고있는 사람들의 Card8-Inflammasome이 치료 옵션으로 활용 될 수 있는지 테스트하기위한 최상의 압정 분자를 나타냅니다. 제안 된 연구에서, EFV를 사용한 CART 강화는 Card8 감지를 유도하는데 사용되며 바이러스 복제를 차단하지 않는다.

가설:

현재 카트 또는 EFV에 문서화 된 내성이없는 카트를 준수하는 PLWH의 경우, efavirenz의 단기 첨가 (NSV)를 문서화 한 상태에서 문서화 된 내성 비 억제 바이러스 혈 (NSV)을 기록한 PLWH의 경우, 세포 사멸의 표적화 된 활성화 제. ], 혈장 HIV-1 RNA 바이러스 부하를 줄입니다.

1 차 종점 혈장 HIV 바이러스 혈증은 EFV의 8 주 후 기준선 (방문 2)에서 비교 될 것이다. (방문 7) 보조 엔드 포인트

HIV 바이러스 저수지 :

기준선 및 2 개월의 EFV에서 2 개월 동안 및 2 개월의 EFV 세포 관련 HIV RNA, 기준선에서 및 2 개월 동안 EFV의 2 개월 후 및 2 개월 후 QVOA (복제 유능한 바이러스 성장 분석)

면역 활성화 :

혈장에서 면역 활성화 및 세포 사멸의 마커 (기준선 및 2 개월) :

CRP, LDH, IL-1 베타, TNF, IL-6, Gasdermin D, Th1 및 Th2 사이토 카인 및 T 세포 (CD4 및 CD8) 활성화의 유세포 분석을 통해 2 개월의 T 세포 (CD4 및 CD8) 활성화의 케모카인 마커.

기준선 및 2 개월에서 T 세포 resposnes.

학습 설계 :

이것은 각각 등록 된 각 피험자가 압정 분자로서 2 개월의 Efavirenz를 도입하기 전과 후에 자신의 통제로 작용할 예비의 전향 적 비 랜덤 화 연구이다. 이 연구는 단일 사이트, 토론토의 Maple Leaf Clinic, Unity Health St. Michael 's Hospital 및 University of Toronto에 있습니다. 등록 후 연구 기간은 20 주입니다. 모든 피험자는 토론토의 메이플 리프 클리닉에 모집됩니다. 메이플 리프 클리닉에서 혈액을 뽑을 수 있습니다. 보다 집중적으로 바이러스 저수지 및 면역을 연구하기위한 백혈구 절차는 선택 사항이 될 것이며 기준선 및 8 주에서 발생합니다. 기준선은 기준 혈액을 끌어 당기는 시간으로 정의되며/또는 백혈구 생성은 8 주 동안 매일 한 번 EFV 600 mg PO에서 시작하여 다음날 시작됩니다. 참가자는 자격을 보장하기 위해 기준선 전 약 4 주 전 기준선 방문 전에 확인됩니다. 우리는 14 명의 참가자를 등록하려고합니다. -4 주 방문 (방문 1)에서 연구 약사는 모든 수반되는 약물, 준수, 현재 ART 요법을 검토하고 제안 된 ART 요법을 검토하여 전체 용량 EFV를 추가 할 것입니다. 잠재적 인 부작용/독성 - 특히 EFV의 알려 지지만 가역적 인 신경 학적 효과와 이들의 관리가 논의 될 것이다. 이 시점에서, 지속적인 낮은 수준의 바이러스 혈증을 확인하기 위해 바이러스 부하가 얻어 질 것이다. 기준선에서, (시간 0), 이전 VL이 LLV를 보여 주면 HIV 바이러스 부하, QVOA, HIV 저장소 측정을위한 IPDA, 세포 관련 HIV RNA, 혈장 및 면역 활성화의 T 세포 마커, HIV 특이제 T 세포 면역. 70cc 혈액 추첨 대신 기준선에서, 대상체는 HIV 저수지를 더 잘 조사하기 위해 더 큰 세포 수를 제공 할 수있는 백혈구 (선택 사항)에 참여하도록 제안 될 것이다. 1 주 (v3), 3 주 (v4), 5 주 (v5) 및 7 주 (v6)에 후속 방문은 IPDA에 의해 혈장 바이러스 부하 및 저수지를 따릅니다. 8 주 (v7)에, 참가자는 EFV를 중단하고 바이러스 부하, HIV 저수지, 혈장 및 면역 활성화 및 T 세포 면역이 분석 될 것이다. HIV 저수지 및 T 세포 면역 연구를 더 잘 특성화하기 위해 대상체에게 백혈구 (선택 사항)가 제공 될 것이다. 후속 방문은 9 주 (V8), 12 (V9) 및 16 (V10)에 혈장 바이러스 부하 및 저수지를 측정합니다. 모든 방문에서 참가자는 신경 정신과 증상, 준수 및 CRF를 포함한 잠재적 부작용/독성에 대해 검토됩니다. 잠재적 인 부작용은 혈액 무승부로 조사하고 그에 따라 처리 될 것입니다 (예를 들어, 발진, 항히스타민 제, HC 크림, +/- 연구 의사에 의해 중등도에서 중증 AE를 중단합니다 (C. Kovacs). 모든 방문은 표시된 시점의 +/- 3 일이됩니다.

견본 추출. 다양한 분석법에 대해 SST/EDTA/ACD 튜브를 사용하여 혈액을 수집합니다. 기준선 및 8 주에서, 피험자가 백혈구 생성을 겪는 경우, 해당 시점에서 바이러스 부하를위한 5ml의 혈액 튜브가 하나만 수행됩니다. 혈액량은 다음과 같습니다 : 스크리닝 방문 (25 ml), 다른 모든 방문시 75ml (백혈구 생체가 완료되지 않은 경우). 방문 할 때마다 EFV 부작용, CART 요법을 포함한 신규 또는 지속적인 약물에 대한 평가는 평가됩니다. 면역 안전을 보장하기 위해, CD4 수는 스크리닝, wk 8 및 16에서 수행된다.

통계 분석 :

통계 분석은 Johns Hopkins CFAR Biostatistics 및 BEM (BEM) 및 CTN의 지원으로 수행 될 것입니다. 전체 코호트의 시점 간의 차이는 Wilcoxon Rank-Sum 또는 Kruskal-Wallis 테스트를 사용하여 비교됩니다. 참가자 내 (로그 변환) HIV-1 RNA, DNA, 시점 간의 변화는 참가자-특이 적 선형 회귀 모델로 추정되며 Wilcoxon 서명 순위 테스트를 사용한 변화가없는 귀무 가설과 비교 될 것이다. 면역 활성화 및 염증의 가용성 마커에 동일한 접근법이 적용될 것이다.

예상 결과 및 시사점 HIV 저수지는 자연스럽게 부패하거나 카트를 사용하지 않습니다. 제안 된 연구는 HIV 지속성의 번역 측면을 임상 치료에 즉각적인 영향으로 다룰 것입니다. EFV를 사용한 CARD8 INFLAMMASOME 활성화는 LLV의 원인으로 GAG/POL 전사 활성 프로 바이러스를 제거 할 가능성이 있으며, 이는 현재 항 레트로 바이러스 제제가 바이러스 발현에 영향을 미치지 않기 때문에 치료 옵션이 제한되어 있습니다. LLV를 줄이면 부당한 요법 전환, 약물 실패의 불안 또는 성 파트너에 대한 개인의 개인적 위험에 대한 잘못 인도되고 잠재적으로 유해한 시도로부터 임상의와 환자를 자유롭게 할 수 있습니다. 새로 확인 된 부작용 염증 및 만성 면역 활성화의 중요하고 치료 가능한 원인을 낮추는 잠재력은 예방 가능한 동반 질환의 발생률 및 결과를 개선하는 데 중대한 영향을 미칩니다. 이러한 노력이 징계로 진행되면 HIV 치료 임상 치료 캐스케이드에서 염증 마커 감소가 사용될 수 있습니다. 저수지의 대부분이 감염된 클론의 확장을 반영한다는 점을 감안할 때, 그러한 전략은 이것을 제거 할 수 있습니다. 최근 치료 연구는 연구 중단에 동의하기를 꺼려하는 지역 사회의 참여 주저를 경험했습니다. 이 디자인은 자원 봉사자에게 안전 보증을 제공하면서 IPDA 및 VQOA와 같은 검증 가능한 신호에 대한 의존에 대한 조사자 요구 사항을 충족 시키거나 LLV 감소를 제공 할 수 있습니다. 압정 치료법의 목표는 2 배입니다. 1) 복제 유능한 바이러스의 저수지를 실질적으로 줄이기 위해; 및 2) 전사적으로 활성이지만 결함이있는 바이러스 중재를 함유하는 잠재적으로 감염된 세포의 클론으로부터 진행중인 항원 성 자극을 감소시키는 것은 이들 개체를 감지 할 수없는 것으로 전환 할 수있는 중재가 유리할 것이다.

채용 총 26 명의 참가자가 연구를 위해 채용됩니다.