T -soluaktivaattori solujen tappamisesta ("tarttu") IT "-tutkimuksessa ("TACKITON)

Tausta:

Yhdistelmä antiretrovirushoitoa (CART) ovat muuttaneet HIV: n krooniseksi hallittaviksi terveydentilaan monille PLWH: lle.

Voimasta kärrystä huolimatta valtaosassa PLWH: n viremian jäännös on jäljellä 20 kopion/ml plasman nykyisten kliinisten määritysten havaitsemisraja, mutta se voidaan usein havaita erittäin herkillä määrityksillä. Useat tutkimukset raportoivat, että PLWH: n, joka on korin mukainen, ilman lääkeresistenssi mutaatioita, on jatkuvaa havaittavissa olevaa matalan tason viremiaa (jota kutsutaan myös nimellä tukahduttamaton viremia, NSV), yleensä 20–400 kopiota/ml, taajuus 1: stä 250: een- 9% ja 10%. Ontariossa viimeisen kahden vuoden aikana 11,9 prosentilla PLWH: sta oli kaksi tai useampia peräkkäisiä arvoja alhaisen tason viremiasta (LLV) (henkilökohtainen viestintä Vanessa Tran, Ontarion kansanterveyslaboratoriot). Vaikka alhaisen tason viremia yhteensopivassa kärryssä ei tunneta heijastavan hoidon epäonnistumista, on todisteita siitä, että se ei välttämättä ole kliinisesti merkityksetöntä. Viimeaikaiset suurten kohorttien tutkimukset ennustavat 2-3-kertaisen virologisen vajaatoiminnan mahdollisuuden ja lisääntyivät kaikki aiheuttavat kuolleisuus- ja ei-apu-tapahtumia LLV: llä. Valkoinen et. al. osoittivat, että havaittavissa oleva LLV johtuu sekä viallisesta että replikaation pätevästä viruksesta sisältävien kloonien laajenemisesta, jotka lisääntyvät todennäköisesti vastauksena antigeeneille. Siten henkilöillä, joilla on LLV, on todennäköisesti erittäin suuria populaatioita lisääntyneitä klooneja säiliöissään. Ymmärretäänkö tämä korkeampi päivittäisen viruksen tuotannon taso tulehdusta ja immuuniaktivaatiota. Lisäksi näiden havaintojen kliininen lyhytaikainen merkitys on epäselvä, mutta nämä yksilöt edustavat ainutlaatuista ryhmää jatko-opinto-strategioita, jotka pienentävät säiliön kokoa.

Viimeaikaiset havainnot viittaavat siihen, että jotkut NNRTI: t (erityisesti Efavirenz) voitaisiin asettaa uudelleen näiden viruksia tuottavien solujen tappamiseksi. HIV-proteaasientsyymi on osa suurempaa GAG-POL-proteiiniprekursoria, joka tuotetaan inaktiivisena monomeerinä tartunnan saaneiden solujen sytoplasmassa HIV-transkription jälkeen. Jotta HIV -proteaasi olisi aktiivinen, sen on dimeroitu, ja tämä dimeroituminen tapahtuu vain viruspartikkelissa, joka on budjeinut solusta, mikä johtaa kypsiin, tarttuviin viruspartikkeleihin. On osoitettu, että jotkut NNRTI: t, kuten efavirentsit, voivat indusoida solunsisäisen GAG-pol-dimerisaation ja ennenaikaisen proteaasi-aktivoinnin sytosolissa ennen orastamista, mikä voi laukaista Card8: n (kaspaasin rekrytointi domeeniproteiini 8) -tulehduksen, johtaen HIV-1--1- Solujen tuottaminen pyroptoosin kautta. Tämä prosessi tapahtuu, kun yhdiste sitoutuu GAG-POL-polyproteiinin RT-domeeniin, mikä johtaa konformaatiomuutokseen, joka indusoi sen dimerisaatiota solusytoplasmassa eikä viruspartikkelissa ja siitä seuraavaa proteaasentsyymin autokatalyyttistä aktiivisuutta. Siten EFV voi indusoida GAG-pol-dimerisaation sytoplasmassa, joka laukaisee Card8-tunnistuksen ja tulehduksen aktivoinnin sytoplasmisen proteaasi-Card8-aktivaation estävät proteaasi-inhibiittorien läsnäolon (esim. indinaviiri). Alustavat tiedot Simonetti-laboratoriosta (yksi tutkijoista) käyttämällä CD4+ T-soluja käyttämällä kärryistä, jotka kokevat ei-tukahduttavia, mutta matalan tason viremiaa, ovat osoittaneet, että efavirentsin (EFV) mikromolaariset pitoisuudet voivat vähentää viruksen tuotantoa voimakkaasti T Solujen aktivaatio CD3/CD28 -stimulaatiolla johtuen HIV -proteaasi -aktiivisuuden Card8 -tunnistuksesta. Toisin sanoen nämä viruksen tartunnan saaneet solut tapettiin EFV: n läsnä ollessa immuuniaktivoinnin aikana. Kontrollikokeissa, kun proteaasi -inhibiittori Lopinaviir on lisätty, EFV: n vaikutus on täysin kumottu. Kokeet suoritettiin EFV: llä 5UM: n kohdalla, joihin pääsee plasmassa suuressa osassa henkilöitä, joilla on suositeltavaa koko annosta (600 mg Q.D.). Aikaisemmat farmakokinetiikkatutkimukset osoittivat, että EFV saavutti plasmapitoisuuden EC50: n yläpuolelle sen tappamisvaikutukseen (1um) ja saavuttaa vielä korkeammat pitoisuudet kudoksissa. Viimeaikainen työ ilmoitti NNRTI: n kaltaisista molekyyleistä, joilla on vertailukelpoinen viruksenvastainen aktiivisuus EFV: hen, mutta huomattavasti suurempi teho indusoimalla dimeroinnin ja Card8-välitteisen tappamisen. Tällaiset yhdisteet ovat kuitenkin edelleen prekliinisen tutkimuksen varhaisessa vaiheessa, ja niiden farmakokineettistä profiilia ja aktiivisuutta in vivo ei ole tutkittu. Tätä vaikutusta HIV -tartunnan saaneiden solujen tappamiseen pyroptoosilla CARD8 -tunnistuksen jälkeen on kutsuttu tarkkana (kohdennettu aktivaattori solun tappamisesta). EFV edustaa parasta taistelumolekyyliä, joka testataan, voidaanko Card8-infammasomia hyödyntää terapeuttisena vaihtoehtona HIV-efv: llä asuvilla ihmisillä lupaavimpana ja voimakkaimpana FDA: n hyväksyminä NNRTI-yhdisteeksi tähän tarkoitukseen. Ehdotetussa tutkimuksessa CART: n tehostaminen EFV: llä käytetään indusoimaan CARD8 -tunnistusta eikä estämään viruksen replikaatiota.

Hypoteesi:

PLWH: lle, jotka ovat kiinnittyneitä kärryihin, joilla ei ole dokumentoitua vastustusta nykyiselle ostoskorille tai EFV: lle, ja jotka ovat dokumentoineet jatkuvan tukahduttamattoman viremian (NSV), efavirentsin lyhytaikaisen lisäyksen, taistelu-molekyylinä [kohdennettu solujen tappamisen aktivaattori ], vähentää plasman HIV-1-RNA-viruskuormaa.

Primaarista päätetapahtuman plasman HIV -viremiaa verrataan lähtötilanteessa (vierailu 2) 8 viikon EFV: n jälkeen. (Käy 7) Toissijaiset päätepisteet

HIV -virussäiliöt:

QVOA (replikaation pätevä viruksen ylitysmääritys) lähtötilanteessa ja 2 kuukauden EFV: n ehjästä proviraalisesta DNA-määrityksestä lähtötilanteessa, 2 kuukauden EFV-soluihin liittyvän HIV-RNA: n aikana lähtötilanteessa ja sen jälkeen 2 kuukauden EFV-kuukautta ja sen jälkeen

Immuuni aktivointi:

Immuuniaktivaation ja solukuoleman markkerit plasmassa (lähtökohta ja 2 kuukautta):

CRP, LDH, IL-1-beeta, TNF, IL-6, Gasdermin D, Th1 ja Th2

T -solujen resentnit HIV -proteiineihin lähtötilanteessa ja 2 kuukaudessa.

Opintojen suunnittelu:

Tämä on mahdollinen, satunnaistettu tutkimus, jossa kukin ilmoittautunut kohde toimii omana hallinnassaan ennen ja jälkeen kahden kuukauden Efavirenzin käyttöönoton ja sen jälkeen taistelumolekyylinä. Tutkimus on yhdessä paikassa Maple Leaf -klinikalla Torontossa, Unity Health St. Michaelin sairaalassa ja Toronton yliopistossa. Ilmoittautumisen jälkeen tutkimuksen kesto on 20 viikkoa. Kaikki koehenkilöt rekrytoidaan Maple Leaf -klinikalle, Toronto. Verivirtauksia tapahtuu vaahteranlehden klinikalla. Leukapherees -menettelyt virussäiliöiden ja immuniteetin tutkimiseksi intensiivisemmin ovat valinnaisia, ja ne tapahtuvat lähtötilanteessa ja 8 viikossa. Perustaso on määritelty aikana, jolla on perusviivan verenveto ja/tai leukapherees, ja yksilöt käynnistetään EFV 600 mg PO: lla kerran päivässä 8 viikon ajan, seuraavan päivän aloittamiseksi. Osallistujat tunnistetaan ennen lähtövierailua noin 4 viikkoa ennen lähtötilantoa kelpoisuuden varmistamiseksi. Aiomme ilmoittautua 14 osallistujaa. -4 viikon vierailulla (vierailu 1) tutkimuksen apteekki tarkastelee kaikkia samanaikaisia ​​lääkkeitä, vaatimustenmukaisuutta, tarkastelee nykyistä taidehoitoa ja ehdotettua taidehoitoa lisäämällä täyden annoksen EFV. Mahdollisista sivuvaikutuksista/toksisuuksista - etenkin EFV: n tunnetuista, mutta palautuvista neurologisista vaikutuksista - ja niiden hoidosta keskustellaan. Tässä vaiheessa saadaan viruskuorma pysyvän matalan tason viremian vahvistamiseksi. Perustilanteessa (aika 0), jos aikaisempi VL osoitti LLV: tä, seuraavat määritykset tehdään: HIV-viruskuormitus, QVOA, IPDA HIV-säiliömittauksille, soluihin liittyvät HIV-RNA-, plasma- ja T-solumarkkerit immuuniaktivaation, HIV-spesifisen suhteen T -solujen immuniteetti. Perustasolla 70 cc: n verenvedon sijasta tarjotaan koehenkilöitä osallistumaan leukafereesiin (valinnainen), joka tarjoaa suurempia solujen lukumääriä HIV -säiliön parempaan kuulusteluun. Seuraavat vierailut 1 viikossa (V3), 3 viikkoa (V4), 5 viikkoa (V5) ja 7 viikkoa (V6) seuraavat plasman viruskuormaa ja säiliöitä IPDA: lla. 8 viikon (V7) kohdalla osallistujat lopettavat EFV: n ja viruskuorman, HIV -säiliöt, immuuniaktivaation ja T -solujen immuniteetin plasma- ja solumarkkerit. Koehenkilöille tarjotaan leukalaafereesi (valinnainen) HIV -säiliön ja T -solujen immuunitutkimusten paremman karakterisoimiseksi. Seurantavierailut mittaavat plasman viruskuormat ja säiliöt viikoilla 9 (V8), 12 (V9) ja 16 (V10). Kaikissa vierailuissa osallistujia tarkistetaan mahdollisista sivuvaikutuksista/toksisuuksista, mukaan lukien neuropsykiatriset oireet, ja tarttuminen ja CRF tarkistetaan. Mahdollisia haittavaikutuksia tutkitaan verivetoilla ja hoidetaan vastaavasti (esimerkiksi ihottuman, tarjoavat antihistamiinit, HC-kerma, +/- Lopeta EFV, jos tutkimuslääkäri (C. C. C. Kovacs). Kaikki vierailut tapahtuvat +/- 3 päivää ilmoitetusta ajankohdasta.

Näytteenotto. Veri kerätään käyttämällä SST/EDTA/ACD -putkia eri määrityksiin. Perustilanteessa ja 8 viikossa, jos koehenkilöt läpikäyvät leukaphereesia, vain yksi 5 ml: n veriputki viruskuormitukseen tehdään sen sijaan noina ajankohtina. Veren määrät ovat seuraavat: seulontavierailu (25 ml), 75 ml kaikissa muissa vierailuissa (jos leukaphereesia ei tehty). Jokaisessa vierailussa arviointi on tehty EFV -sivuvaikutuksista, uusista tai jatkuvista lääkkeistä, mukaan lukien kärry -ohjelmat, ja tarttuminen arvioidaan. Immuuniturvallisuuden varmistamiseksi CD4 -määrät tehdään seulonnassa, WK 8 ja 16.

Tilastollinen analyysi:

Tilastolliset analyysit suoritetaan Johns Hopkins CFAR -biostatistiikan ja epidemiologian ytimen (BEM) ja CTN: n tuella; Koko kohortin aikapisteiden eroja verrataan käyttämällä Wilcoxon Rank-Sum- tai Kruskal-Wallis-testiä. Osallistujien sisäinen (log-transformitettu) HIV-1-RNA, DNA, aikapisteiden välinen muutokset arvioidaan osallistujaspesifisillä lineaarisella regressiomallilla ja verrataan nollahypoteesiin ilman muutoksia käyttämällä Wilcoxon-allekirjoitettua langan testiä. Samaa lähestymistapaa sovelletaan immuuniaktivaation ja tulehduksen liukoisiin markkereihin.

Odotetut tulokset ja vaikutukset HIV -säiliö ei hajoa luonnollisesti tai käyttämällä kärryä. Ehdotetussa tutkimuksessa käsitellään HIV -pysyvyyden translaationäkökohtia, joilla on välittömiä vaikutuksia kliiniseen hoitoon. Card8 -tulehduksen aktivoitumisen hyödyntäminen EFV: llä on potentiaalia eliminoida GAG/POL -transkriptionaalisesti aktiiviset provirukset LLV: n syynä, jolla on tällä hetkellä rajoitetut terapeuttiset vaihtoehdot, kun otetaan huomioon, että nykyiset antiretroviraaliset aineet eivät vaikuta viruksen ilmentymiseen. LLV: n vähentäminen voisi vapauttaa lääkäreitä ja potilaita väärinkäytöksistä ja mahdollisesti haitallisista yrityksistä perusteettomaan ohjelman vaihtamiseen, huumeiden vajaatoiminnan ahdistukseen tai seksuaalisten kumppaneille tarkoitettujen tartuntojen henkilökohtaisiin riskiin. Mahdollisuudella vähentää merkittävä ja hoidettavissa oleva syy äskettäin tunnistettuun haitalliseen tulehdukseen ja krooniseen immuuniaktivaatioon on syvällisiä vaikutuksia ehkäisevän samanaikaisten sairauksien esiintyvyyden ja tulosten parantamiseen. Jos nämä pyrkimykset etenevät kurinalaisuudella, tulehduksen markkerien vähentämistä voitaisiin käyttää HIV -hoidon kliinisen hoidon kaskadissa ensimmäistä kertaa. Koska suuri osa säiliöstä heijastaa tartunnan saaneiden kloonien laajentumista, tällainen strategia voi pystyä poistamaan nämä. Äskettäin parannustutkimukset ovat kokeneet yhteisöjen osallistumisen epäröintiä haluttomia suostumaan kärryjen keskeytyksiin tutkimuksessa. Tämä malli voisi tarjota turvallisuusvakuutusta vapaaehtoisille tyydyttäen tutkijoiden vaatimukset todennettavissa olevien signaalien, kuten IPDA: n ja VQOA: n tai LLV: n vähentämisen vuoksi. Tack -terapeuttisten lääkkeiden tavoitteena on kaksi kertausta: 1) vähentämään huomattavasti replikaation pätevien virusten säiliötä; ja 2) vähentämään jatkuvaa antigeenistä stimulaatiota latentisesti tartunnan saaneiden solujen klooneista, jotka sisältävät transkriptionaalisesti aktiivisia, mutta viallisia virusten interventioita, jotka voivat muuntaa nämä yksilöt havaitsemattomaksi, olisi hyödyllistä.

Rekrytointi yhteensä 26 osallistujaa rekrytoidaan tutkimukseen.