Diabete di tipo 1 a esordio estremamente precoce Diabete di tipo 1 a esordio estremamente precoce (uno studio sul memorandum dei moschettieri) (EXE-T1D)

Il diabete di tipo 1 (T1D) è una comune malattia autoimmune che provoca la distruzione delle cellule beta pancreatiche produttrici di insulina, con conseguente aumento della glicemia. Il T1D è considerato una malattia infantile con un'età media alla diagnosi di 13 anni, ma la presentazione dell'età è molto variabile dai bambini piccoli fino alla tarda età adulta.

A Exeter, un gruppo di rari bambini che hanno sviluppato T1D nel primo anno di vita (Patel) è descritto come affetto da diabete di tipo 1 a insorgenza estremamente precoce (EET1D). Lo studio di questi rari pazienti è importante perché si presentano con l'autoimmunità proprio all'inizio della vita quando il sistema immunitario non è ancora completamente sviluppato e in un momento in cui l'autoimmunità pancreatica emerge per la prima volta (Krisher) e quindi questo studio può fornire nuove intuizioni sulla causa di T1D.

L'Exeter Molecular Genetics Laboratory è un centro di riferimento mondiale (www.diabetesgenes.org) per il diabete neonatale (NDM). La maggior parte dei casi di diabete diagnosticati sotto i 6 mesi non hanno EET1D ma hanno mutazioni genetiche nei geni delle cellule beta che portano a una ridotta produzione di insulina (NDM) (Ellard; De Franco). Exeter è in grado di identificare i rimanenti

I risultati possono focalizzare la comunità di ricerca sugli eventi che si verificano prima della nascita e possono quindi informare nuovi sforzi per prevenire o intervenire nella sottostante distruzione delle cellule beta nel T1D.

Ipotesi:

i) Il T1D estremo ad esordio precoce (EET1D) è associato a biomarcatori classici del T1D, come autoanticorpi specifici delle isole, cellule T CD8 specifiche delle isole autoreattive e perdita della funzione delle cellule beta, mentre i bambini con diabete neonatale monogenico o senza diabete non mostreranno anomalie in questi marcatori.

ii) EET1D sarà associato a una più rapida perdita di cellule beta rispetto a T1D che si presenta in età avanzata.

iii) I meccanismi per EET1D saranno dovuti a rari cambiamenti nei geni immunitari oa una risposta particolarmente potente e precoce del sistema immunitario alle cellule beta, misurata dalle cellule T autoreattive o dall'espressione genica immunitaria rispetto al T1D a insorgenza più avanzata.

Obiettivo dello studio: lo studio EXE-T1D prenderà persone con T1D diagnosticato prima dei 24 mesi e le confronterà con persone con T1D diagnosticato a età più tipiche (1-20 anni) e persone con diagnosi di diabete non autoimmune a un livello molto simile giovane età (bambini con diabete neonatale [NDM]) e bambini senza diabete appaiati per età.

EXE-T1D è uno studio osservazionale organizzato in due sotto-studi:

Studio 1: studio trasversale di pazienti esistenti con EET1D (n=100 v 100): valutare gli autoanticorpi delle isole, l'autoimmunità delle cellule T delle isole, il peptide C, l'RNAseq, la genetica e le caratteristiche cliniche di EET1D rispetto al T1D in pazienti selezionati inviati nel corso del ultimi 15 anni al team genetico di Exeter/Prof Oram che hanno età e durate diverse del diabete.

Studio 2: Pazienti appena indirizzati (n=20 v 20): Reclutare pazienti con EET1D di nuova diagnosi che vengono indirizzati a Exeter/Prof Oram per test diagnostici per consentire la valutazione del fenotipo immunitario in pazienti prossimi alla diagnosi (Abreu; Unger; Velthuis). Valutare la funzione immunitaria longitudinalmente raccogliendo un campione di sangue per i linfociti sierici e periferici, gli autoanticorpi delle isole e la valutazione del peptide C poco dopo il rinvio e circa 2 anni dopo.

Gli investigatori possono anche essere contattati dai medici di base dei pazienti e dai pazienti stessi. Il reclutamento per lo studio in questa impostazione avverrà da parte del team dello sperimentatore, incluso un infermiere specializzato in diabete pediatrico, che fornirà informazioni sullo studio e sull'inclusione del feedback del partecipante allo studio al medico di base e al medico del diabete, a seconda dei casi.

I partecipanti del Regno Unito saranno reclutati secondo l'etica del Regno Unito. Exeter recluterà pazienti da centri internazionali in collaborazione con medici locali che hanno l'approvazione specifica dell'Institutional Review Board (IRB).

Gli Exeter Clinical Laboratories comprendono l'Exeter Blood Sciences Laboratory e l'Exeter Molecular Genetics Laboratory presso il Royal Devon e l'Exeter NHS Foundation Trust ed eseguiranno test del peptide C, autoanticorpi delle isole e genetici.

L'analisi dei linfociti periferici (PBMC) per cellule T autoreattive CD4 e CD8 sarà eseguita da Bart Roep (City of Hope, CA, USA) e Tim Tree (King's College London). RNAseq sarà eseguito da Cate Speake e dal Benaroya Research Institute, Seattle (USA).

Tutti i partecipanti (o il loro tutore legale) reclutati per lo studio dovranno fornire il consenso informato scritto e saranno informati del loro diritto di ritirarsi dallo studio in qualsiasi momento senza pregiudizio o pericolo per qualsiasi futura assistenza clinica.

I pazienti identificati e sottoposti a screening come idonei per questo studio riceveranno un campione di sangue e un campione di urina facoltativo raccolti dal team clinico in un momento e in un luogo adatti al paziente, ai team clinici e allo studio.

Studio 2: Oltre alla prima visita, un altro campione di sangue per l'analisi di PBMC, C-peptide e autoanticorpi può essere raccolto in modo identico al primo campione, circa 2 anni (+/-6 mesi) dopo.

I campioni non britannici saranno raccolti da centri internazionali in collaborazione con la propria approvazione IRB. Il team locale girerà e congelerà il campione di plasma EDTA e lo conserverà in loco mentre i PBMC vengono estratti secondo la SOP di Exeter. Tutti i tubi saranno quindi spediti a Exeter. Se nessuna squadra locale è disponibile per estrarre i PBMC, tutti i tubi verranno spediti a Exeter per l'analisi. Per alcuni centri, potrebbe essere possibile organizzare il trasporto dei campioni direttamente nel Regno Unito per l'estrazione delle PBMC.

Definizione di fine studio: visita di studio finale dell'ultimo partecipante più 6 mesi per consentire l'acquisizione dei dati di follow-up.

Ricezione dei campioni/Catena di custodia/Responsabilità Gli Exeter Clinical Laboratories dispongono di una pipeline consolidata per la ricezione e l'elaborazione di tutti i campioni di ricerca, inclusa la documentazione della catena di custodia. I campioni in eccesso verranno processati, registrati e congelati a -80°C entro 24 ore dal ricevimento. Tutti i campioni saranno opportunamente etichettati in conformità con il Data Protection Act del 1998. I campioni biologici raccolti dai partecipanti saranno trasportati, conservati, consultati e trattati in conformità con la legislazione nazionale relativa all'uso e alla conservazione del tessuto umano a fini di ricerca. I partecipanti avranno l'opportunità di acconsentire a regalare campioni alla fine dello studio per ricerche future.

I risultati delle analisi intraprese dagli Exeter Clinical Laboratories saranno caricati elettronicamente direttamente nel database dello studio e collegati agli ID dello studio.

Sicurezza, definizioni e rischi di segnalazione I campioni di sangue saranno raccolti da personale addestrato alla venopuntura. Qualsiasi potenziale disagio o effetto collaterale sarà equivalente a quello sperimentato nelle cure cliniche di routine.

Vantaggi I risultati del peptide C e degli autoanticorpi possono aiutare a confermare una diagnosi di T1D, quindi verranno riportati ai medici responsabili della cura del diabete del paziente. Le decisioni sull'assistenza clinica e sul trattamento in corso verranno prese esternamente allo studio di ricerca, ma il trattamento verrà registrato.

Effetti avversi Qualora si verificassero eventi avversi imprevisti che sono possibilmente, probabilmente o sicuramente correlati a una procedura dello studio, questi verranno segnalati allo sponsor e all'IC/team di coordinamento centrale entro 24 ore dal momento in cui l'IC o il PI o i co-ricercatori ne vengono a conoscenza l'evento.

Riservatezza Tutte le informazioni relative ai partecipanti allo studio saranno mantenute riservate e gestite in conformità con il Data Protection Act, NHS Caldicott Guardian, The Research Governance Framework for Health and Social Care e Research Ethics Committee Approval.

I dati dei partecipanti saranno conservati in un formato anonimizzato tramite collegamento, con dati personali identificabili accessibili solo al personale con formazione in protezione dei dati che richiede queste informazioni per svolgere il proprio ruolo di studio.

Conservazione e archiviazione dei record Quando lo studio di ricerca è completo, è un requisito del Research Governance Framework e della Sponsor Trust Policy che i record siano conservati per altri 15 anni.

I file del sito del ricercatore locale devono essere archiviati presso il sito esterno in base ai requisiti di ricerca e sviluppo locali. Non saranno conservati presso la struttura di archiviazione del centro di coordinamento.

Considerazioni statistiche Dimensione del campione L'obiettivo di reclutamento totale è di almeno 240: Studio 1: 100 con EET1D più 100 controlli (N=200); Studio 2: EET1D v Controlli monogenici / NDM (N=30+); Controlli non diabetici: (N=20+) Fattibilità: la dimensione del campione è stata selezionata per valutare la fattibilità piuttosto che sulla base della potenza statistica. In realtà con questi pazienti estremamente rari ma potenzialmente molto interessanti, ogni singolo paziente reclutato potrebbe contribuire da solo a una nuova scoperta. Le differenze immunitarie, delle cellule beta o degli autoanticorpi che lo studio può rivelare non sono note, ma un gruppo di 20 vs 20 fornisce una potenza dell'80% (alfa 0,05) per rilevare una differenza del 10% rispetto al 50% in una proporzione tra i due gruppi e una potenza dell'85% (alfa 0,05) per rilevare una differenza di 1 DS in una variabile continua.

Analisi statistica: l'EET1D come descritto è unico e i risultati dei vari studi sono difficili da prevedere data la natura innovativa di questo studio. Lo studio che utilizza 100 controlli EET1D v 100 fornisce una potenza del 90% (alfa 0,05) per rilevare una differenza nelle proporzioni di una variabile binaria del 50% rispetto al 30% e una differenza di 0,6 DS in una variabile continua, e analogamente un gruppo di 20 v 20 fornisce una potenza dell'80% (alfa 0,05) per rilevare una differenza del 10% rispetto al 50% nei due gruppi e una potenza dell'85% (alfa 0,05) per rilevare una differenza di 1 DS in una variabile continua.

Il monitoraggio garantisce la conformità con la buona pratica clinica. Gli investigatori consentiranno il monitoraggio, gli audit, la revisione del REC e le ispezioni regolamentari fornendo agli sponsor, alle autorità di regolamentazione e al REC l'accesso diretto ai dati di origine e ad altri documenti.

Nessun interesse finanziario e altri interessi concorrenti da rivelare per il ricercatore capo, i PI di ciascun sito e i membri del comitato per la gestione complessiva dello studio.

NHS Indemnity si applicherà ai partecipanti del Regno Unito e l'assicurazione di responsabilità pubblica del Regno Unito è fornita dall'Università di Exeter.

Le deviazioni accidentali dal protocollo devono essere adeguatamente documentate e segnalate immediatamente al ricercatore capo e allo sponsor.

Accesso al set di dati finale dello studio Il gruppo di studio di Exeter avrà accesso al set di dati finale. Delle molteplici analisi effettuate durante lo studio, i co-ricercatori rilevanti per ciascuna analisi (ad es. RNAseq per Cate Speake) avranno accesso ai set di dati a cui hanno contribuito.

Coinvolgimento del pubblico e dei pazienti Il contatto diretto dell'IC con pazienti con diagnosi di diabete nei primi 12 mesi di vita ha portato al disegno dello studio. Pazienti, parenti e medici concordano sul fatto che sarebbe un vantaggio significativo sapere perché e come il T1D può presentarsi così giovane e se comprenderlo potrebbe aiutare con il trattamento o la prevenzione.

Finanziatori: Diabetes UK; Il Leona M. e Harry B. Helmsley Charitable Trust. Politica di pubblicazione: al termine dello studio, i dati verranno analizzati e verrà preparato un rapporto finale dello studio che verrà inviato ai finanziatori, allo sponsor e al REC. I risultati saranno redatti e inviati per la pubblicazione in una o più riviste peer-reviewed. Gli abstract saranno presentati a convegni nazionali e internazionali. Le informazioni scritte sotto forma di lettera/newsletter che delineano i risultati chiave dello studio saranno pubblicate sul sito web dello studio.

• L'Università di Exeter possiede i dati derivanti dallo studio.
• Non ci sono limiti di tempo o requisiti di revisione sulle pubblicazioni.
• I finanziatori saranno riconosciuti all'interno delle pubblicazioni ma non hanno diritti di revisione o pubblicazione.
• Dopo che il rapporto finale dello studio è stato compilato, i partecipanti possono richiedere specificamente i risultati al loro PI.