Profilazione metabolica mirata nella trombosi venosa profonda

La trombosi venosa profonda (TVP) è un coagulo di sangue, che di solito colpisce le gambe, causando dolore, gonfiore e arrossamento. Il coagulo danneggia le vene, che possono causare dolore cronico, gonfiore e ulcerazione. Questa è chiamata sindrome post-trombotica, che ha un forte impatto sulla vita e sul lavoro dei pazienti. Se il coagulo si sposta e viaggia verso i polmoni, diventa un embolo polmonare (EP), che può essere pericoloso per la vita. Insieme, TVP ed EP colpiscono 500.000 persone in Europa ogni anno, rappresentando la più comune causa prevenibile di morte acquisita in ospedale. Sono condizioni costose non solo a causa dei costi di trattamento, ma anche secondarie alla conseguente perdita di giornate lavorative e produttività.

La TVP viene diagnosticata mediante esame clinico, valutazione del rischio, di solito tramite il Wells Score, e un esame del sangue chiamato D dimero, un prodotto di degradazione della fibrina. Il D-dimero è specifico ma non molto sensibile. In altre parole, quando il test è negativo, è improbabile che sia presente una TVP.

Tuttavia, molte condizioni possono aumentare i livelli di D-dimero, rendendolo meno utile quando positivo. L'ecografia duplex può confermare la presenza di coagulo, ma questo può essere difficile da visualizzare o spesso non si vede affatto. Il coagulo può richiedere del tempo per formarsi e i pazienti potrebbero non avvertire immediatamente i sintomi. Questo è un problema per il trattamento, poiché i nuovi farmaci anti-coagulo funzionano meglio nelle prime 2 settimane dopo una TVP ed è attualmente impossibile dire quando si è formato il trombo.

A causa dell'importanza della TVP e dei problemi in corso riguardanti la sua diagnosi, l'invecchiamento e la prognosi, numerosi gruppi di ricerca hanno esplorato nuovi biomarcatori candidati per aiutare a sviluppare un marcatore diagnostico e prognostico più accurato per la TVP. La Sezione di Chirurgia Vascolare e di Medicina Computazionale e dei Sistemi (CSM) dell'Imperial College, ha una collaborazione di lunga data lavorando a questo fine utilizzando la metabonomica.

La metabonomica è definita come: "la misurazione quantitativa della risposta metabolica multiparametrica dei sistemi viventi a stimoli fisiopatologici o modificazioni genetiche". In altre parole, esamina i prodotti finali del metabolismo cellulare tramite piattaforme come la spettroscopia di risonanza magnetica nucleare (NMR) e la spettrometria di massa (MS), che sono entrambe piattaforme analitiche ad alto rendimento. Questi consentono la qualificazione (non mirata) e la quantificazione (mirata) di diverse molecole in un dato campione, con un grado di dettaglio superiore a quello offerto da altre tecnologie omiche (ad es. proteomica). La metabonomica ha dimostrato chiare applicazioni nelle malattie vascolari, tra cui la malattia venosa cronica, l'aterosclerosi, l'ulcerazione venosa delle gambe, la malattia aneurismatica e l'ictus.

Il lavoro preliminare non mirato sulla trombosi venosa profonda ha rivelato una firma metabolica per la TVP utilizzando un modello animale murino [9] e promettenti dati pilota in uno studio sull'uomo. Lo scopo dello studio proposto è convalidare i risultati precedenti in una coorte di pazienti separata ed eseguire la quantificazione dei metaboliti identificati negli studi pilota tramite esperimenti NMR e MS mirati, continuando l'esplorazione di nuovi biomarcatori per TVP.

Progettazione dello studio

Lo studio è uno studio prospettico osservazionale caso-controllo, che ha reclutato 40 pazienti con TVP e 40 soggetti sani. I pazienti con diagnosi di TVP saranno reclutati presso i siti dell'Imperial College Healthcare NHS Trust.

Riepilogo Saranno reclutati quaranta pazienti con diagnosi di TVP. La partecipazione allo studio non interferirà con il processo decisionale e le indagini diagnostiche da parte del team di assistenza diretta. Verrà esaminato anche un secondo gruppo di controllo di 40 volontari sani. Il reclutamento di soggetti sani avverrà negli stessi siti. Ai partecipanti verrà fornito un opuscolo informativo per il paziente ai fini del consenso informato.

Un membro del gruppo di ricerca spiegherà lo studio ai potenziali partecipanti. Sia i pazienti che i volontari avranno tempo sufficiente per leggere il foglio informativo e prendere una decisione informata in merito alla partecipazione allo studio; ciò sarà confermato dal partecipante firmando un modulo di consenso. Lo studio prevede un'anamnesi completa e un esame clinico, la registrazione dei farmaci assunti e la raccolta di campioni di sangue e urine. I campioni saranno etichettati in modo anonimo con un numero di studio e trasferiti all'Imperial

Laboratori universitari a South Kensington. Il trasferimento del campione verrà eseguito in modo sicuro secondo le procedure operative standard dipartimentali stabilite (SOP). Un campione di sangue verrà conservato per future analisi del DNA nei pazienti con TVP per integrare i risultati dei test metabonomici. Nessuna analisi del DNA verrà eseguita per questo particolare progetto.

Il gruppo TVP avrà uno studio ecografico ripetuto, eseguito da un ricercatore vascolare su una macchina dedicata (non NHS) 3 settimane dopo la fine del trattamento anticoagulante. Avranno anche ripetuti campioni di urina e sangue prelevati. Nessuno degli interventi di ricerca avrà un impatto sull'assistenza clinica che i pazienti riceveranno.

Una lettera che spiega lo scopo dello studio sarà inviata al medico di medicina generale se il partecipante lo desidera. Tutte le informazioni cliniche e di ricerca rimarranno riservate.

Gruppi di pazienti:

• Gruppo 1: Pazienti con TVP confermata da ecografia venosa duplex degli arti inferiori (DUS) (n = 40)
• Gruppo 2: volontari sani senza TVP confermata su DUS (n = 40)