Fascicolazioni in adulti sani dopo il consumo di caffeina: uno studio sugli ultrasuoni

Le fascicolazioni sono clinicamente definite come contrazioni intermittenti spontanee di una porzione di muscoli [8]. Possono anche essere valutati con l'elettromiografia e sono classificati come risultato della depolarizzazione spontanea di un motoneurone inferiore che porta alla contrazione sincrona di tutte le fibre muscolari scheletriche all'interno di una singola unità motoria [9]. All'esame ecografico le fascicolazioni sono classificate come contrazioni involontarie di piccole parti del muscolo, della durata di 0,2 - 1,0 secondi [10]. Derivano da scariche spontanee dei nervi motori, ma l'eziologia e il sito di origine di queste scariche rimane ancora incerta e discussa in modo controverso [11, 12]. A seconda dei sintomi associati, possono essere un segno di disturbo del motoneurone inferiore. Sono un segno distintivo della sclerosi laterale amiotrofica, una malattia neurodegenerativa che colpisce i motoneuroni superiori nel cervello e i motoneuroni inferiori nel midollo spinale, specialmente quando sono diffusi [13, 14]. Le fascicolazioni possono anche essere un fenomeno normale che quasi tutti hanno sperimentato occasionalmente nella loro vita o più frequentemente in soggetti sani dopo l'esercizio [15]. È discusso in modo controverso se le fascicolazioni sopra il ginocchio debbano sollevare il sospetto di un disturbo anche se non ci sono altri segni di affezione del motoneurone inferiore. In un recente studio olandese la prevalenza e la distribuzione delle fascicolazioni negli adulti sani è stata valutata con gli ultrasuoni e si è potuto dimostrare che un intenso esercizio fisico provoca un aumento temporaneo delle fascicolazioni ma solo dei muscoli della parte inferiore della gamba negli adulti sani [14]. Tuttavia le fascicolazioni sono state esaminate solo per 10 secondi 30 minuti dopo l'esercizio. È ben noto che il tempo di osservazione per le fascicolazioni dovrebbe essere di 2 minuti per decidere se un muscolo è "libero da fascicolazioni" [15]. Lo scopo di questo studio è indagare se le fascicolazioni si verificano anche nei muscoli dopo il consumo di caffeina e se c'è una differenza tra i muscoli delle braccia e delle gambe.

3 OBIETTIVI E DISEGNO DELLO STUDIO 3.1 Ipotesi e obiettivo primario L'ipotesi sull'endpoint primario, il confronto di due proporzioni, può essere esaminata mediante un test esatto di Fisher.

L'ipotesi nulla dell'endpoint primario è che non vi sia alcuna differenza nelle proporzioni delle fascicolazioni al di sotto e al di sopra del ginocchio.

L'ipotesi alternativa dell'endpoint primario afferma una differenza nelle proporzioni delle fascicolazioni sotto e sopra il ginocchio.

Obiettivo/fine finale secondario:

Gli endpoint secondari dello studio confrontano le proporzioni delle fascicolazioni tra due gruppi di età (20-35 anni e 35-50 anni):

L'ipotesi degli endpoint secondari viene nuovamente esaminata da un test esatto di Fisher.

L'ipotesi nulla e alternativa degli endpoint secondari sono analoghe. 3.2 Endpoint primari e secondari L'endpoint primario è la rilevazione delle fascicolazioni nei muscoli delle braccia e delle gambe dopo il consumo di caffeina in adulti sani (20-35 anni e 35-50 anni) 3.3 Disegno dello studio Studio trasversale monocentrico. 3.4. Intervento dello studio Vedere 4.3 Procedure dello studio 4 POPOLAZIONE DELLO STUDIO E PROCEDURE DELLO STUDIO 4.1 Criteri di inclusione ed esclusione, giustificazione della popolazione dello studio Una popolazione di 26 soggetti per gruppo e un totale di 52 soggetti sarà reclutata per lo studio.

Elenca i criteri di inclusione dello studio:

• Soggetti sani (maschi/femmine)
• Età 20-50 anni

Elenca i criteri di esclusione dallo studio:

• sintomi neurologici
• qualsiasi malattia neurologica incluse neuropatie, miopatie o radicolopatie nella storia personale
• malattia sistemica inclusa la vasculite nella storia personale
• polso anormale nell'arteria dorsale del piede
• forza, sensibilità e riflessi tendinei anormali
• atrofia muscolare nei muscoli studiati.

4.2 Procedura di reclutamento, screening e consenso informato Il reclutamento avverrà all'interno della nostra cerchia sociale e della popolazione di pazienti. Gli investigatori chiedono ad amici e conoscenti se vorrebbero prendere parte allo studio. Se gli investigatori non trovano abbastanza soggetti di prova in questo modo, gli investigatori pubblicheranno un avviso presso l'Università di Zurigo o faranno pubblicità online. I soggetti che accettano di partecipare allo studio saranno informati sull'esatto corso dello studio in una conversazione e potranno quindi decidere se accettare o meno di partecipare. Solo quando hanno deciso di partecipare allo studio, i criteri di inclusione ed esclusione vengono interrogati sulla base di una precisa anamnesi. Questo è seguito da un esame neurologico (test di sensibilità, esame per paresi, stato dei nervi cranici, riflessi, sensazione di vibrazione, test della posizione eretta e della deambulazione) nonché una misurazione della pressione sanguigna e del polso.

4.3 Procedure dello studio

La durata complessiva dello studio pianificata, compreso il periodo di reclutamento, sarà di 6 mesi. Il reclutamento e l'intervento avverranno nell'arco di 4 mesi. Il giorno dell'esame, i soggetti dovrebbero apparire riposati (non troppo stanchi) e sentirsi bene. Innanzitutto, vengono misurati la pressione sanguigna e il polso. L'esame neurologico viene effettuato durante la chiarificazione dei criteri di inclusione ed esclusione dopo il colloquio anamnestico (vedi 4.2). I soggetti non devono aver assunto almeno 12 ore prima dell'esame né caffeina né alcool né droghe o farmaci. Dovrebbero mangiare e bere normalmente e non dovrebbero essere sobri. 10 minuti prima di assumere caffeina, viene eseguito l'esame ecografico dei muscoli. Il soggetto del test è sdraiato durante questa procedura mentre è calmo e rilassato senza tendere i muscoli. Non dovrebbero parlare durante entrambi gli esami ecografici. La caffeina viene assunta sotto forma di caffè. Non importa nello studio se sono bevitori abituali di caffè o meno. La pressione sanguigna e il polso vengono misurati ogni 30 minuti dopo aver assunto la caffeina per 2 ore. In totale, il test dura 3 ore.

Mediante ecografia verranno misurati lo sternocleidomastoideo, il bicipite brachiale, l'interosseo dorsale, il quadricipite femorale, il gastrocnemio e l'abduttore dell'alluce per 120 secondi (con registrazione video) 10 minuti prima e 45 minuti dopo il consumo di caffeina (6 mg per chilogrammo di peso corporeo).

4.4 Ritiro e interruzione In conformità con la Dichiarazione di Helsinki, un soggetto ha il diritto di ritirarsi dallo studio in qualsiasi momento senza fornire motivazioni. I soggetti che vengono ritirati dallo Sperimentatore a causa di un evento avverso inaccettabile saranno definiti "ritiro" e non saranno sostituiti. In queste circostanze, lo Sperimentatore istituirà le indagini di follow-up appropriate in conformità con gli standard accettati di cure mediche, inclusa l'esecuzione di test al momento del ritiro. I soggetti che si ritirano dallo studio per qualsiasi motivo non saranno sostituiti.

5 STATISTICA E METODOLOGIA 5.1. Piano di analisi statistica e calcolo della dimensione del campione

Metodi:

Per un confronto delle proporzioni delle fascicolazioni sopra e sotto il ginocchio viene applicato un test esatto di Fisher per un confronto delle proporzioni, utilizzando la funzione R [16] fe.ssize dal pacchetto R clinfun [17]. Gli investigatori devono fare ipotesi sulle seguenti quantità:

• Livello di significatività α. I ricercatori hanno posto α = 0,05.
• Proporzioni assunte: nel primo gruppo (fascicolazioni sopra il ginocchio), ci si aspetta p1 ∈ {0.6, 0.55}.

Si noti che per valori di p1 vicini a 0 il numero di pazienti necessari varia sostanzialmente per piccole variazioni di p1. Gli investigatori calcolano le dimensioni del campione per le presunte proporzioni del gruppo 2 (fascicolazioni sotto il ginocchio) di p2 ∈ {0,1, 0,15}.

• Potenza, la probabilità di rifiutare l'ipotesi nulla di uguali proporzioni nei due gruppi quando la vera differenza è almeno quella assunta. Gli investigatori calcolano le dimensioni del campione per la potenza 1 - β ∈ {0,8, 0,9}.

Misura di prova:

Nella Tabella 1 i ricercatori forniscono le dimensioni del campione per le ipotesi di cui sopra.

Livello di significatività α Potenza 1 - β p1 p2 n per gruppo per il test esatto di Fisher 0,05 0,05 0,05 0,05 0,8 0,8 0,8 0,8 0,6 0,6 0,55 0,55 0,1 0,15 0,1 0,15 17 22 19 25 0,05 0,05 0,0 5 0,05 0,9 0,9 0,9 0,9 0,6 0,6 0,55 0,55 0,1 0,15 0.1 0.15 20 26 24 32 Numero totale nello studio per il test esatto di Fisher 34 44 38 50 40 52 48 64

Tabella 1: dimensioni del campione.

Una dimensione del campione di 26 in ciascun gruppo avrà il 90% di capacità di rilevare una differenza tra le proporzioni di p1 = 0,6 (fascicolazioni sopra il ginocchio) e p2 = 0,15 (fascicolazioni sotto il ginocchio) utilizzando un test esatto di Fisher con un livello di significatività a due code di 0,05 . Ciò si traduce in una dimensione totale del campione di 52.

5.2. Gestione dei dati mancanti e degli abbandoni Il numero di fascicolazioni può essere nuovamente visualizzato, perché gli esami ecografici vengono registrati come un film e possono essere rivisti in qualsiasi momento. Qualora i dati dovessero comunque andare perduti, al soggetto interessato verrà chiesto se potrà partecipare nuovamente in un altro giorno o se verranno reclutati nuovi partecipanti.

Gli abbandoni sono sostituiti dall'assunzione di nuovi soggetti. 6 ASPETTI NORMATIVI E SICUREZZA 6.1 Regolamenti locali / Dichiarazione di Helsinki Questo studio è condotto in conformità con il protocollo, la versione corrente della Dichiarazione di Helsinki, l'ICH-GCP, l'HRA e altri requisiti legali e normativi pertinenti a livello locale.

6.2 Eventi avversi (gravi) e notifica delle misure di sicurezza e protezione Un evento avverso (AE) è qualsiasi evento medico sfavorevole in un paziente o in un soggetto di indagine clinica che non ha necessariamente una relazione causale con la procedura dello studio. Un evento avverso può quindi essere qualsiasi reperto, sintomo o malattia sfavorevole o non intenzionale associato temporalmente a una procedura di prova, correlata o meno ad essa.

Un evento avverso grave (SAE) (OScl, art. 63) è qualsiasi evento medico spiacevole che

• Provoca la morte o è in pericolo di vita,
• Richiede il ricovero ospedaliero o il prolungamento del ricovero esistente,
• Provoca invalidità o incapacità persistenti o significative, o
• Provoca un'anomalia congenita o un difetto congenito

Sia l'investigatore che lo sponsor-investigatore effettuano una valutazione di causalità dell'evento rispetto all'intervento sperimentale (vedere la tabella seguente in base ai termini forniti nelle linee guida ICH E2A). Qualsiasi evento valutato come possibilmente, probabilmente o sicuramente correlato è classificato come correlato all'intervento sperimentale.

Relazione Descrizione Sicuramente Relazione temporale Miglioramento dopo la sospensione* Ricorrenza dopo la ripetizione della sfida (o altra prova della causa del farmaco) Probabilmente Relazione temporale Miglioramento dopo la sospensione Nessun'altra causa evidente Possibile Relazione temporale Altra causa possibile Improbabile Qualsiasi reazione valutabile che non soddisfi le condizioni di cui sopra Non correlata Causale relazione può essere esclusa

*Miglioramento dopo dechallenge preso in considerazione solo se applicabile alla reazione

Sia l'investigatore che lo sponsor-investigatore effettuano una valutazione della gravità dell'evento come lieve, moderata o grave. Lieve significa che la complicanza è tollerabile, moderata significa che interferisce con le attività quotidiane e grave significa che rende impossibili le attività quotidiane.

Segnalazione di SAE (cfr. 63) Tutti gli eventi avversi gravi sono documentati e segnalati immediatamente (entro un massimo di 24 ore) allo Sponsor-Investigatore dello studio.

Se non si può escludere che il SAE verificatosi in Svizzera sia riconducibile all'intervento in esame, lo Sperimentatore lo segnala al Comitato Etico tramite BASEC entro 15 giorni.

Follow-up di (gravi) eventi avversi Descrivere le procedure di follow-up dei partecipanti che terminano lo studio con (S)AE in corso segnalati fino alla risoluzione o alla stabilizzazione.

Notifica delle misure di sicurezza e di protezione (cfr. OSClin, art. 62, b) Se durante lo svolgimento dello studio devono essere prese misure di sicurezza e di protezione immediate, lo sperimentatore notifica al comitato etico tali misure e le circostanze che le richiedono, entro 7 giorni.

6.3 Segnalazione (periodica) sulla sicurezza Una volta all'anno viene presentata dallo Sperimentatore (ClinO, art. 43 Abs 1).

6.4 Modifiche Modifiche sostanziali alla struttura e all'organizzazione dello studio, al protocollo e ai relativi documenti di studio vengono sottoposti all'approvazione del Comitato etico prima dell'implementazione. In circostanze di emergenza, le deviazioni dal protocollo per proteggere i diritti, la sicurezza e il benessere dei soggetti umani possono procedere senza la preventiva approvazione del Comitato Etico. Tali scostamenti devono essere documentati e segnalati al Comitato Etico il prima possibile.

Modifiche sostanziali sono modifiche che riguardano la sicurezza, la salute, i diritti e gli obblighi dei partecipanti, modifiche al protocollo che influiscono sull'obiettivo/i dello studio o sull'argomento centrale della ricerca, modifiche del/i centro/i dello studio o del capofila e dello sponsor dello studio (ClinO, Art. . 29).

Un elenco delle modifiche sostanziali è disponibile anche su www.swissethics.ch. Un elenco di tutte le modifiche non sostanziali sarà presentato una volta all'anno alla CE competente insieme all'ASR.

6.5 Notifica e rendicontazione in caso di completamento, interruzione o interruzione dello studio Al termine regolare dello studio, il Comitato etico viene informato tramite BASEC entro 90 giorni (Ocl, art. 38).

Fornire una dichiarazione secondo cui lo Sponsor-Investigatore e qualsiasi altra autorità competente possono interrompere lo studio prematuramente in determinate circostanze, ad esempio:

Lo Sponsor-Investigatore può terminare lo studio prematuramente in base a determinate circostanze, ad es.

• Preoccupazioni etiche,
• Reclutamento insufficiente dei partecipanti,
• Quando la sicurezza dei partecipanti è dubbia o a rischio (ad esempio quando la valutazione del rapporto rischio-beneficio non è più positiva),
• Alterazioni nella pratica clinica accettata che rendono sconsigliabile la continuazione dello studio, o
• Prime prove di danno o beneficio dell'intervento sperimentale

In caso di interruzione anticipata o di interruzione degli studi, la Commissione etica viene informata tramite BASEC entro 15 giorni (Ocl, art. 38).

6.6 Assicurazione In caso di danni o infortuni legati allo studio, la responsabilità dell'istituto (Spital Wetzikon) provvede al risarcimento, ad eccezione delle pretese derivanti da dolo o colpa grave.