カフェイン摂取後の健康な成人の線維束性収縮：超音波研究

線維束形成は、筋肉の一部の自発的断続的な収縮として臨床的に定義されています [8]。 それらは筋電図検査でも評価でき、単一運動単位内のすべての骨格筋線維の同期収縮を引き起こす下位運動ニューロンの自発的脱分極の結果として分類されます[9]。 超音波検査では、線維束性収縮は、0.2 ～ 1.0 秒続く筋肉の小さな部分の不随意のけいれんとして分類されます [10]。 これらは運動神経の自然放電によって引き起こされますが、これらの放電の病因と発生部位は依然として不明瞭であり、物議を醸しています [11、12]。 関連する症状によっては、下位運動ニューロン障害の兆候である可能性があります。 これらは、筋萎縮性側索硬化症の特徴であり、特に広範囲に広がっている場合、脳の上位運動ニューロンと脊髄の下位運動ニューロンに影響を与える神経変性疾患です[13、14]。 線維束性収縮は、ほとんどすべての人が人生で時折、または健康な被験者では運動後に頻繁に経験する正常な現象でもあります [15]。 たとえ他に下位運動ニューロン障害の兆候がない場合でも、膝上の線維束性収縮が疾患の疑いを提起すべきかどうかについては、議論の余地があります。 最近のオランダの研究では、健康な成人における線維束性の有病率と分布が超音波を用いて評価され、激しい運動により線維性線維症の一時的な増加が引き起こされるが、健康な成人の下肢の筋肉にのみ線状性線維症が増加することが示された[14]。 ただし、線維束性収縮は運動後 30 分後に 10 秒間だけ検査されました。 筋肉が「束状化していない」かどうかを判断するには、束状化の観察時間が 2 分である必要があることはよく知られています [15]。 この研究の目的は、カフェイン摂取後に筋束性収縮が筋肉でも起こるかどうか、また腕と脚の筋肉に違いがあるかどうかを調査することです。

3 研究の目的と計画 3.1 仮説と主目的 主要エンドポイントに関する仮説、つまり 2 つの比率の比較は、フィッシャーの直接確率検定によって検証できます。

主要エンドポイントの帰無仮説は、膝の下と上の束縛の割合に差がないということです。

主要エンドポイントの対立仮説では、膝の下と上の線維束性束縛の割合の違いが述べられています。

二次目標/エンドポイント:

研究の副次評価項目では、2 つの年齢グループ (20 ～ 35 歳と 35 ～ 50 歳) 間の線維束性収縮の割合を比較します。

二次エンドポイントの仮説は、フィッシャーの直接確率検定によって再度検証されます。

二次エンドポイントの帰無仮説と対立仮説は類似しています。 3.2 一次エンドポイントおよび二次エンドポイント 主要エンドポイントは、健康な成人 (20 ～ 35 歳および 35 ～ 50 歳) のカフェイン摂取後の腕と脚の筋肉の束状化を検出することです。 3.3 研究デザイン 単中心断面研究。 3.4. 研究介入 4.3 研究手順を参照。 4 研究対象集団および研究手順 4.1 対象および除外基準、研究対象集団の正当化 1 グループあたり 26 名の被験者、合計 52 名の被験者が研究に募集されます。

研究の対象となる基準を列挙します。

• 健常者（男性・女性）
• 年齢 20～50歳

研究の除外基準を列挙します。

• 神経症状
• 個人歴における神経障害、筋障害、神経根障害を含む神経疾患
• 個人歴における血管炎を含む全身疾患
• 足背動脈の異常な脈拍
• 異常な筋力、感覚、腱反射
• 研究された筋肉の筋萎縮。

4.2 募集、スクリーニング、およびインフォームドコンセントの手順 募集は、当社の社会的サークルおよび患者集団内で行われます。 研究者は友人や知人に研究に参加したいかどうか尋ねます。 この方法で十分な被験者が見つからない場合、研究者はチューリッヒ大学に張り紙をするか、オンラインで広告を掲載します。 研究への参加に同意した被験者は、会話の中で研究の正確な経過について知らされ、その後、参加に同意するかどうかを決定することができます。 彼らが研究に参加することを決定した場合にのみ、正確な既往歴に基づいて対象および除外基準が照会されます。 その後、神経学的検査（知覚過敏検査、麻痺の検査、脳神経の状態、反射神経、振動感覚、立位・歩行の検査）および血圧と脈拍の測定が行われます。

4.3 研究手順

募集期間を含めた全体の学習期間は6ヶ月を予定しております。 採用と介入は 4 か月にわたって行われます。 試験当日、被験者は休息し（疲れすぎていない）、気分が良いように見える必要があります。 まず、血圧と脈拍を測定します。 神経学的検査は、既往歴面接後の包含基準と除外基準を明確にする際に実施されます（4.2 を参照）。 被験者は検査の少なくとも12時間前にカフェインやアルコール、薬物などを摂取していない必要があります。 通常どおり飲食する必要があり、しらふであってはなりません。 カフェインを摂取する10分前に筋肉の超音波検査が行われます。 この手順の間、被験者は横になり、筋肉を緊張させることなく、落ち着いてリラックスした状態で行います。 両方の超音波検査中に会話をしてはいけません。 カフェインはコーヒーの形で摂取されます。 この研究では、彼らが定期的にコーヒーを飲むかどうかは関係ありません。 血圧と脈拍は、カフェインを2時間摂取した後、30分ごとに測定されます。 テストには合計 3 時間かかります。

超音波検査を使用して、胸鎖乳突筋、上腕二頭筋、背骨間筋、大腿四頭筋、腓腹筋および母趾外転筋を、カフェイン摂取（体重1キログラムあたり6 mg）の10分前と45分後に120秒間測定します（ビデオ録画あり）。

4.4 撤回と中止 ヘルシンキ宣言に従い、被験者はいつでも理由を示さずに研究から撤退する権利を有します。 許容できない有害事象のために治験責任医師によって中止された被験者は「中止」と呼ばれ、代替されることはありません。 このような状況下では、治験責任医師は、撤回時の検査の実施を含む、受け入れられた医療基準に従って適切な追跡調査を開始します。 何らかの理由で研究を辞退した被験者は補充されません。

5 統計と方法論 5.1. 統計分析計画とサンプルサイズの計算

方法:

膝の上下の束状形成の割合を比較するには、R パッケージ clinfun [17] の R 関数 [16] fe.ssize を使用して、割合の比較のためのフィッシャーの直接確率検定が適用されます。 研究者は、次の量について仮定を立てる必要があります。

• 有意水準α。 研究者らは α = 0.05 と設定しました。
• 想定される比率: 最初のグループ (膝の上の束状形成) では、p1 ∈ {0.6, 0.55} が予想されます。

p1 の値が 0 に近い場合、必要な患者の数は p1 の小さな変化によって大幅に変化することに注意してください。 研究者らは、p2 ∈ {0.1, 0.15} のグループ 2 の想定比率 (膝下の束状化) のサンプル サイズを計算します。

• 検出力。真の差が少なくとも想定どおりである場合に、2 つのグループの比率が等しい帰無仮説を棄却する確率。 研究者は、検出力 1 - β ∈ {0.8, 0.9} のサンプル サイズを計算します。

サンプルサイズ：

表 1 では、研究者は上記の仮定に対するサンプル サイズを示しています。

フィッシャーの直接確率検定のグループごとの有意水準 α 検出力 1 - β p1 p2 n 0.05 0.05 0.05 0.05 0.8 0.8 0.8 0.8 0.6 0.6 0.55 0.55 0.1 0.15 0.1 0.15 17 22 19 25 0.05 0.05 0 .05 0.05 0.9 0.9 0.9 0.9 0.6 0.6 0.55 0.55 0.1 0.15 0.1 0.15 20 26 24 32 フィッシャーの直接確率検定の研究対象の合計数 34 44 38 50 40 52 48 64

表 1: サンプルサイズ。

各グループのサンプルサイズが 26 の場合、両側有意水準 0.05 のフィッシャーの直接確率検定を使用して、p1 = 0.6 (膝上の束状化) と p2 = 0.15 (膝下の束状化) の比率間の差異を検出する検出力が 90% になります。 。 これにより、合計サンプル サイズは 52 になります。

5.2. データ欠落・欠落への対応 超音波検査はフィルムとして記録され、いつでも再確認できるため、線維束束性の数を再確認することができます。 それでもデータが失われた場合、該当する対象者は、別の日に再度参加できるかどうか、または新しい参加者を募集するかどうかを尋ねられます。

脱落者は新しい被験者の採用によって置き換えられます。 6 規制の側面と安全性 6.1 現地の規制 / ヘルシンキ宣言 この研究は、議定書、ヘルシンキ宣言の現行版、ICH-GCP、HRA、およびその他の現地関連の法律および規制の要件に従って実施されます。

6.2 (重篤な) 有害事象と安全性および保護措置の通知 有害事象 (AE) とは、患者または臨床研究対象者における望ましくない医学的出来事であり、治験手順と必ずしも因果関係を持たないものを指します。 したがって、AE は、関連するかどうかに関係なく、治験手順に一時的に関連する、好ましくないまたは意図しない所見、症状、または疾患である可能性があります。

重篤な有害事象 (SAE) (ClinO、Art. 63) 不都合な医療上の出来事。

• 死に至る、または生命を脅かすもの、
• 入院または既存の入院の延長が必要な場合、
• 持続的または重大な障害または無能力をもたらす、または
• 先天異常または先天異常を引き起こす

治験責任医師と治験依頼者は両方とも、治験介入に対する事象の因果関係を評価します（ICH E2A ガイドラインに示されている用語に基づく以下の表を参照）。 関連する可能性がある、おそらく、または確実に関連すると評価されたイベントはすべて、治験介入に関連するものとして分類されます。

関係 説明 間違いなく 時間的関係 チャレンジ解除後の改善* 再チャレンジ後の再発 (または薬物原因のその他の証拠) おそらく時間的関係 チャレンジ解除後の改善 他に明らかな原因はない おそらく時間的関係 他の原因の可能性は低い 上記の条件を満たさない評価可能な反応は関係なし 因果関係なし関係は否定できる

*反応に該当する場合のみ、チャレンジ解除後の改善が考慮されます。

治験責任医師と治験依頼者は両方とも、事象の重症度を軽度、中等度、重度として評価します。 軽度は合併症が耐えられることを意味し、中等度は日常生活に支障をきたすことを意味し、重度は日常生活が不可能になることを意味します。

SAE の報告 (ClinO、Art. 63) すべての SAE は文書化され、直ちに (最長 24 時間以内に) 研究の治験依頼者に報告されます。

スイスで発生した SAE が調査中の介入に起因する可能性を排除できない場合、調査官は 15 日以内に BASEC 経由で倫理委員会に報告します。

（重篤な）有害事象のフォローアップ 進行中の（S）AE が報告されたために研究を終了した参加者の、解決または安定化までのフォローアップ手順を説明します。

安全および保護措置の通知（ClinO、第 62 条、b を参照） 研究の実施中に直ちに安全および保護措置を講じる必要がある場合、研究者はこれらの措置およびそれを必要とする状況を倫理委員会に通知します。 7日。

6.3 (定期的な) 安全性報告 年次安全性報告書 (ASR) は、年に 1 回、治験責任医師によって地方倫理委員会に提出されます (ClinO、Art. 腹筋43 1)。

6.4 修正 研究の設定および研究組織、プロトコールおよび関連する研究文書に対する大幅な変更は、実施前に承認を得るために倫理委員会に提出されます。 緊急事態下では、倫理委員会の事前承認なしに、被験者の権利、安全、福祉を保護するためのプロトコルからの逸脱が行われる場合があります。 このような逸脱は文書化され、できるだけ早く倫理委員会に報告されるものとします。

大幅な修正とは、参加者の安全、健康、権利および義務に影響を与える変更、研究目的または中心的な研究テーマに影響を与えるプロトコールの変更、研究施設または研究リーダーおよびスポンサーの変更（ClinO、Art 。 29）。

重要な変更点のリストは、www.swissethics.ch でもご覧いただけます。 すべての非実質的な修正のリストは、年に 1 回、ASR とともに管轄 EC に提出されます。

6.5 研究の完了、中止または中断時の通知および報告 定期的な研究が完了すると、90 日以内に BASEC 経由で倫理委員会に通知されます (ClinO、Art. 38）。

治験依頼者およびその他の管轄当局が、特定の状況に応じて研究を途中で終了する可能性がある旨の声明を提供します。例:

治験依頼者は、特定の状況に応じて研究を途中で終了する場合があります。

• 倫理的な懸念、
• 参加者募集が不十分なため、
• 参加者の安全が疑わしい場合、または危険にさらされている場合（例：利益とリスクの評価が肯定的でなくなった場合）、
• 研究の継続が賢明ではない、受け入れられた臨床実践の変更、または
• 実験的介入の害または利益の初期の証拠

研究が早期に終了または中断された場合、15 日以内に BASEC 経由で倫理委員会に通知されます (ClinO、Art. 38）。

6.6 保険 研究に関連した損害または傷害が発生した場合、不正行為または重大な過失から生じる請求を除き、教育機関 (Spital Wetzikon) の責任が補償を提供します。