Brachyspira e reazioni immunitarie di tipo allergico intestinale in pazienti con sindrome dell'intestino irritabile (IBS)

Lo scopo di questo studio è definire le risposte immunitarie locali nel tratto gastrointestinale agli antigeni alimentari nei pazienti con IBS con e senza infezione da Brachyspira utilizzando l'imaging avanzato. I ricercatori ipotizzano che l'infezione da Brachyspira possa causare sintomi di IBS inducendo la perdita di tolleranza orale agli antigeni alimentari attraverso lo sviluppo di reazioni immunitarie intestinali specifiche per il cibo e il successivo sviluppo di ipersensibilità viscerale.

Visita 1: inclusione, questionari, sangue, esame barostatico rettale Visita 2: questionari, sangue, feci, diari (cibo e feci), sigmoidoscopia (senza lassativi) Visita allergologo (prick test cutaneo e interpretazione risultati del sangue) Visita 3: feci, confocale endomicroscopia laser (CLE) O test di provocazione antigenica colonscopica (COLAP)

Visita 4,5 e 6 solo se CLE o COLAP sono risultati positivi per (almeno) 1 alimento

Visita 4: questionari e istruzioni guidate dal dietista su quale alimento escludere (alimento/i positivo/i durante CLE/COLAP), esclusione per 4 settimane Visita 5: questionari, diario delle feci, istruzioni per la reintroduzione dell'alimento/i Visita 6 : questionari

QUESTIONARI Questionari di base; dati demografici, sintomi, anamnesi di sintomi/farmaci/dieta, condizioni mediche di comorbilità

Sintomi dell'IBS: IBS-Symptom Severity Scale (IBS-SSS) e Gastrointestinal Symptom Rating Scale (GSRS)-IBS

Disagio psicologico: Hospital Anxiety and Depression Scale (HADS), Patient Health Questionnaire (PHQ)-9 (entrambe le visite 1,4,5,6, scala a 7 elementi del disturbo d'ansia generalizzato (GAD-7)

Somatizzazione: PHQ-15 per il numero e la gravità dei sintomi corporei.

Ansia specifica gastrointestinale: Indice di sensibilità viscerale (VSI).

Sensibilità: Inventario Centrale di Sensibilizzazione (CSI).

Evitamento e restrizione alimentare: (ARFID).

Abitudini fecali e sintomi gastrointestinali: diario dei sintomi gastrointestinali di 14 giorni basato sulla Bristol Stool Form Scale (BSFS).

Qualità della vita: IBS-Qualità della vita (QOL).

Assunzione di cibo: diario alimentare di 4 giorni, MealQ.

TEST COLONOSCOPICO DI PROVOCAZIONE DI ALLERGENI, COLAP:

• Un test di provocazione allergica locale, in cui gli antigeni alimentari (soia, grano, (uova), glutine e latte), con soluzione salina e istamina come controlli negativi e positivi, vengono rispettivamente iniettati nella mucosa rettosigmoidea (simile al prick test cutaneo utilizzato per l'allergia clinica) test).
• La reazione intestinale viene determinata visivamente ("reazione ponfo e riacutizzazione") e vengono effettuate biopsie per caratterizzare la risposta immunitaria.
• La preparazione dell'intestino prima dell'indagine segue la normale routine clinica della colonscopia e dell'esame i.v. sedativi e oppioidi vengono somministrati durante l'indagine secondo la routine clinica presso l'unità di endoscopia

ENDOMICROSCOPIA LASER CONFOCAL, CLE, gastroscopia:

• Una tecnica endoscopica basata su sonda per studiare le reazioni alimentari intestinali dopo l'iniezione endovenosa di fluoresceina.
• È possibile determinare la rottura della barriera dell'intestino tenue nel duodeno in seguito all'esposizione ad antigeni alimentari (soia, grano, uova, glutine, latte e controllo).

SENSIBILITÀ VISCERALE:

•Misurazione della sensibilità del barostato rettale: con il barostato rettale, gli investigatori possono misurare la sensibilità rettale. Un palloncino viene inserito e gonfiato nel retto in un ambiente controllato. Il paziente indica quando vengono raggiunte le soglie sensoriali definite (prima sensazione del palloncino, voglia di svuotare l'intestino, disagio o dolore). Quando il paziente segnala disagio o dolore, o un altro motivo per fermarsi, il gonfiaggio del palloncino verrà interrotto.

SIGMOIDOSCOPIA:

•Sigmoidoscopia flessibile senza preparazione intestinale, per interferire il meno possibile con il normale microambiente intestinale; biopsie fresche per analisi specifiche e biopsie conservate per analisi successive.

CAMPIONI BIOLOGICI:

• Campioni di sangue e plasma: vengono prelevati campioni di sangue a digiuno per esami del sangue di routine (esclusione di malattie organiche) e per determinare il profilo metabolico e i marcatori genetici e immunologici rilevanti per la funzione intestinale e la funzione nervosa. I campioni di siero verranno analizzati mediante risonanza magnetica nucleare (NMR) per il profilo metabolomico e la composizione microbica.
• Campione fecale e di urina: i ricercatori caratterizzeranno in dettaglio la composizione e la funzione del metaboloma tramite analisi 16S, metagenomica, trascrittomica, metabolomica, coltura cellulare e conteggio cellulare. I campioni di urina e feci verranno inoltre analizzati mediante risonanza magnetica nucleare (NMR) per il profilo metabolomico e la composizione microbica.
• Biopsie (posizione basata sull'esame endoscopico eseguito): gli investigatori condurranno un'analisi dettagliata di cellule immunitarie, proteine, cellule nervose e batteri intestinali che consentiranno una mappatura dettagliata della funzione intestinale rispetto alla funzione nervosa, immunitaria e di barriera.