Braquispira e reações imunológicas semelhantes a alergias intestinais em pacientes com síndrome do intestino irritável (SII)

O objetivo deste estudo é definir respostas imunes locais no trato GI a antígenos alimentares em pacientes com SII com e sem infecção por Brachyspira usando imagens avançadas. Os investigadores levantam a hipótese de que a infecção por Brachyspira pode causar sintomas de SII, induzindo perda de tolerância oral a antígenos dietéticos através do desenvolvimento de reações imunológicas intestinais específicas de alimentos e subsequente desenvolvimento de hipersensibilidade visceral.

Visita 1: inclusão, questionários, sangue, exame retal barostato Visita 2: questionários, sangue, fezes, diários (alimentos e fezes), sigmoidoscopia (sem laxantes) Visita ao alergologista (teste cutâneo e interpretação dos resultados do sangue) Visita 3: fezes, confocal endomicroscopia a laser (CLE) OU teste colonoscópico de provocação de antígeno (COLAP)

Visite 4,5 e 6 somente se o CLE ou COLAP for positivo para (pelo menos) 1 alimento

Visita 4: questionários e instruções conduzidas por nutricionista sobre qual item alimentar excluir (item alimentar positivo durante CLE/COLAP), exclusão por 4 semanas Visita 5: questionários, diário de fezes, instruções para reintrodução de item(s) alimentar Visita 6 : questionários

QUESTIONÁRIOS Questionários de base; demográficos, sintomas, histórico de sintomas/medicamentos/dieta, condições médicas comórbidas

Sintomas de SII: Escala de Gravidade de Sintomas de SII (IBS-SSS) e Escala de Avaliação de Sintomas Gastrointestinais (GSRS)-IBS

Sofrimento psicológico: Escala Hospitalar de Ansiedade e Depressão (HADS), Questionário de Saúde do Paciente (PHQ)-9 (ambas visitas 1,4,5,6, escala de 7 itens de Transtorno de Ansiedade Generalizada (GAD-7)

Somatização: PHQ-15 para número e gravidade dos sintomas corporais.

Ansiedade específica gastrointestinal: Índice de Sensibilidade Visceral (VSI).

Sensibilidade: Inventário de Sensibilização Central (CSI).

Evitação e restrição alimentar: (ARFID).

Hábitos de fezes e sintomas gastrointestinais: diário de sintomas gastrointestinais de 14 dias baseado na Bristol Stool Form Scale (BSFS).

Qualidade de vida: IBS-Qualidade de Vida (QV).

Ingestão alimentar: diário alimentar de 4 dias, MealQ.

TESTE COLONOSCÓPICO DE PROVOCAÇÃO DE ALERGÊNIOS, COLAP:

• Um teste local de provocação de alérgenos, onde antígenos dietéticos (soja, trigo, (ovo), glúten e leite), com solução salina e histamina como controles negativo e positivo, respectivamente, são injetados na mucosa retossigmóide (semelhante ao teste cutâneo usado para alergia clínica teste).
• A reação intestinal é determinada visualmente ("reação de pápula e erupção") e biópsias são realizadas para caracterizar a resposta imune.
• A preparação intestinal antes da investigação segue a rotina clínica normal para colonoscopia e i.v. sedativos e opioides são administrados durante a investigação de acordo com as rotinas clínicas da unidade de endoscopia

ENDOMICROSCOPIA LASER CONFOCAL, CLE, gastroscopia:

• Uma técnica endoscópica baseada em sonda para estudar reações alimentares intestinais após injeção intravenosa de fluoresceína.
• A ruptura da barreira do intestino delgado no duodeno após exposição a antígenos alimentares (soja, trigo, ovo, glúten, leite e controle) pode ser determinada.

SENSIBILIDADE VISCERAL:

•Medição da sensibilidade do barostato retal: Com o barostato retal, os investigadores podem medir a sensibilidade retal. Um balão é inserido e inflado no reto em um ambiente controlado. O paciente indica quando os limiares sensoriais definidos são atingidos (primeira sensação do balão, vontade de esvaziar o intestino, desconforto ou dor). Quando o paciente indicar desconforto ou dor, ou outro motivo para parar, a insuflação do balão será interrompida.

SIGMOIDOSCOPIA:

•Sigmoidoscopia flexível sem preparo intestinal, para interferir o mínimo possível no microambiente intestinal normal; biópsias frescas para análises específicas e biópsias armazenadas para análises subsequentes.

AMOSTRAS BIOLÓGICAS:

• Amostras de sangue e plasma: Amostras de sangue em jejum são coletadas para exames de sangue de rotina (exclusão de doenças orgânicas) e para determinar o perfil metabólico e marcadores genéticos e imunológicos relevantes para a função intestinal e nervosa. Amostras de soro serão analisadas por ressonância magnética nuclear (RMN) para perfil metabolômico e composição microbiana.
• Amostra fecal e de urina: Os investigadores caracterizarão a composição e função do metaboloma em detalhes por meio de análise 16S, metagenômica, transcriptômica, metabolômica, cultura celular e contagem de células. Amostras de urina e fezes também serão analisadas com ressonância magnética nuclear (RMN) para perfil metabolômico e composição microbiana.
• Biópsias (localização com base no exame endoscópico realizado): Os investigadores conduzirão uma análise detalhada de células imunológicas, proteínas, células nervosas e bactérias intestinais que permitirão mapeamento detalhado da função intestinal em relação à função nervosa, imunológica e de barreira.