Studio pilota PSODEEP2 sull'induzione di Koebner nella psoriasi (PSODEEP2PIL)

STUDIO PILOTA PSODEEP2

Reclutamento dei soggetti di studio:

Gli individui che soddisfano i criteri di inclusione ed esclusione saranno identificati e contattati dallo studio PSODEEP1 (applicazione etica 2023-00571-02 e 2022-02835-01), pubblicità nei social media, pubblicità nella newsletter/rivista inviata dalle organizzazioni di pazienti (Ung med Psoriasis o Psoriasisförbundet) o attraverso il contatto diretto con i pazienti visitati nel reparto di dermatologia (n = 15).

Criterio di inclusione:

Malattia della pelle psoriasica. Esperienza auto-riportata dei fenomeni di Koebner. Età 18 anni o più. Capacità di comprendere le informazioni di studio. Consenso informato firmato e datato.

Criteri di esclusione:

Trattamento immunomodulatore sistemico in corso o pianificato. Trattamento UVB o PUVA a banda stretta in corso o pianificato. Mancanza di pelle idonea e non lesionata sulla parte prossimale del braccio o della coscia a causa di una malattia psoriasica estesa.

Intervento:

La pelle non lesionata di 22 mm di diametro sul braccio o sulla coscia prossimale ad almeno 5 cm dalla lesione psoriasica più vicina sarà identificata e contrassegnata bilateralmente utilizzando un marcatore cutaneo chirurgico. I siti della pelle saranno documentati utilizzando la fotografia digitale e le foto saranno archiviate in REDCap (project-redcap.org). Il nastro verrà attaccato e rimosso dalla pelle 40 volte in tutti e 4 i siti utilizzando dischi di campionamento D-squame da 22 mm e applicatore a pressione D-squame. I nastri devono essere rimossi utilizzando delle pinzette dal personale di ricerca che indossa guanti in nitrile/vinile e spostati sul supporto per dischi D-quame che è codificato/etichettato in modo che ciascun disco di campionamento abbia un codice univoco. I codici vengono trasferiti a REDCap insieme alle informazioni di base sui soggetti di studio. I nastri vengono trasferiti allo stoccaggio -70 in criotubi etichettati (conservati un disco per provetta) prima dell'analisi proteomica. La pelle spogliata del braccio sinistro e della coscia sinistra viene quindi stimolata con un dispositivo a microaghi (Dermapen 4) impostato a 0,8 mm. Ai soggetti dello studio viene chiesto di contattare il gruppo di ricerca se o quando la psoriasi si sviluppa in uno qualsiasi dei quattro siti stimolati. Ai soggetti dello studio verrà chiesto di ispezionare la pelle almeno una volta al giorno. In caso di dubbi sullo sviluppo della psoriasi sarà possibile prenotare un appuntamento per la valutazione della pelle. Se si sviluppa la psoriasi verrà prenotato un secondo appuntamento. Al secondo appuntamento tutte e 4 le località verranno documentate utilizzando la fotografia digitale (e archiviate in REDCap). Le posizioni verranno ricampionate utilizzando 10 dischi di campionamento D-quame da 22 mm per posizione. Nelle sedi che mostrano segni di sviluppo della psoriasi, indurimento, eritema e desquamazione verranno valutati e registrati in REDCap (0-4 punti). In anestesia locale, una biopsia da 4 mm verrà eseguita dalle lesioni psoriasiche sviluppate (K+) (Koebner positive) e inserita in una provetta Eppendorf prima di essere congelata su ghiaccio secco, etichettata con un codice univoco e trasferita in un congelatore -70 prima di ulteriori analisi. Se non si sviluppa psoriasi, i soggetti dello studio verranno prenotati per l'appuntamento 2 circa il giorno 21 dopo l'induzione di Koebner. Per questi soggetti il ​​campionamento della pelle dello strato corneo verrà eseguito in tutti e quattro i siti utilizzando 10 dischi di campionamento D-squame da 2 mm trasferiti sul D-squame Disc Carrier e quindi in criotubi per la conservazione a -70 °C.

Bioanalisi:

Per l'analisi proteomica, le proteine ​​verranno lisate direttamente sulle strisce di nastro e preparate secondo il protocollo precedentemente descritto, dopodiché verrà eseguita la cromatografia liquida-spettrometria di massa (21).

Le biopsie effettuate da lesioni psoriasiche in fase di sviluppo o in fase iniziale verranno analizzate di conseguenza per convalidare lo sviluppo della psoriasi, compresa la valutazione istologica dei segni della psoriasi (paracheratosi, iperplasia psoriasiforme, infiltrazione epidermica neutrofila, vasi dilatati nel derma papillare, perdita dello strato granuloso). Inoltre verranno utilizzate moderne tecniche di analisi del trascrittoma, del proteoma e dell'epigenoma per valutare lo sviluppo della psoriasi.

Significato dello studio:

Lo studio PILOT mira a rispondere alle domande di ricerca:

• L’aggiunta del micro-needling allo stripping con nastro adesivo aumenterà la reattività di Koebner nella pelle affetta da psoriasi non lesionata?
• La reattività di Koebner differisce tra il braccio prossimale e la gamba prossimale?

La risposta a queste domande è essenziale per determinare l’intervento ottimale dello studio principale. Per lo studio principale verranno selezionati il ​​metodo e il luogo che determinano la percentuale più elevata di reazioni Koebner positive. Fornirà inoltre dati proteomici preliminari che potranno facilitare un calcolo più accurato della dimensione del campione per lo studio principale.