Estudo piloto PSODEEP2 sobre indução de Koebner na psoríase (PSODEEP2PIL)

ESTUDO PILOTO PSODEEP2

Recrutamento de sujeitos de estudo:

Indivíduos que atendam aos critérios de inclusão e exclusão serão identificados e contatados a partir do estudo PSODEEP1 (aplicativo ético2023-00571-02 e 2022-02835-01), anúncio em mídia social, anúncio em boletim informativo/revista enviado por organizações de pacientes (Ung med Psoríase ou Psoriasisförbundet) ou através do contato direto com pacientes em consultas no departamento de dermatologia (n = 15).

Critério de inclusão:

Doença de pele psoríase. Experiência autorrelatada dos fenômenos de Koebner. Idade 18 anos ou mais. Capacidade de compreender informações do estudo. Consentimento informado assinado e datado.

Critério de exclusão:

Tratamento imunomodulador sistêmico em andamento ou planejado. Tratamento UVB ou PUVA de banda estreita em andamento ou planejado. Falta de pele não lesionada adequada na parte proximal do braço ou coxa devido a doença psoriásica extensa.

Intervenção:

Pele não lesional com 22 mm de diâmetro no braço proximal ou coxa, pelo menos 5 cm da lesão de psoríase mais próxima, será identificada e marcada bilateralmente usando um marcador cirúrgico de pele. Os skin sites serão documentados por meio de fotografia digital e as fotos serão armazenadas no REDCap (project-redcap.org). A fita será fixada e removida da pele 40 vezes em todos os 4 locais usando discos de amostragem D-squame de 22 mm e aplicador de pressão D-squame. As fitas devem ser removidas com pinças pela equipe de pesquisa usando luvas de nitrila/vinil e movidas para o transportador de discos D-squame, que são codificados/etiquetados para que cada disco de amostragem tenha um código exclusivo. Os códigos são transferidos para o REDCap juntamente com as informações básicas dos sujeitos do estudo. As fitas são transferidas para armazenamento a -70ºC em criotubos rotulados (armazenados um disco por tubo) antes da análise proteômica. A pele desnudada e colada no braço esquerdo e na coxa esquerda é então estimulada com dispositivo de microagulhas (Dermapen 4) ajustado em 0,8 mm. Os sujeitos do estudo são convidados a entrar em contato com o grupo de pesquisa se ou quando a psoríase se desenvolver em qualquer um dos quatro locais estimulados. Os participantes do estudo serão instruídos a inspecionar a pele uma vez ao dia, no mínimo. Se surgir alguma dúvida sobre se a psoríase se desenvolveu, será possível marcar uma consulta para avaliação da pele. Se a psoríase se desenvolver, uma segunda consulta será marcada. Na segunda consulta, todos os 4 locais serão documentados com fotografia digital (e armazenados no REDCap). Os locais serão reamostrados usando 10 discos de amostragem D-squame de 22 mm por local. Em locais que apresentem sinais de desenvolvimento de psoríase, endurecimento, eritema e descamação serão avaliados e registrados no REDCap (0-4 pontos). Na anestesia local, uma biópsia por punch de 4 mm será realizada a partir de lesões de psoríase desenvolvidas (K+) (Koebner positivo) e colocadas em tubo Eppendorf antes de serem congeladas em gelo seco, rotuladas com código único e transferidas para -70 freezer antes de análise posterior. Se nenhuma psoríase se desenvolver, os participantes do estudo serão agendados para consulta 2 aproximadamente no dia 21 após a indução de Koebner. Para esses indivíduos, a amostragem da pele do estrato córneo será realizada em todos os quatro locais usando 10 discos de amostragem D-squame de 2 mm transferidos para o D-squame Disc Carrier e depois para criotubos para armazenamento a -70 °C.

Bioanálise:

Para análise proteômica, as proteínas serão lisadas diretamente nas tiras de fita e preparadas de acordo com o protocolo previamente descrito, após o qual será realizada cromatografia líquida-espectrometria de massa (21).

Biópsias por punção de lesões de psoríase em desenvolvimento ou iniciais serão analisadas de acordo para validar o desenvolvimento da psoríase, incluindo avaliação histológica de sinais de psoríase (paraqueratose, hiperplasia psoriasiforme, infiltração neutrofílica epidérmica, vasos dilatados na derme papilar, perda do estrato granuloso). Além disso, técnicas modernas de análise do transcriptoma, proteoma e epigenoma serão utilizadas para avaliar o desenvolvimento da psoríase.

Significância do estudo:

O estudo PILOT visa responder a questões de pesquisa:

• A adição de microagulhamento à fita adesiva aumentará a reatividade de Koebner na pele não lesional com psoríase?
• A reatividade de Koebner difere entre o braço proximal e a perna proximal?

A resposta a estas questões é essencial para determinar a intervenção ideal do estudo principal. O método e local que resultar na maior proporção de reações positivas de Koebner serão selecionados para o estudo principal. Também fornecerá dados proteômicos preliminares que podem facilitar um cálculo mais preciso do tamanho da amostra para o estudo principal.