PSODEEP2-pilottitutkimus Koebnerin induktiosta psoriaasissa (PSODEEP2PIL)

PSODEEP2 PILOTTUTKIMUS

Opintoaineen rekrytointi:

Sisällytämis- ja poissulkemiskriteerit täyttävät henkilöt tunnistetaan ja niihin otetaan yhteyttä PSODEEP1-tutkimuksesta (eettinen hakemus 2023-00571-02 ja 2022-02835-01), mainoksesta sosiaalisessa mediassa, potilasjärjestöjen lähettämässä uutiskirjeessä/lehdessä (Ung med Psoriasis tai Psoriasisförbundet) tai suoran kontaktin kautta ihotautien osastolla käyneiden potilaiden kanssa (n = 15).

Sisällyttämiskriteerit:

Psoriasis ihosairaus. Itseraportoitu kokemus Koebner-ilmiöistä. Ikä 18 vuotta tai vanhempi. Kyky ymmärtää opiskelutietoa. Allekirjoitettu ja päivätty tietoinen suostumus.

Poissulkemiskriteerit:

Meneillään oleva tai suunniteltu systeeminen immunomodulatorinen hoito. Meneillään oleva tai suunniteltu kapeakaistainen UVB- tai PUVA-hoito. Sopivan ei-leesionaalisen ihon puute proksimaalisesta käsivarresta tai reidestä laajan psoriaasin vuoksi.

Interventio:

Ei-leesionaalinen iho, jonka halkaisija on 22 mm proksimaalisessa käsivarressa tai reidessä vähintään 5 cm lähimmästä psoriaasivauriosta, tunnistetaan ja merkitään molemminpuolisesti käyttämällä kirurgista ihomerkkiä. Skin sivustot dokumentoidaan digitaalisella valokuvauksella ja valokuvat tallennetaan REDCapiin (project-redcap.org). Teippi kiinnitetään ja poistetaan iholta 40 kertaa kaikissa 4 kohdassa käyttämällä D-squame 22 mm näytteenottolevyjä ja D-squame paineapplikaattoria. Nitriili/vinyylikäsineitä käyttävän tutkijahenkilöstön on poistettava teipit pinseteillä ja siirrettävä D-squame Disc Carrieriin, joka on koodattu/merkitty siten, että jokaisella näytteenottolevyllä on yksilöllinen koodi. Koodit siirretään REDCapille yhdessä opiskelijoiden taustatietojen kanssa. Nauhat siirretään -70 °C:n säilytykseen leimatuissa kryoputkissa (säilytetään yksi levy putkea kohti) ennen proteomista analyysiä. Vasemman käsivarren ja vasemman reiden teipattua kuorittua ihoa stimuloidaan sitten mikroneulalaitteella (Dermapen 4), joka on asetettu 0,8 mm:iin. Tutkittavia pyydetään ottamaan yhteyttä tutkimusryhmään, jos tai kun psoriaasi kehittyy jossakin neljästä stimuloidusta kohdasta. Tutkittavia opastetaan tarkastamaan iho vähintään kerran päivässä. Jos ilmenee epävarmuutta psoriaasin kehittymisestä, on mahdollista varata aika ihon arviointiin. Jos psoriasis kehittyy, varataan toinen aika. Toisella tapaamisella kaikki 4 paikkaa dokumentoidaan digitaalisella valokuvauksella (ja tallennetaan REDCapiin). Paikat otetaan uudelleen näytteet käyttämällä 10 D-squame 22 mm näytteenottolevyä paikkaa kohden. Paikoissa, joissa on merkkejä psoriaasin kehittymisestä, kovettuma, punoitus ja hilseily arvioidaan ja kirjataan REDCap:iin (0-4 pistettä). Paikallispuudutuksessa tehdään 4 mm:n lyöntibiopsia kehittyneistä psoriaasivaurioista (K+) (Koebner-positiivinen) ja laitetaan Eppendorf-putkeen ennen jäätymistä kuivajäällä, merkitään ainutlaatuisella koodilla ja siirretään -70 pakastimeen ennen lisäanalyysiä. Jos psoriaasia ei esiinny, koehenkilöt varataan tapaamiseen 2 noin päivänä 21 Koebnerin induktion jälkeen. Näille koehenkilöille sarveiskerroksen ihonäytteet otetaan kaikista neljästä paikasta käyttämällä 10 D-squame 2 mm:n näytteenottokiekkoa, jotka siirretään D-squame Disc Carrier -laitteeseen ja sitten kryoputkiin säilytettäväksi -70 °C:ssa.

Bioanalyysi:

Proteomista analyysiä varten proteiinit lyysataan suoraan teippiliuskoille ja valmistetaan aiemmin kuvatun protokollan mukaisesti, minkä jälkeen suoritetaan nestekromatografia-massaspektrometria (21).

Kehittyvistä tai varhaisista psoriaasivaurioista saadut punch-biopsiat analysoidaan vastaavasti psoriaasin kehittymisen validoimiseksi, mukaan lukien psoriaasin merkkien histologinen arviointi (parakeratoosi, psoriaasia muistuttava hyperplasia, epidermaalinen neutrofiilinen infiltraatio, laajentuneet verisuonet papillaarisessa dermiksessä, granulosumin katoaminen). Lisäksi psoriaasin kehittymisen arvioinnissa käytetään moderneja tekniikoita, jotka analysoivat transkriptiota, proteomia ja epigenomia.

Tutkimuksen merkitys:

PILOT-tutkimuksen tavoitteena on vastata tutkimuskysymyksiin:

• Lisääkö mikroneulauksen lisääminen teipin poistamiseen Koebnerin reaktiivisuutta ei-leesionaalisessa psoriaasissa?
• Onko Koebner-reaktiivisuus eroa proksimaalisen käsivarren ja proksimaalisen jalan välillä?

Vastaukset näihin kysymyksiin ovat välttämättömiä päätutkimuksen optimaalisen toimenpiteen määrittämiseksi. Päätutkimukseen valitaan menetelmä ja sijainti, joka johtaa suurempaan osuuteen Koebner-positiivisista reaktioista. Se tarjoaa myös alustavia proteomitietoja, jotka voivat helpottaa tarkempaa otoskoon laskemista päätutkimuksessa.