Пилотное исследование PSODEEP2 по индукции Кебнера при псориазе (PSODEEP2PIL)

ПИЛОТНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ PSODEEP2

Набор субъектов исследования:

Лица, соответствующие критериям включения и исключения, будут выявлены и с ними свяжутся в рамках исследования PSODEEP1 (этическое заявление 2023-00571-02 и 2022-02835-01), рекламы в социальных сетях, рекламы в информационном бюллетене/журнале, рассылаемом организациями пациентов (Ung med Psoriasis или Psoriasisförbundet) или при непосредственном контакте с пациентами при посещении дерматологического отделения (n = 15).

Критерии включения:

Заболевание кожи псориаз. Самоотчетный опыт феномена Кебнера. Возраст 18 лет и старше. Умение воспринимать учебную информацию. Подписанное и датированное информированное согласие.

Критерий исключения:

Продолжающееся или планируемое системное иммуномодулирующее лечение. Текущее или запланированное узкополосное лечение UVB или PUVA. Отсутствие подходящей неповрежденной кожи на проксимальной части руки или бедра из-за обширного псориатического заболевания.

Вмешательство:

Неповрежденная кожа диаметром 22 мм на проксимальной части руки или бедра на расстоянии не менее 5 см от ближайшего очага псориаза будет идентифицирована и отмечена двусторонне с помощью хирургического кожного маркера. Сайты скинов будут документированы с использованием цифровых фотографий, а фотографии будут храниться в REDCap (project-redcap.org). Ленту прикрепляют и удаляют с кожи 40 раз на всех 4 участках с использованием дисков для отбора проб D-squame диаметром 22 мм и аппликатора D-squame. Исследовательский персонал должен удалять ленты с помощью пинцета в нитриловых/виниловых перчатках и перемещать их в держатель для дисков D-squame, который закодирован/маркирован таким образом, чтобы каждый диск для отбора проб имел уникальный код. Коды передаются в REDCap вместе со справочной информацией об объектах исследования. Ленты переносят на хранение при температуре -70°С в маркированные криопробирки (хранятся по одному диску в пробирке) перед протеомным анализом. Заклеенную лентой зачищенную кожу на левой руке и левом бедре затем стимулируют микроиглами (Dermapen 4), установленными на 0,8 мм. Субъектов исследования просят связаться с исследовательской группой, если или когда псориаз разовьется на любом из четырех стимулированных участков. Субъектам исследования будет поручено осматривать кожу как минимум один раз в день. Если возникнет неуверенность в том, развился ли псориаз, можно будет записаться на прием для оценки состояния кожи. Если разовьется псориаз, будет назначен второй прием. На втором приеме все 4 места будут задокументированы с помощью цифровых фотографий (и сохранены в REDCap). Из локаций будут повторно взяты пробы с использованием 10 дисков для отбора проб D-образной формы диаметром 22 мм в каждой локации. В местах, где наблюдаются признаки развития псориаза, будут оцениваться уплотнения, эритема и шелушение и фиксироваться в REDCap (0–4 балла). Под местной анестезией из очагов развившегося псориаза (К+) (положительный результат Кебнера) будет выполнена пункционная биопсия диаметром 4 мм, которая будет помещена в пробирку Эппендорфа, а затем заморожена на сухом льду, помечена уникальным кодом и перенесена в морозильную камеру с температурой -70 перед дальнейшим анализом. Если псориаз не разовьется, субъекты исследования будут записаны на второй прием примерно через 21 день после индукции по Кебнеру. Для этих субъектов отбор проб рогового слоя кожи будет осуществляться во всех четырех местах с использованием 10 дисков для отбора проб D-squame диаметром 2 мм, которые будут помещены в держатель для дисков D-squame, а затем в криопробирки для хранения при -70 °C.

Биоанализ:

Для протеомного анализа белки будут лизированы непосредственно на полосках ленты и подготовлены в соответствии с ранее описанным протоколом, после чего будет выполнена жидкостная хроматография-масс-спектрометрия (21).

Пункционные биопсии развивающихся или ранних очагов псориаза будут проанализированы соответствующим образом для подтверждения развития псориаза, включая гистологическую оценку признаков псориаза (паракератоз, псориазоформная гиперплазия, эпидермальная нейтрофильная инфильтрация, расширение сосудов в сосочковой дерме, потеря зернистого слоя). Кроме того, для оценки развития псориаза будут использоваться современные методы анализа транскриптома, протеома и эпигенома.

Значение исследования:

Целью исследования PILOT является ответ на исследовательские вопросы:

• Повысит ли добавление микроигл к стриппингу лентой реактивность Кебнера на неповрежденной коже, пораженной псориазом?
• Различается ли реактивность Кебнера в проксимальных отделах руки и проксимальной части ноги?

Ответы на эти вопросы необходимы для определения оптимального вмешательства основного исследования. Для основного исследования будут выбраны метод и место, которые приводят к более высокой доле положительных реакций Кебнера. Он также предоставит предварительные протеомные данные, которые могут способствовать более точному расчету размера выборки для основного исследования.