Pilotní studie PSODEEP2 o Koebnerově indukci u psoriázy (PSODEEP2PIL)

PSODEEP2 PILOTNÍ STUDIE

Nábor studijního předmětu:

Jednotlivci splňující kritéria pro zařazení a vyloučení budou identifikováni a kontaktováni ze studie PSODEEP1 (etická přihláška2023-00571-02 a 2022-02835-01), inzerce na sociálních sítích, inzerce v newsletteru/časopise zasílaném pacientskými organizacemi (Ung med Psoriasis nebo Psoriasisförbundet) nebo přímým kontaktem s návštěvami pacientů na kožním oddělení (n = 15).

Kritéria pro zařazení:

Psoriáza kožní onemocnění. Vlastní zkušenost Koebnerových jevů. Věk 18 let nebo starší. Schopnost porozumět studijním informacím. Podepsaný a datovaný informovaný souhlas.

Kritéria vyloučení:

Probíhající nebo plánovaná systémová imunomodulační léčba. Probíhající nebo plánovaná úzkopásmová léčba UVB nebo PUVA. Nedostatek vhodné kůže bez lézí na proximální paži nebo stehně v důsledku rozsáhlého psoriatického onemocnění.

Zásah:

Kůže bez lézí o průměru 22 mm na proximální paži nebo stehně alespoň 5 cm od nejbližší psoriatické léze bude identifikována a bilaterálně označena pomocí chirurgického kožního markeru. Stránky kůže budou zdokumentovány pomocí digitální fotografie a fotografie budou uloženy v REDCap (project-redcap.org). Páska bude připevněna a odstraněna z kůže 40krát na všech 4 místech pomocí vzorkovacích kotoučů D-squame 22 mm a tlakového aplikátoru D-squame. Pásky mají být odstraněny pomocí pinzety výzkumným personálem v nitrilových/vinylových rukavicích a přesunuty do nosiče disků D-squame, které jsou kódovány/označeny tak, že každý odběrový disk má jedinečný kód. Kódy se přenášejí do REDCap spolu s podkladovými informacemi o studijních předmětech. Pásky se před proteomickou analýzou přenesou do -70 °C ve značených kryozkumavkách (uložených jeden disk na zkumavku). Stažená kůže na levé paži a levém stehně je poté stimulována mikrojehlovým přístrojem (Dermapen 4) nastaveným na 0,8 mm. Účastníci studie jsou požádáni, aby kontaktovali výzkumnou skupinu, pokud nebo když se psoriáza rozvine na kterémkoli ze čtyř stimulovaných míst. Účastníci studie budou instruováni, aby si prohlédli kůži minimálně jednou denně. Pokud vznikne nejistota, zda se lupénka rozvinula, bude možné objednat se na vyšetření kůže. Pokud se psoriáza objeví, bude rezervován druhý termín. Při druhé schůzce budou všechna 4 místa zdokumentována pomocí digitální fotografie (a uložena v REDCap). Místa budou převzorkována pomocí 10 D-squame 22mm vzorkovacích kotoučů na místo. V místech se známkami rozvoje psoriázy se zhodnotí indurace, erytém a šupinatění a zaznamená se do REDCap (0-4 body). V lokální anestezii bude provedena biopsie o průměru 4 mm z rozvinutých psoriázových lézí (K+) (Koebner pozitivní) a vložena do Eppendorfovy zkumavky před zmrazením na suchém ledu, označena jedinečným kódem a přenesena do -70 mrazáku před další analýzou. Pokud se nevyvine žádná psoriáza, pak budou subjekty studie rezervovány na schůzku 2 přibližně 21. den po Koebnerově indukci. U těchto subjektů bude odběr vzorků kůže stratum corneum proveden na všech čtyřech místech s použitím 10 vzorkovacích kotoučů D-squame 2 mm přenesených do nosiče disků D-squame a poté do kryozkumavek pro skladování při -70 °C.

Bioanalýza:

Pro proteomickou analýzu budou proteiny lyžovány přímo na páskových proužcích a připraveny podle dříve popsaného protokolu, poté bude provedena kapalinová chromatografie-hmotnostní spektrometrie (21).

Punch biopsie z vyvíjejících se nebo časných psoriázových lézí budou analyzovány v souladu s validací vývoje psoriázy včetně histologického hodnocení známek psoriázy (parakeratóza, psoriasiformní hyperplazie, epidermální neutrofilní infiltrace, dilatační cévy v papilární dermis, ztráta stratum granulosum). K hodnocení rozvoje psoriázy budou navíc použity moderní techniky analyzující transkriptom, proteom a epigenom.

Význam studie:

PILOT studie si klade za cíl odpovědět na výzkumné otázky:

• Zvýší přidání mikrojehlování ke stripování pásky Koebnerovu reaktivitu v kůži s psoriázou bez lézí?
• Liší se Koebnerova reaktivita mezi proximální paží a proximální nohou?

Odpověď na tyto otázky je zásadní pro stanovení optimální intervence hlavní studie. Pro hlavní studii bude vybrána metoda a místo, které povede k vyššímu podílu Koebnerových pozitivních reakcí. Poskytne také předběžná proteomická data, která mohou usnadnit přesnější výpočet velikosti vzorku pro hlavní studii.