Estudio piloto PSODEEP2 sobre la inducción de Koebner en la psoriasis (PSODEEP2PIL)

ESTUDIO PILOTO DE PSODEEP2

Reclutamiento de sujetos de estudio:

Las personas que cumplan con los criterios de inclusión y exclusión serán identificadas y contactadas desde el estudio PSODEEP1 (aplicación ética 2023-00571-02 y 2022-02835-01), anuncios en las redes sociales, anuncios en boletines/revistas enviados por organizaciones de pacientes (Ung med Psoriasis o Psoriasisförbundet) o mediante contacto directo con visitas de pacientes al departamento de dermatología (n = 15).

Criterios de inclusión:

Enfermedad de la piel psoriasis. Experiencia autoinformada de los fenómenos de Koebner. Edad 18 años o más. Capacidad para comprender la información del estudio. Consentimiento informado firmado y fechado.

Criterio de exclusión:

Tratamiento inmunomodulador sistémico en curso o planificado. Tratamiento con UVB o PUVA de banda estrecha en curso o planificado. Falta de piel adecuada no lesionada en la parte proximal del brazo o del muslo debido a una enfermedad psoriásica extensa.

Intervención:

Piel no lesionada de 22 mm de diámetro en la parte proximal del brazo o muslo al menos a 5 cm de la lesión de psoriasis más cercana se identificará y marcará bilateralmente utilizando un marcador cutáneo quirúrgico. Los sitios de la piel se documentarán mediante fotografía digital y las fotografías se almacenarán en REDCap (project-redcap.org). La cinta se colocará y retirará de la piel 40 veces en los 4 sitios utilizando discos de muestreo D-squame de 22 mm y un aplicador de presión D-squame. El personal de investigación debe retirar las cintas con pinzas y usar guantes de nitrilo/vinilo y trasladarlas al transportador de discos escamosos D, que están codificados/etiquetados para que cada disco de muestreo tenga un código único. Los códigos se transfieren a REDCap junto con los antecedentes de los sujetos del estudio. Las cintas se transfieren a almacenamiento a -70ºC en criotubos etiquetados (almacenados un disco por tubo) antes del análisis proteómico. Luego se estimula la piel pelada con cinta adhesiva en el brazo izquierdo y el muslo izquierdo con un dispositivo de microagujas (Dermapen 4) ajustado a 0,8 mm. Se pide a los sujetos del estudio que se comuniquen con el grupo de investigación si se desarrolla psoriasis en cualquiera de los cuatro sitios estimulados. Se indicará a los sujetos del estudio que inspeccionen la piel una vez al día como mínimo. Si surge incertidumbre sobre si se ha desarrollado psoriasis, será posible programar una cita para una evaluación de la piel. Si se desarrolla psoriasis se programará una segunda cita. En la segunda cita, las 4 ubicaciones se documentarán mediante fotografía digital (y se almacenarán en REDCap). Las ubicaciones se volverán a muestrear utilizando 10 discos de muestreo D-squame de 22 mm por ubicación. En los lugares que muestren signos de desarrollo de psoriasis, la induración, el eritema y la descamación se evaluarán y registrarán en REDCap (0-4 puntos). Con anestesia local, se realizará una biopsia por punción de 4 mm a partir de lesiones de psoriasis desarrolladas (K+) (Koebner positivo) y se colocará en un tubo Eppendorf antes de congelarse en hielo seco, etiquetarse con un código único y transferirse a un congelador -70 antes de realizar más análisis. Si no se desarrolla psoriasis, se programará a los sujetos del estudio para la cita 2 aproximadamente el día 21 después de la inducción de Koebner. Para estos sujetos, se realizará un muestreo de piel del estrato córneo en los cuatro sitios utilizando 10 discos de muestreo de 2 mm de escama D transferidos a un portador de disco de escama D y luego a criotubos para su almacenamiento a -70 °C.

Bioanálisis:

Para el análisis proteómico, las proteínas se lisarán directamente en las tiras de cinta y se prepararán de acuerdo con el protocolo descrito previamente, después de lo cual se realizará cromatografía líquida-espectrometría de masas (21).

Las biopsias por punción de lesiones de psoriasis tempranas o en desarrollo se analizarán en consecuencia para validar el desarrollo de la psoriasis, incluida la evaluación histológica de los signos de psoriasis (paraqueratosis, hiperplasia psoriasiforme, infiltración neutrofílica epidérmica, vasos dilatados en la dermis papilar, pérdida del estrato granuloso). Además, se utilizarán técnicas modernas que analizan el transcriptoma, el proteoma y el epigenoma para evaluar el desarrollo de la psoriasis.

Importancia del estudio:

El estudio PILOT tiene como objetivo responder preguntas de investigación:

• ¿La adición de microagujas a la extracción de cinta aumentará la reactividad de Koebner en la piel con psoriasis no lesionada?
• ¿La reactividad de Koebner difiere entre el brazo proximal y la pierna proximal?

La respuesta a estas preguntas es fundamental para determinar la intervención óptima del estudio principal. Para el estudio principal se seleccionará el método y la ubicación que produzcan la mayor proporción de reacciones positivas de Koebner. También proporcionará datos proteómicos preliminares que pueden facilitar un cálculo más preciso del tamaño de la muestra para el estudio principal.