Badanie pilotażowe PSODEEP2 dotyczące indukcji Koebnera w łuszczycy (PSODEEP2PIL)

BADANIE PILOTAŻOWE PSODEEP2

Rekrutacja do badania:

Osoby spełniające kryteria włączenia i wykluczenia zostaną zidentyfikowane i skontaktujemy się z nimi w ramach badania PSODEEP1 (wniosek etyczny 2023-00571-02 i 2022-02835-01), ogłoszenie w mediach społecznościowych, ogłoszenie w biuletynie/magazynie rozsyłanym przez organizacje pacjentów (Ung med Psoriasis lub Psoriasisförbundet) lub poprzez bezpośredni kontakt z pacjentami podczas wizyt na oddziale dermatologicznym (n = 15).

Kryteria przyjęcia:

Łuszczyca choroba skóry. Samoopisowe doświadczenie zjawisk Koebnera. Wiek 18 lat lub więcej. Umiejętność zrozumienia informacji związanych z nauką. Podpisana i datowana świadoma zgoda.

Kryteria wyłączenia:

Trwające lub planowane ogólnoustrojowe leczenie immunomodulacyjne. Trwające lub planowane wąskopasmowe leczenie UVB lub PUVA. Brak odpowiedniej, pozbawionej zmian skóry na bliższym ramieniu lub udzie z powodu rozległej choroby łuszczycowej.

Interwencja:

Zidentyfikowana zostanie skóra bez zmian o średnicy 22 mm na bliższym ramieniu lub udzie, w odległości co najmniej 5 cm od najbliższej zmiany łuszczycowej i oznakowana obustronnie za pomocą chirurgicznego markera skórnego. Miejsca na skórze zostaną udokumentowane przy użyciu fotografii cyfrowej, a zdjęcia zostaną zapisane w REDCap (project-redcap.org). Taśma zostanie przymocowana i usunięta ze skóry 40 razy we wszystkich 4 miejscach przy użyciu krążków do pobierania próbek D-squame 22 mm i aplikatora ciśnieniowego D-squame. Taśmy mają zostać usunięte za pomocą pęsety przez personel badawczy w rękawiczkach nitrylowych/winylowych i przeniesione do nośnika krążków D-squame, który jest zakodowany/opisany w taki sposób, że każdy krążek do pobierania próbek ma niepowtarzalny kod. Kody są przesyłane do REDCap wraz z podstawowymi informacjami o uczestnikach badania. Taśmy przenosi się do magazynu -70°C w oznakowanych krioprobówkach (przechowuje się jeden krążek na probówkę) przed analizą proteomiczną. Następnie oklejoną taśmą skórę na lewym ramieniu i lewym udzie stymuluje się urządzeniem z mikroigłami (Dermapen 4) ustawionym na 0,8 mm. Osoby biorące udział w badaniu proszone są o kontakt z grupą badawczą, jeśli lub kiedy łuszczyca rozwinie się w którymkolwiek z czterech stymulowanych miejsc. Uczestnicy badania zostaną poinstruowani, aby sprawdzać skórę przynajmniej raz dziennie. W przypadku wątpliwości, czy łuszczyca już się rozwinęła, istnieje możliwość umówienia się na ocenę stanu skóry. Jeżeli rozwinie się łuszczyca, umówiona zostanie druga wizyta. Podczas drugiej wizyty wszystkie 4 lokalizacje zostaną udokumentowane za pomocą fotografii cyfrowej (i zapisane w REDCap). Lokalizacje zostaną ponownie pobrane przy użyciu 10 krążków próbkujących w kształcie kwadratu D o średnicy 22 mm na każdą lokalizację. W miejscach wykazujących oznaki rozwoju łuszczycy oceniane będzie stwardnienie, rumień i łuszczenie się i rejestrowane w REDCap (0-4 punkty). W znieczuleniu miejscowym zostanie wykonana biopsja sztancowa o średnicy 4 mm z rozwiniętych zmian łuszczycowych (K+) (pozytywny wynik w skali Koebnera) i umieszczona w probówce Eppendorfa przed zamrożeniem w suchym lodzie, oznaczona unikalnym kodem i przeniesiona do zamrażarki - 70 przed dalszą analizą. Jeśli nie rozwinie się łuszczyca, uczestnicy badania zostaną zapisani na wizytę 2 około 21 dnia po indukcji Koebnera. W przypadku tych osób pobierane będą próbki skóry z warstwy rogowej naskórka we wszystkich czterech miejscach przy użyciu 10 krążków do pobierania próbek o średnicy 2 mm typu D-squame przeniesionych do nośnika krążków D-squame, a następnie do krioprobówek w celu przechowywania w temperaturze -70°C.

Bioanaliza:

Do analizy proteomicznej białka zostaną poddane lizie bezpośrednio na paskach taśmy i przygotowane zgodnie z wcześniej opisanym protokołem, po czym zostanie przeprowadzona chromatografia cieczowa ze spektrometrią mas (21).

Biopsje punktowe z rozwijających się lub wczesnych zmian łuszczycowych zostaną odpowiednio przeanalizowane w celu potwierdzenia rozwoju łuszczycy, w tym histologicznej oceny objawów łuszczycy (parakeratoza, rozrost łuszczycopodobny, naciek neutrofilów w naskórku, rozszerzone naczynia w skórze brodawkowatej, utrata warstwy ziarnistej). Dodatkowo do oceny rozwoju łuszczycy zostaną wykorzystane nowoczesne techniki analizy transkryptomu, proteomu i epigenomu.

Znaczenie badania:

Badanie PILOT ma na celu odpowiedzieć na pytania badawcze:

• Czy dodanie mikronakłuwania do usuwania taśmy zwiększy reaktywność Koebnera w skórze z łuszczycą bez zmian?
• Czy reaktywność Koebnera różni się w przypadku bliższego ramienia i bliższej części nogi?

Odpowiedź na te pytania jest niezbędna do określenia optymalnej interwencji w badaniu głównym. Do głównego badania zostanie wybrana metoda i lokalizacja, które spowodują większy odsetek pozytywnych reakcji Koebnera. Dostarczone zostaną również wstępne dane proteomiczne, które mogą ułatwić dokładniejsze obliczenie wielkości próby do głównego badania.